發(fā)布時(shí)間：2018-04-26 11:25

  本文選題：膀胱癌 + DNMTb��； 參考：《南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2015年11期

【摘要】：目的探討穩(wěn)定低表達(dá)DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3b(DNMT3b)基因?qū)θ税螂装┘?xì)胞生長(zhǎng)和凋亡的影響。方法包裝表達(dá)DNMT3b si RNA和陰性對(duì)照si RNA的慢病毒,通過(guò)慢病毒感染的方法獲得穩(wěn)定低表達(dá)DNMT3b的膀胱癌細(xì)胞BIU-87及對(duì)照細(xì)胞。MTT和流式細(xì)胞儀檢測(cè)DNMT3b穩(wěn)定低表達(dá)對(duì)細(xì)胞增殖和凋亡的影響;體內(nèi)裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)觀察DNMT3b穩(wěn)定低表達(dá)對(duì)腫瘤的抑制效果;熒光定量PCR和Western blot檢測(cè)DNMT3b穩(wěn)定低表達(dá)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響;甲基化特異性PCR檢測(cè)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡相關(guān)基因甲基化的影響。結(jié)果熒光定量PCR和Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,DNMT3b m RNA和蛋白水平在BIU-87穩(wěn)定細(xì)胞株中穩(wěn)定低表達(dá);DNMT3b穩(wěn)定低表達(dá)可以抑制BIU-87細(xì)胞的生長(zhǎng),并且抑制裸鼠皮下瘤體的生長(zhǎng);DNMT3b穩(wěn)定低表達(dá)可以促進(jìn)BIU-87細(xì)胞的凋亡;DNMT3b穩(wěn)定低表達(dá)可以增加凋亡及細(xì)胞生長(zhǎng)相關(guān)基因DAPK,Bax和RASSF1A m RNA和蛋白水平的表達(dá);DNMT3b穩(wěn)定低表達(dá)可以減少凋亡及細(xì)胞生長(zhǎng)相關(guān)基因DAPK,Bax和RASSF1A啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化水平。結(jié)論 DNMT3b穩(wěn)定低表達(dá)可能通過(guò)調(diào)控凋亡相關(guān)基因以及細(xì)胞生長(zhǎng)相關(guān)基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化水平來(lái)影響基因的表達(dá),從而抑制BIU-87細(xì)胞的生長(zhǎng),誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of stable and low expression of DNA methyltransferase (DNA) DNMT3b gene on the growth and apoptosis of human bladder cancer cells. Methods Lentivirus expressing DNMT3b si RNA and negative control si RNA were packaged. The stable and low expression of DNMT3b in bladder cancer cells BIU-87 and control cells were obtained by lentivirus infection and the effects of stable low expression of DNMT3b on cell proliferation and apoptosis were detected by flow cytometry. The inhibitory effects of stable and low expression of DNMT3b on tumor were observed in nude mice, and the effects of stable and low expression of DNMT3b on the expression of apoptosis-related genes were detected by fluorescence quantitative PCR and Western blot. Effect of methylation specific PCR on methylation of cell growth and apoptosis-related genes. Results the results of fluorescence quantitative PCR and Western blot showed that the stable and low expression of DNMT3b RNA and protein in BIU-87 stable cell lines could inhibit the growth of BIU-87 cells. Inhibiting the stable and low expression of DNMT3b in subcutaneous tumor of nude mice can promote the apoptosis of BIU-87 cells. The stable and low expression of DNMT3b can increase the expression of apoptosis and RASSF1A m RNA and protein levels. In order to reduce the methylation level in the promoter region of apoptosis and cell growth related gene DAPKG Bax and RASSF1A. Conclusion the stable and low expression of DNMT3b may affect the gene expression by regulating the methylation level of apoptosis-related genes and promoter regions of cell growth related genes, thus inhibiting the growth of BIU-87 cells and inducing apoptosis.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院泌尿外科;
【基金】：廣東省自然科學(xué)基金(S2012010009383,S2013040016823)
【分類號(hào)】：R737.14

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 劉培;姜相君;呂梅;葛銀林;;MSP法檢測(cè)胃癌組織中RASSF1A基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化改變[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2010年07期

2 吳振啟;張旭;劉毅;徐華;史濤平;權(quán)偉合;李虎宜;張有順;;DNMT1和DNMT3b基因在人膀胱癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)及意義[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年03期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 張遠(yuǎn);楊旬旬;吳風(fēng)瑞;劉勇;丁彪;王彩紅;黃繼昌;李文雍;;小鼠Dnmt1啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告基因的構(gòu)建及活性分析[J];生物技術(shù)通報(bào);2013年10期

2 劉培;魏良洲;姜相君;宋明全;高玉強(qiáng);;RASSF1A和Runx3基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化在胃癌組織中的表達(dá)及意義[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年25期

3 劉啟明;;DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶1在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義[J];實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志;2011年23期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 高飛;青黃散治療骨髓增生異常綜合征去甲基化作用效應(yīng)機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

2 朱延軍;RASSF1A基因異常甲基化及MicroRNA調(diào)控與膀胱癌復(fù)發(fā)的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 郭良蕊;葡萄胎DNA甲基化研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 張松法;葉楓;陳懷增;謝幸;;基因組CpG島甲基化檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J];國(guó)際遺傳學(xué)雜志;2006年03期

2 曾宇,孔垂?jié)?朱育焱,高紅,付成;膀胱癌DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1、3a、3b基因的表達(dá)[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2003年12期

3 孫樹漢;;腫瘤的表觀遺傳學(xué)研究[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;2008年01期

4 胡佳樂;陳云;;RASSF1A基因甲基化作為腫瘤生物學(xué)標(biāo)志的臨床應(yīng)用[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;2008年03期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃后寶;董昌斌;路建磊;姜書傳;;表淺性膀胱癌預(yù)后與癌腫數(shù)目、病理分級(jí)的關(guān)系[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2006年04期

2 李朝爭(zhēng);李妤蓉;趙金媛;;表淺性膀胱癌的治療[J];社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志;2007年01期

3 于春華;李金慶;高岱清;;膀胱癌化學(xué)藥物敏感性試驗(yàn)[J];河北醫(yī)學(xué);2007年02期

4 郝楠馨;諸靜其;曹開明;常時(shí)新;汪波;劉穎;;膀胱癌的多層螺旋CT征象與病理表現(xiàn)的關(guān)系[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志;2009年02期

5 夏昕暉;何莉;戴福宏;鐘甘平;;調(diào)控組蛋白乙酰化水平抑制膀胱癌細(xì)胞周期的研究[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2009年04期

6 陳建超;;中西醫(yī)結(jié)合治療預(yù)防膀胱癌術(shù)后復(fù)發(fā)觀察[J];中國(guó)醫(yī)藥指南;2010年18期

7 趙德祥;;螺旋CT在膀胱癌診斷中的應(yīng)用[J];醫(yī)學(xué)信息(上旬刊);2010年08期

8 木海琦;楊森;王怡君;陳映鶴;;百里醌抑制膀胱癌細(xì)胞生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2011年11期

9 李濤;楊立;王志平;;鼠膀胱癌原位模型建立的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志;2013年01期

10 金桂花;王麗娟;朱青;白娥;周俠;李萌;;長(zhǎng)鏈非編碼RNA在膀胱癌中的研究進(jìn)展[J];西部醫(yī)學(xué);2013年09期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 張永春;谷江;孫發(fā);石家齊;;傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)在膀胱癌治療中的意義[A];2010年貴州省泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

2 潘春武;沈周俊;唐小瑩;王e，

本文編號(hào)：1805821