【摘要】：目的：腎細(xì)胞癌（Renal cell carcinoma, RCC）又稱(chēng)腎腺癌，是指起源于腎小管上皮細(xì)胞的惡性腫瘤，占腎臟惡性腫瘤的80%-90%，全球每年大約有20余萬(wàn)人被診斷為腎癌。在我國(guó)泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤中，其發(fā)病率僅次于膀胱癌而居第2位。因此，探討腎細(xì)胞癌的發(fā)病機(jī)制，特別是分子水平的研究以尋找新的治療靶點(diǎn)及有效的治療藥物，具有十分重要的意義。近年來(lái)，Wnt信號(hào)通路與腫瘤關(guān)系的研究已經(jīng)變成熱點(diǎn)問(wèn)題，研究發(fā)現(xiàn)Wnt信號(hào)通路中因子異常激活，都有可能導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生惡性化。Dickkopf-1(DKK-1)、Dickkopf-3(DKK-3)基因作為Wnt信號(hào)通路中的抑癌基因，其在腎細(xì)胞癌組織中的作用尚未明確。本課題以RCC為研究對(duì)象，應(yīng)用RT-PCR技術(shù)和免疫組織化學(xué)的方法，通過(guò)研究DKK-1、DKK-3在腎細(xì)胞癌中mRNA和蛋白表達(dá)情況，試圖揭示這兩種抑癌基因與腎細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后中的作用和相互關(guān)系，從而為腎細(xì)胞癌的病因、診斷及治療提供新的理論、實(shí)驗(yàn)依據(jù)和治療新途徑。 方法： 1采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription-polymerase chainreaction，RT-PCR）技術(shù)分別檢測(cè)經(jīng)過(guò)病理證實(shí)的36例腎細(xì)胞癌組織和正常腎組織中抑癌基因DKK-1、DKK-3的mRNA表達(dá)情況。 2應(yīng)用免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry, IHC）PV-9000二步法分別檢測(cè)經(jīng)過(guò)病理證實(shí)的47例腎細(xì)胞癌組織和31例正常腎組織中DKK-1、DKK-3的蛋白表達(dá)情況。 3運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以P0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1腎細(xì)胞癌組織中DKK-1、DKK-3基因的表達(dá)及其與臨床病理資料之間的關(guān)系 1.1腎細(xì)胞癌組織中DKK-1、DKK-3基因mRNA表達(dá)情況 DKK-1基因mRNA在腎細(xì)胞癌和正常腎組織中的表達(dá)量分別為0.21±0.06和0.28±0.05，DKK-3基因mRNA在腎細(xì)胞癌和正常腎組織中的表達(dá)量分別為0.65±0.15和0.79±0.13，腎細(xì)胞癌組織中DKK-1、DKK-3基因的mRNA表達(dá)量明顯低于正常腎組織，兩者的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 1.2腎細(xì)胞癌組織中DKK-1、DKK-3基因蛋白表達(dá)情況 47例腎細(xì)胞癌組織中，其中有28例DKK-1基因蛋白表達(dá)為陽(yáng)性，陽(yáng)性表達(dá)率為59.5%；正常腎組織31例，其中28例DKK-1基因蛋白表達(dá)為陽(yáng)性，陽(yáng)性表達(dá)率為90.3%，腎細(xì)胞癌組織中DKK-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于正常腎組織（P0.05），隨腎細(xì)胞癌TNM分期的升高，DKK-1陽(yáng)性表達(dá)率有下降趨勢(shì)。腫瘤最大徑≤7.0cm組陽(yáng)性表達(dá)率結(jié)果79.3%（23/29）顯著高于腫瘤最大徑＞7.0cm組陽(yáng)性表達(dá)率44.4%(8/18)。在無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽(yáng)性表達(dá)率66.8%（22/33）相比有區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率10.3%（1/14）顯著增高，兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），而DKK-1在患者性別和年齡的陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)明顯區(qū)別，兩者差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 47例腎細(xì)胞癌組織中，其中31例DKK-3基因蛋白表達(dá)陽(yáng)性，表達(dá)陽(yáng)性率為65.9%；正常腎細(xì)胞組織31例，其中29例DKK-3基因蛋白表達(dá)陽(yáng)性，表達(dá)陽(yáng)性率為93.5%，腎細(xì)胞癌組織中DKK-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于正常腎組織（P0.05），DKK-3的陽(yáng)性表達(dá)率，在Ⅱ期與Ⅲ+Ⅳ期相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。腫瘤最大徑≤7.0cm組陽(yáng)性表達(dá)率的結(jié)果72.4%（21/29）顯著高于腫瘤最大徑＞7.0cm組陽(yáng)性表達(dá)率33.3%(6/18)，在無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率60.6%（3/14）相比有區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率21.4%（3/14）顯著增高，，兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），而DKK-3在患者性別和年齡的陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)明顯區(qū)別，兩者差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 2腎細(xì)胞癌中DKK-1表達(dá)與DKK-3表達(dá)之間無(wú)相關(guān)性（r=0.148，P=0.3220.01）。 結(jié)論： 1DKK-1、DKK-3的mRNA和蛋白在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)明顯的低于正常腎組織，提示DKK-1和DKK-3表達(dá)下調(diào)可能使其拮抗Wnt信號(hào)通路的功能減弱，一定程度上參與了腎細(xì)胞癌的發(fā)生，兩者有可能作為判斷腎細(xì)胞癌預(yù)后的指標(biāo)。 2DKK-1、DKK-3表達(dá)與腫瘤TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤大小有關(guān)，而與患者的年齡、性別無(wú)關(guān)，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性表達(dá)率，腫瘤最大徑≤7.0cm組陽(yáng)性表達(dá)率結(jié)果顯著高于腫瘤最大徑＞7.0cm組陽(yáng)性表達(dá)率，且DKK-1陽(yáng)性表達(dá)率隨TNM分期的增高有下降趨勢(shì)。提示DKK-1、DKK-3在腎細(xì)胞癌組織中的低表達(dá)可能參與了腎細(xì)胞癌的發(fā)展，浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。 3DKK-1、DKK-3與腎細(xì)胞癌的臨床病理特征密切相關(guān)，均呈現(xiàn)低表達(dá)，但二者之間可能無(wú)相關(guān)性。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R737.11

