本文選題：羅格列酮　切入點：GW9662　出處：《廣西醫(yī)科大學》2014年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的通過檢測PPARγ受體激動劑羅格列酮（Rosislitazone,RGZ)和PPARγ受體抑制劑GW9662對缺氧性大鼠腎小管上皮細胞（renal tubularepithelial cell,RTEC）的過氧化物酶體增殖物激活受體（Peroxisomeproliferator-activated receptor，PPAR）表達的影響，初步探討PPARγ受體對缺氧性損傷RTEC損傷中的作用。 方法將大鼠近端腎小管上皮細胞株NRK-52E細胞于5㳠胎牛血清和1㳠雙抗的培養(yǎng)基在37℃，，50ml/L二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，傳代4次后，隨機分為正常組、缺氧模型組、羅格列酮處理組和GW9662處理組。正常組細胞不做任何處理，羅格列酮干預組細胞中加入15μmol/L羅格列酮，GW9662干預組細胞中加入25μmol/L GW9662，將缺氧模型組、羅格列酮處理組、GW9662處理組細胞放入真空罐中，真空泵抽取缺氧罐內(nèi)空氣并同時注入95㳠氮氣和5㳠二氧化碳混合的缺氧氣體，并反復抽取、注入5次，建立缺氧RTEC損傷模型。于缺氧處理36h用倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化，采用實時熒光定量PCR法測定各組腎小管上皮細胞的PPARγ和轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）的mRNA表達，采用蛋白免疫印跡法檢測各組腎小管上皮細胞的PPARγ和TGF-β1的蛋白表達。 結果1.光鏡下缺氧模型組細胞萎縮，細胞間隙變寬，提示細胞損傷，與缺氧模型組相比，羅格列酮處理組細胞損傷減輕，GW9662處理組細胞損傷加重。2.與正常組相比，缺氧模型組、羅格列酮處理組和GW9662處理組NRK-52E細胞的PPARγ受體的mRNA表達量和蛋白表達量顯著降低（P0.05)；與缺氧模型組相比，羅格列酮處理組NRK-52E細胞的PPARγ受體的mRNA表達量和蛋白表達量顯著升高（P0.05)，GW9662處理組NRK-52E細胞的PPARγ受體的mRNA表達量和蛋白表達量均顯著降低（P0.05)。3.與正常組比較，缺氧模型組、羅格列酮處理組和GW9662處理組NRK-52E細胞的TGF-β1的mRNA表達量和蛋白表達量均顯著升高（P0.05)；與缺氧模型組相比，羅格列酮處理組NRK-52E細胞TGF-β1的mRNA表達量和蛋白表達量均顯著降低（P0.05)，GW9662處理組NRK-52E細胞TGF-β1的mRNA表達量和蛋白表達量均顯著升高（P0.05)。4.相關性分析：缺氧模型組、羅格列酮處理組、GW9662處理組NRK-52E細胞的PPARγ受體的蛋白表達與TGF-β1的蛋白表達均呈顯著的負相關（P＜0.05）。 結論在缺氧性RTEC損傷中，PPARγ受體可能參與了RTEC損傷的發(fā)生，PPARγ受體激動劑羅格列酮可能通過增加PPARγ受體表達而減輕RTEC的損傷。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of rosiglitazoneone, a PPAR 緯 receptor agonist, and GW9662, an inhibitor of PPAR 緯 receptor, on the expression of peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR) in renal tubular epithelial cells of hypoxic rats. To explore the effect of PPAR 緯 receptor on RTEC injury in hypoxic injury. Methods the proximal renal tubular epithelial cells (NRK-52E) of rats were cultured in 5? Fetal bovine serum and 1? The culture medium of double antibody was cultured in 50 ml / L carbon dioxide incubator at 37 鈩

本文編號：1601213