發(fā)布時(shí)間：2018-07-02 11:34

  本文選題：1磷酸鞘氨醇 + 1磷酸鞘氨醇受體1-3��； 參考：《瀘州醫(yī)學(xué)院》2014年碩士論文

【摘要】：目的：高血壓與勃起功能障礙（ED）之間有密切聯(lián)系，高血壓并發(fā)ED可能與高血壓狀態(tài)下陰莖海綿體組織內(nèi)皮功能障礙、eNOS活性及表達(dá)下調(diào)以及RhoA/Rho激酶信號通路上調(diào)有關(guān)，而eNOS、RhoA/Rho激酶的上游調(diào)控與1磷酸鞘氨醇(S1P)有關(guān)，S1P是一類具有生物活性的鞘脂介質(zhì)，作為一個(gè)細(xì)胞外配體，與其相應(yīng)的細(xì)胞膜受體—S1P受體(SIP receptor)相結(jié)合觸發(fā)相應(yīng)的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，與不同的S1P受體結(jié)合發(fā)揮不同的生物學(xué)效應(yīng)。而高血壓狀態(tài)下S1P與eNOS、RhoA/Rho激酶的關(guān)系目前不清楚。本研究在于探討自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）與正常血壓大鼠（WKY）陰莖海綿體內(nèi)1磷酸鞘氨醇受體1-3（S1P1-3）表達(dá)的變化，闡明S1P1-3在陰莖勃起中的作用及其與eNOS/NO、RhoA/Rho激酶信號通路之間的關(guān)系。方法：成年健康雄性SPF級SHR與WKY大鼠各10只，14周齡大小，體重約為250-300g，隨機(jī)分為SHR組、WKY對照組。麻醉前首先稱量大鼠體重，以1%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔內(nèi)注射麻醉各組大鼠，仔細(xì)分離并暴露出大鼠右側(cè)頸總動(dòng)脈，用充滿肝素生理鹽水的26G針頭穿刺成功后將其連接于壓力換能器，連續(xù)監(jiān)測大鼠頸動(dòng)脈平均動(dòng)脈壓(MAP)的變化。沿下腹正中線打開腹腔，于前列腺兩側(cè)葉后方找到星狀的海綿體盆神經(jīng)節(jié)作為電刺激點(diǎn)，以充滿肝素生理鹽水的24G針頭插入大鼠陰莖海綿體固定并連接到壓力換能器，測定大鼠海綿體內(nèi)壓(ICP)。給予海綿體盆神經(jīng)節(jié)不同強(qiáng)度的電刺激（刺激強(qiáng)度分別為0V、3V5V，波幅為5ms，刺激頻率12Hz，持續(xù)刺激時(shí)間45s，刺激時(shí)間間隔3min）。采用壓力換能器記錄ICPmax/MAP值。實(shí)驗(yàn)大鼠勃起功能測定完畢后，取陰莖海綿體標(biāo)本并采血，檢測兩組大鼠血清睪酮水平及血清S1P水平。將陰莖海綿體標(biāo)本分為兩部分，一部分立即用于免疫組化分析，另一部分于-80℃超低溫冰箱保存，供Western-blot實(shí)驗(yàn)分析。免疫組化和Western-blot印跡方法分別檢測S1P1-3、P-eNOS（Ser-1177）、eNOS、ROCK1、ROCK2在大鼠陰莖海綿體中的表達(dá)。結(jié)果：血清睪酮水平SHR組（430.89±98.67）ng/dl與對照組（492.93±54.23）ng/dl無顯著差異。0V電壓時(shí)SHR組ICPmax/MAP比值（0.109±0.014）較對照組（0.155±0.011）顯著降低（P0.05）；3V、5V電刺激海綿體盆神經(jīng)節(jié)后SHR組ICPmax/MAP比值（0.190±0.013、0.219±0.014）均較對照組（0.393±0.018、0.524±0.019）極顯著降低（P0.01）。血清S1P水平SHR組（4.156±0.362） ng/ml與對照組（4.549±0.876）ng/ml無顯著差異。免疫組化結(jié)果顯示S1P1主要表達(dá)在血管內(nèi)皮細(xì)胞胞膜，，S1P2主要表達(dá)在海綿體平滑肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞，S1P3主要表達(dá)在血管內(nèi)皮細(xì)胞胞膜和海綿體平滑肌細(xì)胞，P-eNOS、eNOS主要表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞和海綿竇腔內(nèi)，ROCK1、ROCK2主要表達(dá)于海綿體血管平滑肌細(xì)胞胞漿中，陽性顆粒呈棕黃色染色。免疫組化數(shù)據(jù)分析采用積分光密度值(IOD)表示，顯示S1P1、P-eNOS、eNOS在SHR組表達(dá)顯著低于對照組（P 0.05），S1P2、S1P3、ROCK1、ROCK2在SHR組表達(dá)顯著高于對照組（P 0.05）。Western blot印跡顯示S1P1、P-eNOS、eNOS在SHR陰莖海綿體中表達(dá)的相對光密度值較對照組顯著降低（P 0.05），S1P2、S1P3、ROCK1、ROCK2在SHR陰莖海綿體中表達(dá)的相對光密度值較對照組顯著升高（P 0.05）。結(jié)論：高血壓并發(fā)ED可能與陰莖海綿體內(nèi)S1P1表達(dá)下調(diào)并抑制eNOS/NO信號通路，S1P2、S1P3表達(dá)升高并激活RhoA/Rho激酶信號通路有關(guān)。
[Abstract]:Objective : To study the relationship between hypertension and erectile dysfunction ( ED ) . The serum testosterone levels and serum S1P levels were measured by pressure transducer . The serum testosterone levels and serum S1P levels were measured by immunohistochemistry and Western - blot . Results : Serum testosterone level in SHR group ( 430 . 89 鹵 98.67 ) ng / dl was significantly lower than that of control group ( 492.93 鹵 54.23 ) ng / dl .
Immunohistochemical analysis showed that the expression of S1P1 , P - eNOS and eNOS in SHR group was significantly lower than that of the control group ( P 0.05 ) , and the expression of S1P1 , P - eNOS and eNOS in SHR group was significantly lower than that of the control group ( P 0.05 ) . Western blot analysis showed that the relative optical density of S1P1 , P - eNOS and eNOS was significantly lower than that of the control group ( P 0.05 ) , and the relative optical density values of S1P1 , S1P2 , S1P2 , S1P2 , S1P2 , S1P3 , respectively were significantly higher than those in the control group ( P 0.05 ) . Conclusion : The expression of S1P1 and the expression of eNOS / NO signaling pathway , S1P2 , S1P3 in the cavernous body of the penile cavernous body may be regulated by the ED and the activation of the signal pathway of RhoA / rho kinase .
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R544.1;R698

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 劉云飛;胡禮泉;宋健;鄭新民;李世文;;自發(fā)性高血壓大鼠勃起功能及海綿體形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變[J];解剖學(xué)雜志;2006年01期

2 鄧青富;姜睿;朱平宇;王瀟然;;血紅素氧合酶2在去勢大鼠陰莖海綿體內(nèi)的表達(dá)[J];中華男科學(xué)雜志;2008年06期

3 劉競;姜睿;;血紅素氧合酶在去勢大鼠陰莖海綿體的表達(dá)[J];中華男科學(xué)雜志;2009年03期

4 劉繼紅;凌青;;高血壓與勃起功能障礙相互關(guān)系研究進(jìn)展[J];中華男科學(xué)雜志;2011年08期

本文編號：2089984