【摘要】：目的通過(guò)篩選對(duì)促進(jìn)前列腺癌PC3細(xì)胞系增值效應(yīng)鉻的價(jià)態(tài)、濃度及暴露時(shí)間。進(jìn)一步探討低劑量鉻對(duì)該細(xì)胞系生物學(xué)行為的影響,初步探索其作用機(jī)制。方法通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)、CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同價(jià)態(tài)、不同濃度鉻暴露不同時(shí)間后對(duì)前列腺癌PC3細(xì)胞系的影響,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定所需鉻試劑,鉻的劑量及暴露時(shí)間;根據(jù)MTT、CCK-8實(shí)驗(yàn)所得相關(guān)價(jià)態(tài)、濃度及作用時(shí)間,采用單克隆實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證低劑量鉻暴露對(duì)前列腺癌PC3細(xì)胞的增殖效應(yīng);通過(guò)細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)明確低劑量鉻對(duì)前列腺癌PC3細(xì)胞系的生物學(xué)行為影響;小鼠成瘤實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步觀察研究體內(nèi)鉻暴露對(duì)前列腺癌的影響;通過(guò)人類轉(zhuǎn)錄基因組測(cè)序進(jìn)一步探索低劑量鉻暴露促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞增殖效應(yīng)的機(jī)制,通過(guò)Western Blot實(shí)驗(yàn)初步探索相關(guān)機(jī)制。結(jié)果MTT、CCK-8實(shí)驗(yàn)顯示0.4umol/L鉻酸鉀暴露48小時(shí)后對(duì)前列腺癌細(xì)胞有顯著的促進(jìn)增殖效應(yīng)。單克隆形成實(shí)驗(yàn)證實(shí)了這一結(jié)果。0.4umol/L鉻酸鉀暴露48小時(shí)后促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞遷徙、細(xì)胞侵襲,對(duì)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期無(wú)明顯作用。通過(guò)小鼠成瘤實(shí)驗(yàn),5mg/kg/day的鉻酸鉀促進(jìn)小鼠腫瘤增長(zhǎng)。通過(guò)對(duì)經(jīng)0.4μmol/L鉻酸鉀暴露48小時(shí)后的前列腺癌細(xì)胞與未經(jīng)處理的前列腺癌細(xì)胞基因分析。結(jié)果顯示經(jīng)0.4umol/L鉻酸鉀處理后的標(biāo)本與空白組標(biāo)本存在差異表達(dá)基因,差異表現(xiàn)在生物學(xué)過(guò)程、細(xì)胞成分及分子機(jī)制,共表現(xiàn)出759個(gè)差異基因(387個(gè)上調(diào)基因,372個(gè)下調(diào)基因)。Western Blot結(jié)果顯示經(jīng)0.4umol/L鉻酸鉀處理后可促進(jìn)PC3細(xì)胞Vimentin高表達(dá),提示低劑量鉻暴露促進(jìn)前列腺癌PC3細(xì)胞EMT,進(jìn)而證實(shí)低劑量鉻暴露可促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞增殖、遷移及侵襲。結(jié)論低劑量鉻暴露促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲,促進(jìn)體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)。在生物學(xué)過(guò)程、細(xì)胞成分及分子機(jī)制等方面存在差異基因。Vimentin高表達(dá),促進(jìn)前列腺癌PC3細(xì)胞EMT,進(jìn)而影響前列腺癌細(xì)胞增殖、遷移及侵襲。
[Abstract]:Objective to screen the valence, concentration and exposure time of chromium (Cr) to promote the proliferation of prostate cancer cell line PC3. To explore the effect of low dose chromium on the biological behavior of the cell line, and to explore its mechanism. Methods the effects of different valence states and different concentrations of chromium on prostate cancer cell line PC3 were detected by MTT test and CCK-8 assay. The dosage and exposure time of chromium reagent and chromium were determined according to the results of the experiment. The effect of low dose chromium exposure on the proliferation of prostate cancer PC3 cells was further verified by monoclonal assay according to the relative valence, concentration and action time of MTT,CCK-8 test. The biological behavior of prostate cancer cell line PC3 was determined by cell migration, invasion, apoptosis and cell cycle assay, and the effect of chromium exposure on prostate cancer was further observed in mice. The mechanism of promoting proliferation of prostate cancer cells by low-dose chromium exposure was further investigated by sequencing of human transcriptional genomes, and the related mechanisms were preliminarily explored by Western Blot assay. Results MTT,CCK-8 assay showed that 0.4umol/L potassium chromate significantly promoted the proliferation of prostate cancer cells 48 hours after exposure. After 48 hours of exposure to 0.4 umol / L potassium chromate, the migration and invasion of prostate cancer cells were promoted, but there was no obvious effect on cell apoptosis and cell cycle. 5mg/kg/day potassium chromate promoted tumor growth in mice by tumorigenicity test. The genes of prostate cancer cells and untreated prostate cancer cells exposed to 0.4 渭 mol / L potassium chromate for 48 hours were analyzed. The results showed that there were 759 differentially expressed genes in the biological process, cell composition and molecular mechanism between the samples treated with 0.4umol/L potassium chromate and those in the blank group, and a total of 759 up-regulated genes were found in the samples treated with potassium chromate. The results of 372 down-regulated genes). Western Blot showed that 0.4umol/L potassium chromate treatment could promote the high expression of Vimentin in PC3 cells, suggesting that low dose chromium exposure could promote EMT, expression in PC3 cells of prostate cancer. Furthermore, low-dose chromium exposure can promote proliferation, migration and invasion of prostate cancer cells. Conclusion low dose chromium exposure can promote the proliferation, migration and invasion of prostate cancer cells and promote the growth of prostate cancer cells in vivo. The high expression of vimentin promotes the proliferation, migration and invasion of prostate cancer cells by promoting EMT, in prostate cancer PC3 cells.
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R737.25

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本文編號(hào)：2431870