【參考文獻(xiàn)】

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1 肖述兵;彭碧華;萬(wàn)金龍;鄭祖祥;;Dkk-3在原發(fā)性肝細(xì)胞癌的表達(dá)及其臨床意義[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2012年16期

2 張妍;呂威力;;Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及其生物學(xué)活性[J];沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2007年03期

3 侯安麗;李秀芬;張雅麗;楊冬蕊;蘇曉霞;;DKK1、SFRP4和Wnt1在宮頸鱗癌中的表達(dá)及意義[J];天津醫(yī)藥;2013年11期

4 徐小燕;夏蒲;邢亞楠;張東晗;高野康雄;鄭華川;;胃癌中REIC蛋白分泌水平及其增殖抑制作用研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2011年05期

5 丁振;錢(qián)葉本;熊奇如;余宏鑄;李方躍;張超;許業(yè)傳;;DKK-3和WIF-1基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)與肝細(xì)胞癌的關(guān)系研究[J];實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志;2009年03期

6 ;Methylation of Dickkopf-3 as a prognostic factor in cirrhosis-related hepatocellular carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2010年06期

7 余艷軍;萬(wàn)曉楨;于彬;游海燕;舒惠群;姚根富;覃文新;;Dickkopf(DKK1)在肝癌組織及多種人腫瘤細(xì)胞系中的表達(dá)分析[J];腫瘤;2006年12期

8 ;Plasma DNA methylation of Wnt antagonists predicts recurrence of esophageal squamous cell carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2011年44期

9 朱崴;李偉;郭長(zhǎng)城;孫偉;王光春;劉敏;耿江;彭波;鄭軍華;;DKK-1與DKK-3在前列腺癌患者血清中的表達(dá)及臨床意義[J];腫瘤;2013年10期

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1 聶艷婷;β-catenin和DKK-1在宮頸鱗癌中的表達(dá)及意義[D];中南大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2536041