PPARγ受體在缺氧性腎小管上皮細(xì)胞損傷中的表達(dá)及作用
發(fā)布時(shí)間:2018-03-12 10:45
本文選題:羅格列酮 切入點(diǎn):GW9662 出處:《廣西醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的通過檢測(cè)PPARγ受體激動(dòng)劑羅格列酮(Rosislitazone,RGZ)和PPARγ受體抑制劑GW9662對(duì)缺氧性大鼠腎小管上皮細(xì)胞(renal tubularepithelial cell,RTEC)的過氧化物酶體增殖物激活受體(Peroxisomeproliferator-activated receptor,PPAR)表達(dá)的影響,初步探討PPARγ受體對(duì)缺氧性損傷RTEC損傷中的作用。 方法將大鼠近端腎小管上皮細(xì)胞株NRK-52E細(xì)胞于5㳠胎牛血清和1㳠雙抗的培養(yǎng)基在37℃,,50ml/L二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),傳代4次后,隨機(jī)分為正常組、缺氧模型組、羅格列酮處理組和GW9662處理組。正常組細(xì)胞不做任何處理,羅格列酮干預(yù)組細(xì)胞中加入15μmol/L羅格列酮,GW9662干預(yù)組細(xì)胞中加入25μmol/L GW9662,將缺氧模型組、羅格列酮處理組、GW9662處理組細(xì)胞放入真空罐中,真空泵抽取缺氧罐內(nèi)空氣并同時(shí)注入95㳠氮?dú)夂?㳠二氧化碳混合的缺氧氣體,并反復(fù)抽取、注入5次,建立缺氧RTEC損傷模型。于缺氧處理36h用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法測(cè)定各組腎小管上皮細(xì)胞的PPARγ和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)的mRNA表達(dá),采用蛋白免疫印跡法檢測(cè)各組腎小管上皮細(xì)胞的PPARγ和TGF-β1的蛋白表達(dá)。 結(jié)果1.光鏡下缺氧模型組細(xì)胞萎縮,細(xì)胞間隙變寬,提示細(xì)胞損傷,與缺氧模型組相比,羅格列酮處理組細(xì)胞損傷減輕,GW9662處理組細(xì)胞損傷加重。2.與正常組相比,缺氧模型組、羅格列酮處理組和GW9662處理組NRK-52E細(xì)胞的PPARγ受體的mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)量顯著降低(P0.05);與缺氧模型組相比,羅格列酮處理組NRK-52E細(xì)胞的PPARγ受體的mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.05),GW9662處理組NRK-52E細(xì)胞的PPARγ受體的mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)量均顯著降低(P0.05)。3.與正常組比較,缺氧模型組、羅格列酮處理組和GW9662處理組NRK-52E細(xì)胞的TGF-β1的mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)量均顯著升高(P0.05);與缺氧模型組相比,羅格列酮處理組NRK-52E細(xì)胞TGF-β1的mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)量均顯著降低(P0.05),GW9662處理組NRK-52E細(xì)胞TGF-β1的mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)量均顯著升高(P0.05)。4.相關(guān)性分析:缺氧模型組、羅格列酮處理組、GW9662處理組NRK-52E細(xì)胞的PPARγ受體的蛋白表達(dá)與TGF-β1的蛋白表達(dá)均呈顯著的負(fù)相關(guān)(P<0.05)。 結(jié)論在缺氧性RTEC損傷中,PPARγ受體可能參與了RTEC損傷的發(fā)生,PPARγ受體激動(dòng)劑羅格列酮可能通過增加PPARγ受體表達(dá)而減輕RTEC的損傷。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of rosiglitazoneone, a PPAR 緯 receptor agonist, and GW9662, an inhibitor of PPAR 緯 receptor, on the expression of peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR) in renal tubular epithelial cells of hypoxic rats. To explore the effect of PPAR 緯 receptor on RTEC injury in hypoxic injury. Methods the proximal renal tubular epithelial cells (NRK-52E) of rats were cultured in 5? Fetal bovine serum and 1? The culture medium of double antibody was cultured in 50 ml / L carbon dioxide incubator at 37 鈩
本文編號(hào):1601213
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