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有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)雄性大鼠生精功能的影響及其睪丸iTRAQ定量蛋白組學(xué)分析

發(fā)布時(shí)間:2019-04-29 11:18
【摘要】:目的:探討有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)雄性大鼠生精功能的影響,并通過(guò)蛋白組學(xué)篩選睪丸中有生精調(diào)控作用的差異表達(dá)蛋白,為進(jìn)一步研究其分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法:24只SD雄性大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和運(yùn)動(dòng)組,對(duì)照組不進(jìn)行運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練。運(yùn)動(dòng)組分為無(wú)負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組和3%體重負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組,每天連續(xù)游泳60 min,無(wú)負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組為無(wú)負(fù)重游泳,3%體重負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組大鼠負(fù)荷3%體重重物游泳,每周6次,運(yùn)動(dòng)共9周。大鼠末次運(yùn)動(dòng)24 h后進(jìn)行精子計(jì)數(shù)、生殖激素測(cè)定和睪丸組織學(xué)分析,并將3%體重負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組和對(duì)照組睪丸組織進(jìn)行同重同位素相對(duì)與絕對(duì)定量(iTRAQ)蛋白組學(xué)分析。結(jié)果:3%體重負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組大鼠精子濃度[(3.54±0.52)×10~6/ml]明顯高于對(duì)照組[(2.12±0.43)×10~6/ml],P0.01;血清LH[(38.96±1.34)IU/L]和T[(21.36±0.53)nmol/L]也顯著高于對(duì)照組[LH:(35.99±2.90)IU/L,T:(19.99±0.25)nmol/L,P均0.01];GnRH和FSH兩組無(wú)顯著差異[GnRH:(641.82±42.78)ng/L vs(623.95±41.44)ng/L,FSH:(22.29±2.31)IU/L vs(20.49±2.44)IU/ml,P均0.05]。無(wú)負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組精子濃度、生殖激素水平與對(duì)照組相比均無(wú)顯著變化。組織學(xué)分析顯示3%體重負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組大鼠生精上皮內(nèi)細(xì)胞層數(shù)較對(duì)照組明顯增多,成熟精子數(shù)增加。蛋白組學(xué)分析篩查到差異蛋白47個(gè),其中上調(diào)蛋白37個(gè),下調(diào)蛋白10個(gè)。經(jīng)過(guò)生物信息學(xué)分析篩選出與生殖功能密切相關(guān)的顯著差異表達(dá)蛋白5個(gè),其中Anx A1、GPX3、Rimbp3、Dpy19l2表達(dá)上調(diào),CYP17表達(dá)下調(diào)。KEGG通路富集分析顯示,差異蛋白主要參與了細(xì)胞外基質(zhì)-受體相互作用通路、蛋白質(zhì)消化與吸收通路、黏著斑信號(hào)通路等。結(jié)論:有氧運(yùn)動(dòng)可能主要通過(guò)改變精子發(fā)生與分化相關(guān)的蛋白表達(dá)來(lái)提高機(jī)體的生精功能。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of aerobic exercise on spermatogenic function of male rats, and to screen the differentially expressed proteins with spermatogenic regulation in testis by proteomics, so as to lay a foundation for further study of its molecular mechanism. Methods: 24 male SD rats were randomly divided into two groups: control group and exercise group. The exercise group was divided into two groups: no-load exercise group and 3% weight-loading exercise group. The rats in the 3% weight-load exercise group had no weight-bearing swimming in the 60 min, exercise-free exercise group, and the rats in the 3% weight-load exercise group had a load of 3% weight swimming, six times a week, for a total of 9 weeks. The sperm count, reproductive hormone and testicular histology were measured 24 hours after the last exercise, and the testis tissues of the 3% exercise group and the control group were analyzed with the same weight isotope relative to the absolute quantitative (iTRAQ) proteomics. Results: the sperm concentration in the 3% body weight exercise group [(3.54 鹵0.52) 脳 10~6/ml] was significantly higher than that in the control group [(2.12 鹵0.43) 脳 10~6/ml], P 0.01; Serum LH [(38.96 鹵1.34) IU/L] and T [(21.36 鹵0.53) nmol/L] were also significantly higher than those in the control group [LH: (35.99 鹵2.90) IU/L,T: (19.99 鹵0.25) nmol/L,P]. There was no significant difference between GnRH and FSH groups [GnRH: (641.82 鹵42.78) ng/L vs (623.95 鹵41.44) ng/L,FSH:, (22.29 鹵2.31) IU/L vs (20.49 鹵2.44) IU/ml,P]. There were no significant changes in sperm concentration and reproductive hormone level between the non-load exercise group and the control group. Histological analysis showed that the number of intracytoplasmic layers of spermatogenic epithelium and the number of mature spermatozoa in the 3% body weight exercise group were significantly higher than those in the control group. 47 differential proteins were detected by proteomics analysis, including 37 up-regulated proteins and 10 down-regulated proteins. The expression of Anx A1, GPX3, Rimbp3, Dpy19l2 was up-regulated and the expression of CYP17 was down-regulated by bioinformatics analysis. KEGG pathway enrichment analysis showed that the expression of Dpy19l2 was up-regulated and the expression of Dpy19l2 was down-regulated. Differential proteins are mainly involved in extracellular matrix-receptor interaction pathway, protein digestion and absorption pathway, focal adhesion signal pathway and so on. Conclusion: aerobic exercise may improve spermatogenic function by changing the expression of spermatogenesis and differentiation-related proteins.
【作者單位】: 北京體育大學(xué)運(yùn)動(dòng)康復(fù)系;安陽(yáng)師范學(xué)院體育學(xué)院;黃淮學(xué)院生物與食品工程學(xué)院;福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】:河南省科技計(jì)劃(132300410084) 北京體育大學(xué)校自主課題(2016BS044)~~
【分類號(hào)】:R698.2

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本文編號(hào):2468204

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