脂肪干細(xì)胞聯(lián)合體外沖擊波治療大鼠勃起功能障礙療效研究
本文選題:脂肪干細(xì)胞 + 低能量體外沖擊波; 參考:《鄭州大學(xué)》2017年碩士論文
【摘要】:研究背景勃起功能障礙(erectile dysfunction,ED)嚴(yán)重影響生活質(zhì)量,藥物療法對一些難治性ED治療效果欠佳,也無法改變ED的病理狀態(tài),只能減緩癥狀。脂肪干細(xì)胞(adipose tissue-derived stem cell,ADSC)和低能量體外沖擊波療法(low-intensity shock wave therapy,LI-ESWT)是治療ED的新方法。近十年來,這兩種治療方法得到了巨大發(fā)展。在亞臨床研究中,這兩種方法對ED也都取得了不錯的治療效果,但是無論哪一種方法都無法治愈ED,也無法使勃起功能達(dá)到正常水平。亞臨床研究顯示這兩種方法對于ED的治療機(jī)制有著相似的地方,都能改善ED病理狀態(tài)。考慮到二者的共同之處,本研究從這兩種方法聯(lián)合的角度探討二者對于勃起功能障礙的治療效果。目的評價ADSC聯(lián)合LI-ESWT治療ED的療效,探索ADSC和LI-ESWT之間的交互作用,闡明ADSC聯(lián)合LI-ESWT治療ED的機(jī)制。方法取4周齡無特定病原菌(specific pathogen free,SPF)級SD(Sprague Dawley)雄性大鼠腹股溝處脂肪,用于培養(yǎng)ADSC。噻唑藍(lán)(MTT)法測定ADSC生長曲線,成脂、成骨分化用于鑒定ADSC。150只8周齡SPF級SD雄性大鼠隨機(jī)分成正常對照組和交互作用分析組,正常組未給予任何處理;交互作用分析組腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)構(gòu)建Ⅰ型糖尿病模型,糖尿病大鼠進(jìn)行阿撲嗎啡(apomorphine,APO)實(shí)驗(yàn),APO實(shí)驗(yàn)陰性大鼠隨機(jī)分成ED模型組,給予海綿體移植磷酸鹽緩沖液(phosphate buffer saline,PBS);ADSC治療組,給予海綿體移植ADSCs懸液;LI-ESWT治療組,給予海綿體沖擊波治療;ADSC聯(lián)合LI-ESWT治療組,在移植ADSCs1天后給予海綿體沖擊波治療。干預(yù)4周后,測量每組大鼠海綿體內(nèi)壓(intracavernous pressure,ICP)及平均動脈壓(mean arterial pressure,MAP)評估治療效果,分析LI-ESWT和ADSC間交互作用。取大鼠陰莖中段進(jìn)行免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry,IH)實(shí)驗(yàn)來探索可能的治療機(jī)制。結(jié)果1、ADSC增殖能力強(qiáng),能誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞,3代ADSC的倍增時間為26.26±3.12h。2、最終共98只大鼠完成實(shí)驗(yàn),正常組19只,ED模型組19只,ADSC治療組20只,LI-ESWT治療組19只,聯(lián)合治療組21只。在10V刺激下五組間ICP/MAP值分別為0.69±0.096,0.25±0.096,0.44±0.13,0.42±0.14和0.55±0.082,五組間ICP/MAP差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);ADSC組、LI-ESWT組和聯(lián)合治療組ICP/MAP明顯高于ED模型組;聯(lián)合治療組ICP/MAP值高于ADSC組和LI-ESWT組。LI-ESWT和ADSC間交互作用無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.212),大鼠的血糖水平和ICP/MAP的spearman相關(guān)系數(shù)為-0.316,P0.05,二者呈負(fù)相關(guān)。3、ADSC治療組、LI-ESWT組和聯(lián)合治療組?-SMA,nNOS和vWF的表達(dá)均高于ED模型組,P0.05。結(jié)論ADSC和LI-ESWT療法能夠改善大鼠勃起功能,二者聯(lián)合對大鼠勃起功能較單獨(dú)使用時效果更好,二者之間不存在交互作用。ADSC和LI-ESWT均可以提高ED大鼠陰莖海綿體?-SMA,n NOS和v WF的表達(dá)。
[Abstract]:Background erectile dysfunctional EDV (erectile dysfunctional EDV) has a serious impact on the quality of life. The therapeutic effect of drug therapy on refractory Ed is poor, and it can not change the pathological state of Ed, but can only alleviate the symptoms. Adipose tissue-derived stem (ADSCC) and low-intensity shock wave therapy (LI-ESWTT) are new methods for the treatment of Ed. In the last ten years, these two treatments have been greatly developed. In subclinical studies, both methods have achieved good results in the treatment of Ed, but neither method can cure EDand nor achieve normal erectile function. Subclinical studies have shown that these two methods are similar to each other in the treatment mechanism of Ed and can improve the pathological state of Ed. In view of their common features, this study explored the therapeutic effects of the two methods on erectile dysfunction from the point of view of the combination of the two methods. Objective to evaluate the efficacy of ADSC combined with LI-ESWT