組蛋白去乙;抡{(diào)對腎細胞癌BNIP3基因表達的影響
本文選題:腎細胞癌 切入點:BNIP 出處:《四川大學學報(醫(yī)學版)》2017年03期
【摘要】:目的探討腎細胞癌中線粒體促凋亡蛋白BNIP3表達下調(diào)機制。方法運用CCK-8法及流式細胞技術(shù)檢測組蛋白去乙;敢种苿┣琶顾谹(TSA)對腎癌細胞株786-O、ACHN、A498增殖、凋亡的影響;運用實時熒光定量PCR(Q-PCR)和蛋白質(zhì)免疫印記(Western blot)技術(shù)檢測TSA對腎癌細胞BNIP3表達的影響;運用染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)技術(shù)檢測TSA對腎癌細胞BNIP3基因啟動子區(qū)組蛋白H3乙酰化狀態(tài)的影響。結(jié)果經(jīng)TSA處理后,3種腎癌細胞增殖均受到顯著抑制(P0.05),細胞早期凋亡明顯增加,BNIP3mRNA(P0.05)和蛋白表達水平上調(diào)。786-O、ACHN的BNIP3基因啟動子區(qū)組蛋白H3呈去乙酰化狀態(tài),TSA恢復了其乙;癄顟B(tài);A498的BNIP3基因啟動子區(qū)組蛋白H3呈乙酰化狀態(tài)。結(jié)論 BNIP3基因啟動子區(qū)組蛋白去乙酰化是其在腎癌中表達下調(diào)的主要機制,并可能參與了腎癌的發(fā)生發(fā)展。
[Abstract]:Objective to investigate the down-regulation mechanism of mitochondrial apoptotic protein (BNIP3) expression in renal cell carcinoma (RCC). Methods CCK-8 assay and flow cytometry were used to detect the effect of Tracotomycin (TSA), an inhibitor of histone deacetylase, on the proliferation and apoptosis of renal cell carcinoma cell line 786-OGN A498. The effect of TSA on the expression of BNIP3 in renal cancer cells was detected by real-time fluorescence quantitative PCRQ-PCR and Western blot technique. Chromatin immunoprecipitation technique was used to detect the effect of TSA on the acetylation of histone H3 in the promoter of BNIP3 gene in renal cancer cells. Results after TSA treatment, the proliferation of three kinds of renal cell carcinoma cells was significantly inhibited, and the early apoptosis of the cells was observed. BNIP3 promoter H3 was deacetylated and the BNIP3 promoter H3 of A498 was acetylated. Conclusion BNIP3 gene promoter H3 is acetylated. Deacetylation of motile histone is the main mechanism of its down-regulation in renal cell carcinoma. And may be involved in the development of renal cell carcinoma.
【作者單位】: 四川大學華西醫(yī)院泌尿外科;四川大學華西醫(yī)院泌尿外科研究所;四川大學華西醫(yī)院病理研究室;
【分類號】:R737.11
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