發(fā)布時(shí)間：2019-11-04 22:02

【摘要】：目的觀察羥基磷灰石(HAP)對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞株HK-2細(xì)胞骨橋蛋白(OPN)表達(dá)的影響,探討HAP在腎結(jié)石形成中的作用機(jī)制。方法體外培養(yǎng)HK-2細(xì)胞,分為正常對(duì)照組、HAP1組、HAP2組、HAP3組及HAP4組。正常對(duì)照組在正常培養(yǎng)液中培養(yǎng),HAP1~4組分別在正常培養(yǎng)液中加入200、400、600、800 ng/m L的HAP懸液。各組培養(yǎng)至12、24、48、72 h時(shí),采用CCK-8法檢測細(xì)胞活力。培養(yǎng)至24 h時(shí),采用RT-q PCR法檢測各組細(xì)胞中OPN mRNA的表達(dá),采用Western blot法檢測各組細(xì)胞中OPN蛋白的表達(dá)。結(jié)果隨著HAP濃度增加,細(xì)胞存活率逐漸降低,細(xì)胞存活率與HAP的濃度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.566 3,P0.01)。隨著HAP作用時(shí)間延長,細(xì)胞存活率逐漸降低,細(xì)胞存活率與HAP作用時(shí)間呈負(fù)相關(guān)(r=-0.796 3,P0.01)。正常對(duì)照組、HAP1組、HAP2組、HAP3組、HAP4組OPN mRNA相對(duì)表達(dá)量分別為1.151±0.029、1.201±0.004、1.269±0.029、1.179±0.022、1.406±0.058,HAP2組、HAP4組OPN mRNA相對(duì)表達(dá)量均高于正常對(duì)照組(P均0.05)。正常對(duì)照組、HAP1組、HAP2組、HAP3組、HAP4組OPN蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為0.418±0.010、0.436±0.016、0.512±0.021、0.562±0.016、0.627±0.023,HAP2、HAP3、HAP4組OPN蛋白相對(duì)表達(dá)量均高于正常對(duì)照組(P均0.05)。結(jié)論 HAP可使人腎小管上皮細(xì)胞出現(xiàn)損傷并上調(diào)OPN表達(dá),可能是其參與腎結(jié)石形成的機(jī)制之一。

【參考文獻(xiàn)】

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