in the treatment of Ed, explore the interaction between ADSC and LI-ESWT, and elucidate the mechanism of ADSC combined with LI-ESWT in the treatment of Ed. Methods the inguinal fat of 4-week-old SD(Sprague Dawley male rats without specific pathogen was used to culture ADSCs. The growth curve of ADSC was determined by thiazolyl blue method, and the adipogenic and osteogenic differentiation was used to identify the 8-week-old SPF male rats of ADSC.150. They were randomly divided into normal control group and interactive analysis group, and the normal group was not given any treatment. The model of type I diabetes was established by intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ) in the interaction analysis group. The rats with apomorphine apomorphine (APO) were randomly divided into Ed model group and treated group with phosphate buffer solution phosphate buffer for cavernosum transplantation. The cavernous body transplantation ADSCs suspension LI-ESWT treatment group, cavernous shock wave therapy combined with LI-ESWT treatment group, after ADSCs1 day, the cavernous body shock wave treatment group. After 4 weeks of intervention, intracavernous pressure (ICP) and mean arterial pressure (mean arterial pressure MAPP) were measured in each group, and the interaction between LI-ESWT and ADSC was analyzed. The middle part of rat penis was used to study the possible therapeutic mechanism by immunohistochemistry IH. Results 1the multiplication time of ADSC was 26.26 鹵3.12h.2.The multiplication time of ADSC was 26.26 鹵3.12h.2. finally, the experiment was completed in 98 rats, 19 rats in normal group and 19 rats in ADSC-treated group (n = 19) treated with LI-ESWT, 19 rats were treated with LI-ESWT, 19 rats in normal group were treated with LI-ESWT, 19 rats in normal group were treated with LI-ESWT. There were 21 rats in the combined treatment group. Under 10 V stimulation, the ICP/MAP values of the five groups were 0.69 鹵0.0966 0.25 鹵0.096 鹵0.44 鹵0.130.42 鹵0.14 and 0.55 鹵0.082, respectively. The ICP/MAP of the LI-ESWT group and the combined treatment group were significantly higher than that of the Ed model group. The ICP/MAP value of combined treatment group was higher than that of ADSC group and LI-ESWT group. There was no significant difference in the interaction between LI-ESWT and ADSC. The correlation coefficient between blood glucose level and spearman of ICP/MAP in rats was -0.316, P 0.05. The expression of SMAnNOS and vWF in LI-ESWT group and combined treatment group was negatively correlated with that in ADSC group. All of them were higher than that of Ed model group (P 0.05). Conclusion the combination of ADSC and LI-ESWT can improve erectile function in rats, and the combination of them can improve the expression of NOS and vWF in cavernosum cavernosum of Ed rats. There is no interaction between them.
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R698
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,本文編號:1791406
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