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堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植修復(fù)急性腎損傷

發(fā)布時(shí)間:2018-05-20 02:02

  本文選題:骨髓 + 間質(zhì)干細(xì)胞移植; 參考:《中國(guó)組織工程研究》2016年28期


【摘要】:背景:研究表明,堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)源于中胚層和神經(jīng)外胚層的大部分細(xì)胞均有促進(jìn)生長(zhǎng)、增殖、分化及功能表達(dá)的作用。目的:探討堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)急性腎損傷大鼠腎功能的影響。方法:依據(jù)腺病毒載體將堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因?qū)牍撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞,采用RT-PCR法鑒定轉(zhuǎn)染細(xì)胞中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子的表達(dá)。采用動(dòng)脈夾夾閉雙側(cè)腎蒂法制作急性腎損傷大鼠模型,建模后隨機(jī)分成3組(n=20):陰性轉(zhuǎn)染組經(jīng)尾靜脈注射未經(jīng)轉(zhuǎn)染的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞懸液,堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因轉(zhuǎn)染組經(jīng)尾靜脈注射轉(zhuǎn)染成功的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞懸液,模型組經(jīng)尾靜脈注射DMEM培養(yǎng)液。移植后4周,檢測(cè)血清肌酐及尿素氮水平,Western blot法檢測(cè)腎組織中結(jié)締組織生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1的表達(dá),蘇木精-伊紅染色觀察腎組織病理形態(tài)。結(jié)果與結(jié)論:(1)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因成功表達(dá)于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中;(2)與模型組比較,陰性轉(zhuǎn)染組大鼠血清肌酐及尿素氮水平明顯降低,堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因轉(zhuǎn)染組血清肌酐及尿素氮水平進(jìn)一步降低,各組間比較差異有顯著性意義(P0.05);(3)與模型組比較,陰性轉(zhuǎn)染組及堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因轉(zhuǎn)染組腎組織結(jié)締組織生長(zhǎng)因子及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1表達(dá)明顯減弱(P0.05),陰性轉(zhuǎn)染組及堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因轉(zhuǎn)染組間差異無(wú)顯著性意義(P0.05);(4)陰性轉(zhuǎn)染組腎組織壞死、炎性反應(yīng)減輕,堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子轉(zhuǎn)染組腎小管輪廓恢復(fù)正常,未出現(xiàn)明顯壞死細(xì)胞;(5)結(jié)果表明,堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)急性腎損傷大鼠腎臟的修復(fù)作用更明顯。
[Abstract]:Background: basic fibroblast growth factor (bFGF) has been shown to promote growth, proliferation, differentiation and functional expression of most cells derived from mesoderm and neuroectoderm. Aim: to investigate the effects of basic fibroblast growth factor gene modified bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on renal function in rats with acute renal injury. Methods: the basic fibroblast growth factor gene was introduced into bone marrow mesenchymal stem cells according to adenovirus vector, and the expression of basic fibroblast growth factor in transfected cells was identified by RT-PCR method. The rat model of acute renal injury was made by clipping bilateral renal artery. The model was randomly divided into three groups: the negative transfection group was injected with untransfected bone marrow mesenchymal stem cell suspension via tail vein. Bone marrow mesenchymal stem cell suspension was injected via tail vein in basic fibroblast growth factor gene transfection group and DMEM culture medium was injected through tail vein in model group. Four weeks after transplantation, serum creatinine and urea nitrogen levels were detected. The expression of connective tissue growth factor and transforming growth factor 尾 1 in renal tissue were detected by Western blot method. The histopathology of renal tissue was observed by hematoxylin eosin staining. Results and conclusion: BGF gene was successfully expressed in bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs). Compared with the model group, the serum creatinine and urea nitrogen levels in the negative transfection group were significantly lower than those in the control group. The levels of serum creatinine and urea nitrogen in basic fibroblast growth factor gene transfection group were further decreased, and there was significant difference between each group and model group. The expression of connective tissue growth factor and transforming growth factor 尾 1 in renal tissue of negative transfection group and basic fibroblast growth factor gene transfection group was significantly decreased, while that of negative transfection group and basic fibroblast growth factor gene transfection group was significantly decreased. There was no significant difference in renal necrosis in negative transfection group. The inflammatory response was alleviated, and the renal tubular contours returned to normal in the basic fibroblast growth factor transfection group. The transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells modified with basic fibroblast growth factor gene was more effective in renal repair of acute renal injury rats.
【作者單位】: 濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院解剖教研室;河北大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【分類號(hào)】:R692

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本文編號(hào):1912678


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