本文選題：慢性腎功能不全 + 尿毒癥毒素　； 參考：《南昌大學(xué)》2014年碩士論文

【摘要】：目的：探討不同濃度尿毒癥毒素對人肝癌HepG2細(xì)胞1型脫碘酶(Iodothyroninedeiodinase typeⅠ, D1)、白介素-1β(Interleukin-1beta, IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6, IL-6)及腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α, TNF-α) mRNA表達(dá)的影響，探尋慢性腎功能不全患者非甲狀腺疾病綜合征(Nonthyroidal IllnessSyndrome, NTIS)與微炎癥狀態(tài)之間的關(guān)系。 方法：（1）將體外培養(yǎng)的HepG2細(xì)胞隨機(jī)分組：①空白對照組：未加任何刺激物；②低濃度尿毒癥毒素刺激組（終濃度為20mmol/L尿素、100umol/L肌酐、40umol/L尿酸、0.2pg/ml甲狀旁腺激素和1×10-5mol/L精脒的混合液）；③中等濃度尿毒癥毒素刺激組（終濃度為50mmol/L尿素、200umol/L肌酐、80umol/L尿酸、2pg/ml甲狀旁腺激素和1×10-4mol/L精脒的混合液）；④高濃度尿毒癥毒素刺激組（終濃度為80mmol/L尿素、500umol/L肌酐、200umol/L尿酸、20pg/ml甲狀旁腺激素和1×10-3mol/L精脒的混合液）。以上各組分別刺激12h、24h。應(yīng)用RT-PCR法檢測細(xì)胞IL-1β、IL-6、TNF-α、D1的轉(zhuǎn)錄水平。（2）收集本科室已診斷為慢性腎功能不全患者和健康體檢者的血液標(biāo)本，ELISA法檢測其血清IL-6的蛋白表達(dá)水平，并采集其臨床資料。 結(jié)果：（1）①低濃度尿毒癥毒素刺激HepG2細(xì)胞12h、24h后IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表達(dá)均較空白對照組升高（12h組：IL-1β、IL-6、TNF-α的P值分別為0.016、0.042、0.015；24h組：IL-1β、IL-6、TNF-α的P值均小于0.01），而D1mRNA的表達(dá)較空白對照組降低（12h組和24h組P值均小于0.01）。中等濃度尿毒癥毒素刺激HepG2細(xì)胞12h、24h后IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表達(dá)均較空白對照組升高（12h組和24h組IL-1β、IL-6、TNF-α的P值均小于0.01），，而D1mRNA的表達(dá)較空白對照組降低（12h組和24h組P值均小于0.01）。高濃度尿毒癥毒素刺激HepG2細(xì)胞12h、24h后IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表達(dá)均較空白對照組升高（12h組和24h組IL-1β、IL-6、TNF-α的P值均小于0.01），而D1mRNA的表達(dá)較空白對照組降低（12h組和24h組P值均小于0.01）。②中等濃度尿毒癥毒素刺激HepG2細(xì)胞12h、24h后IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表達(dá)均較低濃度尿毒癥毒素組升高（12h組：IL-1β、IL-6、TNF-α的P值分別為小于0.01、0.012、小于0.01；24h組：IL-1β、IL-6、TNF-α的P值均小于0.01），而D1mRNA的表達(dá)較低濃度尿毒癥毒素組降低（12h組P值為0.013；24h組P值小于0.01）。③高濃度尿毒癥毒素刺激HepG2細(xì)胞12h、24h后IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表達(dá)均較低濃度尿毒癥毒素組升高（12h組和24h組IL-1β、IL-6、TNF-α的P值均小于0.01），而D1mRNA的表達(dá)較低濃度尿毒癥毒素組降低（12h組和24h組P值均小于0.01）。④高濃度尿毒癥毒素刺激HepG2細(xì)胞12h、24h后IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表達(dá)均較中等濃度尿毒癥毒素組升高（12h組和24h組IL-1β、IL-6、TNF-α的P值均小于0.01；24h組：IL-1β、IL-6、TNF-α的P值分別為小于0.01、0.035、0.013），而D1mRNA的表達(dá)較中等濃度尿毒癥毒素組降低（12h組P值為0.011；24h組P值為0.036）。⑤低濃度、中等濃度、高濃度尿毒癥毒素刺激HepG2細(xì)胞24h后IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表達(dá)均較刺激12h升高（低濃度組和中等濃度組IL-1β、IL-6、TNF-α的P值均小于0.01；高濃度組：IL-1β、IL-6、TNF-α的P值分別為0.011、小于0.01、0.042），而D1mRNA的表達(dá)較刺激12h降低（低濃度組P值為0.038；中等濃度組P值為0.017；高濃度組P值為0.038）。（2）根據(jù)ELISA法檢測人血清IL-6表達(dá)水平與估算的腎小球?yàn)V過率(estimated glomerular filtration rate, eGFR)值、游離三碘甲狀腺原氨酸(Free triiodothyronine, FT3)等臨床資料的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，eGFR值與血清FT3濃度呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r=0.465, P＜0.01)，eGFR值與血清IL-6濃度呈負(fù)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r=-0.764, P＜0.01)，血清IL-6與FT3濃度呈負(fù)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r=-0.643, P＜0.01)。 結(jié)論：在一定濃度、時間范圍內(nèi)，隨著尿毒癥毒素濃度的增高、刺激時間的延長，HepG2細(xì)胞IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表達(dá)增強(qiáng)，D1mRNA的表達(dá)減弱。根據(jù)ELISA法檢測人血清IL-6蛋白表達(dá)水平與收集臨床資料分析發(fā)現(xiàn)慢性腎功能不全患者eGFR值與其血清FT3濃度呈正相關(guān)，eGFR值與血清IL-6濃度呈負(fù)相關(guān)，血清IL-6與FT3濃度呈負(fù)相關(guān)，即隨著慢性腎功能不全患者的eGFR值降低、血清IL-6水平的升高，其血清FT3濃度降低。
[Abstract]:Objective : To investigate the effects of different concentrations of uremia on the expression of 1 , D1 , Interleukin - 1尾 , IL - 1尾 , Interleukin - 6 , IL - 6 and Tumor Necrosis Factor - 偽 ( TNF - 偽 ) mRNA in human hepatocellular carcinoma HepG2 cells .

Methods : ( 1 ) HepG2 cells cultured in vitro were randomly divided into : 鈶

本文編號：1832716