【摘要】：目的:橫紋肌溶解癥(rhabdomyolysis,RM)是指由多種原因引起的橫紋肌細胞溶解、破壞,以及肌內容物釋放進入血液循環(huán),導致的生化紊亂及多臟器損傷的臨床綜合征。近年來,隨著生活習慣的變化,由于長跑、進食小龍蝦、醉酒等導致的RM發(fā)病率明顯升高,嚴重者危及患者生命。腎臟是RM最多見的受累器官,急性腎損傷(acute kidney injury,AKI)伴隨RM整個病程,部分發(fā)展至急性腎衰竭的患者由于缺乏有效治療而不愈。研究發(fā)現(xiàn)炎癥反應、氧化應激、Ca2+穩(wěn)態(tài)失調、細胞的毒性作用、活性氧以及自由基等是其重要病理生理機制,其中炎癥反應作為人類絕大多數(shù)損傷性疾病的重要病理機制,在急性腎損傷中的作用尤其受到重視。髓樣細胞分化因子88(Myeloid ifferentiationfactor88,MyD88)和腫瘤壞死因子受體相關因子6(Tumour-necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)為炎癥反應的重要轉導蛋白,在多條信號途徑中發(fā)揮關鍵作用。本實驗通過肌注甘油建立大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷的動物模型,觀察腎臟損傷情況,并應用免疫組化染色和western blot方法檢測大鼠腎臟MyD88和TRAF6的表達,對橫紋肌溶解致急性腎損傷的發(fā)病機制進行研究,同時觀察了鹽酸戊乙奎醚干預對其保護作用。通過我們的研究有望對橫紋肌溶解致急性腎損傷的發(fā)病機制有進一步了解,對臨床防治提供理論及實踐依據(jù)。方法:將42只清潔級SD大鼠隨機分為:(1)對照組(Control,CN組,n=6):給大鼠雙后肢肌注生理鹽水;(2)急性腎損傷模型組(AKI組,n=18),給大鼠雙后肢注射甘油;(3)鹽酸戊乙奎醚組(Penehyclidine Hydrochloride,P組,n=18),在甘油肌注前30分鐘分別腹腔注射鹽酸戊乙奎醚。AKI組和P組根據(jù)注射及取材時間又分為三個亞組:1h組、6h組和24h組,每組6只大鼠。在相應時間點腹腔麻醉后,收集血液及腎組織標本。對血清指標行肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和磷酸肌酸激酶(CK)測定;腎臟組織行HE染色,觀察病理學改變;應用免疫組化染色及western blot法檢測腎組織MyD88和TRAF6蛋白的表達。統(tǒng)計分析:實驗數(shù)據(jù)均采用IBM SPSS21.0軟件包進行統(tǒng)計學處理,計量資料以均數(shù)±標準差(`x±s)表示。各組間均數(shù)比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA),以P0.05認為有統(tǒng)計學意義。結果:(1)與CN組比較,AKI組BUN、Cr、CK均明顯增高(P0.01),其中BUN、Cr濃度呈逐漸升高趨勢,CK也升高,但在6小時達到高峰,后回落。P組BUN、Cr、CK濃度較對照組也明顯升高(P0.01),且與AKI組趨勢相同,但與同期AKI組相比,Cr、BUN濃度明顯降低(P0.05,P0.01),CK濃度下降不明顯(P0.05)。(2)HE染色顯示CN組大鼠腎組織結構完整、形態(tài)無明顯變化;AKI 1h組腎小管上皮細胞結構欠清、輕度水腫、呈顆粒狀變性,腎小球皺縮;AKI 6h組可見腎小管管腔擴張,小管上皮細胞腫脹、空泡樣變,管腔內出現(xiàn)大量管型,間質內炎癥細胞浸潤;AKI 24組腎小管管腔明顯擴張,部分腎小管上皮細胞出現(xiàn)壞死、脫落、刷r澇迪，

本文編號：2374809