本文選題：腎細(xì)胞癌 + 微小RNA-a-p�。� 參考：《山東醫(yī)藥》2017年38期

【摘要】：目的觀察miRNA-30a-5p過(guò)表達(dá)對(duì)腎癌細(xì)胞株786-0增殖、凋亡的影響,并探討其機(jī)制。方法將腎癌細(xì)胞株786-0分為模擬物組、抑制物組、未轉(zhuǎn)染組,模擬物組轉(zhuǎn)染miRNA-30a-5p模擬物,抑制物組轉(zhuǎn)染miRNA-30a-5p抑制物,未轉(zhuǎn)染組為正常腎癌細(xì)胞株786-0。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)模擬物組、抑制物組、未轉(zhuǎn)染組腎癌細(xì)胞株786-0及正常人腎小管上皮細(xì)胞HK-2(正常組)miRNA-30a-5p,CCK-8法觀察各組培養(yǎng)24、48、72 h后的細(xì)胞增殖能力,流式細(xì)胞術(shù)觀察前三組細(xì)胞凋亡情況,Western blotting法檢測(cè)前三組細(xì)胞中異黏蛋白(MTDH)表達(dá)。結(jié)果正常組、模擬物組、抑制物組、未轉(zhuǎn)染組細(xì)胞miRNA-30a-5p mRNA相對(duì)表達(dá)量分別為1.00±0.00、1.32±0.05、0.32±0.05、0.52±0.06,正常組、模擬物組、抑制物組與未轉(zhuǎn)染組相比,P均0.01。正常組在培養(yǎng)24、48、72 h后的吸光度值分別為0.26±0.02、0.44±0.03、0.73±0.06,模擬物組分別為0.33±0.04、0.50±0.05、0.88±0.05,抑制物組分別為0.86±0.01、1.88±0.12、2.48±0.15,未轉(zhuǎn)染組分別為0.62±0.01、1.63±0.02、2.34±0.23,正常組、模擬物組各時(shí)點(diǎn)分別與抑制物組、未轉(zhuǎn)染組相比,P均0.01。模擬物組、抑制物組、未轉(zhuǎn)染組細(xì)胞凋亡率分別為11.91%±0.45%、5.23%±0.38%、6.77%±0.52%,模擬物組與抑制物組、未轉(zhuǎn)染組相比,P均0.01。模擬物組、抑制物組、未轉(zhuǎn)染組MTDH蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別為1.14±0.08、6.31±0.24、5.56±0.06,模擬物組與抑制物組、未轉(zhuǎn)染組相比,P均0.01。結(jié)論 miRNA-30a-5p過(guò)表達(dá)可明顯抑制腎癌細(xì)胞株786-0的增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡,其可能是通過(guò)調(diào)控MTDH蛋白表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of miRNA-30a-5p overexpression on proliferation and apoptosis of renal carcinoma cell line 786-0 and its mechanism. Methods Renal carcinoma cell line 786-0 was divided into three groups: mimic group, inhibitor group, non-transfection group, mimic group, miRNA-30a-5p mimic group, the inhibitor group transfected miRNA-30a-5p inhibitor, and the untransfected group was normal renal carcinoma cell line 786-0. The proliferation of renal carcinoma cell line 786-0 and normal human renal tubular epithelial cells HK-2 (normal group) was detected by real-time fluorescent quantitative PCR. The proliferation of the cells in each group was observed after cultured for 244872 hours. The apoptosis of the first three groups was observed by flow cytometry and the expression of isoproterenol (MTDH) in the former three groups was detected by Western blotting assay. Results the relative expression levels of miRNA-30a-5p mRNA in normal group, mimic group, inhibitor group and untransfected group were 1.00 鹵0.005 + 1.32 鹵0.05N 0.32 鹵0.05N 0.52 鹵0.06, respectively. The expression of miRNA-30a-5p mRNA in normal group, mimic group, inhibitor group and untransfected group were 0.01, respectively. The absorbance values of the control group were 0.26 鹵0.02 鹵0.03 鹵0.73 鹵0.06, 0.33 鹵0.04 鹵0.50 鹵0.050.88 鹵0.05, 0.86 鹵0.01, 1.88 鹵0.122.48 鹵0.15 and 0.62 鹵0.011 鹵1.63 鹵0.022.34 鹵0.23 of the normal group, 0.33 鹵0.04 鹵0.04 鹵0.50 鹵0.055 鹵0.05, 0.86 鹵0.01 鹵1.88 鹵0.122.48 鹵0.15, 0.62 鹵0.011 鹵1.63 鹵0.022.34 鹵0.23, respectively. The apoptotic rates of the mimic group, the inhibitor group and the untransfected group were 11.91% 鹵0.45 and 5.23% 鹵0.38 鹵6.77% 鹵0.52 respectively. The relative expression of MTDH protein in the mimic group, the inhibitor group and the untransfected group were 1.14 鹵0.08t6.31 鹵0.2455.56 鹵0.06, respectively. Compared with the control group and the untransfected group, the expression of MTDH protein in the mimic group was significantly higher than that in the control group (P < 0.01). Conclusion the overexpression of miRNA-30a-5p can significantly inhibit the proliferation of RCC cell line 786-0 and promote cell apoptosis, which may be achieved by regulating the expression of MTDH protein.
【作者單位】： 山東醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校;山東醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校附屬醫(yī)院;
【基金】：山東省高等學(xué)校科技計(jì)劃項(xiàng)目(J13LL08) 山東省臨沂市科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(201515055)
【分類號(hào)】：R737.11

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本文編號(hào)：2003537