【摘要】：目的:探索前列腺癌組織中血管抑制蛋白-1(vasohibin-1,VASH-1)的表達(dá)特性,以及其表達(dá)與相關(guān)血管活性因子CD34、血管內(nèi)皮生長因子-A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)及缺氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表達(dá)的相關(guān)性,初步了解VASH-1對(duì)血管生成的影響。研究VASH-1及VEGF-A、HIF-1α分別在前列腺癌細(xì)胞系LNCa P、C4-2、PC3及DU145中的表達(dá)情況,并探討VASH-1過表達(dá)對(duì)前列腺癌細(xì)胞增殖及侵襲等細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,明確其是否可以作為一個(gè)新的指標(biāo)評(píng)估和預(yù)測前列腺癌的進(jìn)展,以及其是否具有抗腫瘤作用。方法:(1)采用免疫組織化學(xué)染色的方法對(duì)60例前列腺癌組織進(jìn)行染色,分別檢測VASH-1、VEGF-A及HIF-1α的平均累積光密度值(average optical density,AOD),并測定CD34標(biāo)記的微血管密度(microvessel density,MVD)值,運(yùn)用Spearman等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)分析其相關(guān)性。(2)培養(yǎng)前列腺癌細(xì)胞系LNCa P、C4-2、PC3及DU145,分別提取細(xì)胞總蛋白及總RNA,通過Western Blot、PCR及Real-time PCR實(shí)驗(yàn)重復(fù)檢測四種細(xì)胞系中VASH-1、VEGF-A及HIF-1α的表達(dá)情況,之后用重組質(zhì)粒p Receiver-M61-VASH-1轉(zhuǎn)染VASH-1表達(dá)水平較低的兩個(gè)前列腺癌細(xì)胞系,應(yīng)用MTT實(shí)驗(yàn)及Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)探索過表達(dá)VASH-1對(duì)前列腺癌細(xì)胞增殖及侵襲的影響。結(jié)果:(1)VASH-1主要表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞及前列腺癌癌細(xì)胞胞漿中,并且其在前列腺癌癌細(xì)胞胞漿中的表達(dá)量明顯多于血管內(nèi)皮細(xì)胞胞漿中;CD34表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞漿中;VEGF-A主要表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞及癌細(xì)胞的胞漿及胞核中;HIF-1α主要表達(dá)于癌細(xì)胞胞核中。VASH-1及CD34、VEGF-A、HIF-1α的表達(dá)均隨著Gleason評(píng)分、p T分期的升高及伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有增加的趨勢,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但與患者的年齡及前列腺特異性抗原(prostate specific antigen,PSA)水平無明顯相關(guān)性(P0.05)。VASH-1與CD34、VEGF-A及HIF-1α的表達(dá)之間具有顯著正相關(guān)性(P0.05)。(2)通過Western Blot、PCR及Real-time PCR實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)VASH-1、VEGF-A及HIF-1α在PC3及DU145細(xì)胞系中的表達(dá)含量均高于LNCa P及C4-2細(xì)胞系;用重組質(zhì)粒p Receiver-M61-VASH-1轉(zhuǎn)染LNCa P及C4-2后,通過Western Blot實(shí)驗(yàn)證實(shí)過表達(dá)VASH-1組中VASH-1的表達(dá)量明顯高于正常細(xì)胞組及對(duì)照組(P0.05);MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示轉(zhuǎn)染質(zhì)粒48小時(shí)及72小時(shí)后,過表達(dá)VASH-1組的光密度值(optical density,OD)明顯低于正常細(xì)胞組及對(duì)照組(P0.05);Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)提示,與正常細(xì)胞組及對(duì)照組相比,過表達(dá)VASH-1組穿過濾膜的細(xì)胞數(shù)有明顯增加,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:(1)在前列腺癌組織中,VASH-1不僅只表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞中,其在癌細(xì)胞中也有大量表達(dá),并且隨著VASH-1表達(dá)水平的增加,提示前列腺癌惡性程度的增加。VASH-1的表達(dá)特征與CD34、VEGF-A及HIF-1α三種血管活性因子的表達(dá)間存在高度一致性,證明VASH-1對(duì)血管生成具有一定影響作用。(2)重組質(zhì)粒p Receiver-M61-VASH-1可以促進(jìn)LNCa P及C4-2細(xì)胞系中VASH-1的表達(dá)。(3)過表達(dá)VASH-1后可以有效抑制LNCa P及C4-2的增殖及侵襲。(4)綜上,VASH-1可能參與了前列腺癌的血管生成,其有望成為一個(gè)新的指標(biāo)評(píng)估和預(yù)測前列腺癌的進(jìn)展,并且具有一定抗腫瘤作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R737.25

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 張博;高瓊瓊;吳周亮;唐剛;吳長利;田晶;胡海龍;;前列腺癌中血管抑制蛋白-1的表達(dá)及臨床意義[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2017年01期

2 田昊;吳育棟;李彥君;晏濱;柯炳虎;尚芝群;牛遠(yuǎn)杰;;腎透明細(xì)胞癌中血管抑制蛋白-1與微血管密度的檢測及臨床意義[J];臨床泌尿外科雜志;2015年03期

3 武世伍;俞嵐;承澤農(nóng);宋文慶;周蕾;陶儀聲;;Expression of Maspin in Non-small Cell Lung Cancer and Its Relationship to Vasculogenic Mimicry[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2012年03期

4 蒲建軍;劉勝來;宋希江;;前列腺癌血管生成靶向治療的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年13期

5 王妍青;王偉華;徎一郎;李曉萌;;雄激素受體在前列腺癌細(xì)胞系中作用的研究進(jìn)展[J];國際泌尿系統(tǒng)雜志;2011年03期

6 ;Molecular regulation of vasculogenic mimicry in tumors and potential tumor-target therapy[J];World Journal of Gastrointestinal Surgery;2010年04期

7 蔡宣松,賈永偉,梅炯,湯如勇;Tumor blood vessels formation in osteosarcoma:vasculogenesis mimicry[J];Chinese Medical Journal;2004年01期

，

本文編號(hào)：2372654