【摘要】：目的：眾所周知，前列腺癌是嚴(yán)重威脅男性健康的惡性腫瘤。2008年美國有186320例新增患者，并有28660例患者死于前列腺癌，前列腺癌已成為危害男性健康的第一位腫瘤。在我國，隨著人口老齡化、飲食結(jié)構(gòu)和生活方式的不斷改變，前列腺癌的發(fā)病率和死亡率也有逐年上升的趨勢，故前列腺癌的早期診斷和早期治療顯得極為重要。目前診斷前列腺癌的基本方法是直腸指檢、經(jīng)直腸超聲和血清前列腺特異性抗原(prostate-specific antigen,PSA)，但仍存在一定的漏診率。腫瘤標(biāo)志物在腫瘤診斷方面有著敏感性高、特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，，它的廣泛應(yīng)用對惡性腫瘤的診斷、鑒別診斷、治療及判斷預(yù)后提供了有力的臨床依據(jù)。目前對前列腺腫瘤標(biāo)志物的研究進(jìn)展較為緩慢，尚無法滿足臨床需求。因此，尋求更多有效提高輔助診斷前列腺癌的腫瘤標(biāo)志物有重要意義。磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican-3GPC-3）是硫酸乙酰肝素糖蛋白（heparan sulfate ProteoglycanHAPG)家族中的一員。目前認(rèn)為HAPG中的HS鏈與生長因子及其受體、細(xì)胞外基質(zhì)蛋白等大量生物效應(yīng)分子相互作用，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞形態(tài)及其粘附、增殖、遷移、存活和分化等作用，因此考慮GPC-3可參與上述細(xì)胞調(diào)節(jié)作用。自1996年被發(fā)現(xiàn)以來GPC-3，其作為肝細(xì)胞癌(hepatocellularcarcinoma HCC)腫瘤標(biāo)志物的研究較為廣泛。α-胎兒蛋白（AFP）在肝細(xì)胞癌中的診斷意義已被充分肯定。Abdelgawad等用ELISA法分析60例樣本血清GPC-3和α-胎兒蛋白（AFP）（包括40例肝癌、10例肝硬化病人及10例健康對照），RT-PCR擴(kuò)增方法檢測GPC-3和AFP在mRNA水平的表達(dá)并進(jìn)行分析，結(jié)果表明GPC-3在肝細(xì)胞癌中的敏感性和特異性均高于AFP。研究顯示GPC-3基因在不同癌組織細(xì)胞中具有不同的作用和意義。本實(shí)驗(yàn)欲研究GPC-3蛋白在前列腺癌中的表達(dá)和意義，為臨床前列腺癌的診斷提供輔助手段。 方法：實(shí)驗(yàn)選取1998年至2012年白求恩國際和平醫(yī)院泌尿外科前列腺癌和前列腺增生組織標(biāo)本各30例。實(shí)驗(yàn)組前列腺腺癌30例，患者年齡56歲～89歲，平均73歲。前列腺體積平均73.30m（l13.89ml~192.20ml），血清總PSA(電化學(xué)發(fā)光法)平均51.8ng/ml（6.6ng/ml~177ng/ml），按Fuhrman組織學(xué)分級：高分化4例，中分化8例，低分化18例；Gleason評分平均7.1分（5分~9分）。UICC分期：Ⅰ＋Ⅱ期:22例；Ⅲ＋Ⅳ期:8例；有骨轉(zhuǎn)移5例，盆腔轉(zhuǎn)移1例。另選同期前列腺增生組織標(biāo)本30例作為對照組，患者年齡43歲~79歲，平均69.8歲，前列腺體積平均77.10ml（13.84ml~189.20ml）；血清總PSA平均4.3ng/m（l1.8ng/ml~15.3ng/ml）。 標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定，石蠟常規(guī)包埋，5um連續(xù)切片2張，GPC-3免疫組化染色。免疫組化按P-V法進(jìn)行操作。設(shè)陽性對照和陰性對照，以試劑盒自帶的陽性片免疫組化染色結(jié)果為陽性對照，以PBS替代一抗,前列腺癌組織免疫組化染色結(jié)果為陰性對照。 結(jié)果判定：GPC-3陽性表達(dá)標(biāo)準(zhǔn)以細(xì)胞質(zhì)著色為準(zhǔn)，呈棕黃色顆粒，細(xì)胞染色強(qiáng)度明顯高于背景呈棕黃色者為陽性。采用半定量計(jì)分法判定，選取5個(gè)高倍鏡視野（400倍），按切片中陽性細(xì)胞比例及染色深淺分別記0～4分：陽性細(xì)胞5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，75%為4分；按染色深淺分別記0～3分，染色深度以多數(shù)細(xì)胞為準(zhǔn)，無陽性細(xì)胞為0分，黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；總積分為陽性細(xì)胞的百分率得分與免疫染色強(qiáng)度的得分的乘積，按總積分將結(jié)果分成4級：0分為（－），1～2分為（＋），3～4分為（＋＋），5～12分為（＋＋＋）。其中（－）和（＋）為低表達(dá)，（＋＋）和（＋＋＋）為高表達(dá)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用四格表卡方檢驗(yàn)，P0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1GPC-3蛋白在前列腺癌組織中高表達(dá)（＋＋、＋＋＋）占63.3%（19/30）明顯高于前列腺增生20%（6/30），兩組差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2GPC-3蛋白在Gleason評分大于和等于7分的前列腺癌組織中高表達(dá)73.0%（19/26），明顯高于Gleason評分小于7的前列腺癌組織0（4），兩組差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3在30例前列腺癌病人血清前列腺特異性抗原（total prostate specificantigen, TPSA）數(shù)值可看出，隨著TPSA數(shù)值的升高，GPC-3蛋白高表達(dá)的比例有上升的趨勢。 結(jié)論: 1GPC-3蛋白在前列腺癌組織中高表達(dá)率明顯高于前列腺增生，表明GPC-3蛋白與前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展可能存在一定關(guān)系。其機(jī)理有待于進(jìn)一步研究。 2GPC-3蛋白在Gleason評分大于和等于7與小于7的兩組前列腺癌組織中表達(dá)存在明顯差異，表明GPC-3蛋白可能與前列腺癌的分化、分級及惡性程度有關(guān)。
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【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R737.25

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2396960