CXCL16基因沉默減輕ox-LDL對(duì)小鼠足細(xì)胞損傷
本文關(guān)鍵詞:CXCL16基因沉默減輕ox-LDL對(duì)小鼠足細(xì)胞損傷 出處:《山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2016年06期 論文類型:期刊論文
更多相關(guān)文章: 足細(xì)胞 CXC趨化因子配體 短發(fā)卡RNA 氧化低密度脂蛋白 活性氧 β整合素
【摘要】:目的探討CXC趨化因子配體16(CXCL16)基因沉默在減輕氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)對(duì)足細(xì)胞損傷中的作用。方法小鼠CXCL16基因短發(fā)卡RNA(shRNA)慢病毒及陰性對(duì)照慢病毒轉(zhuǎn)染足細(xì)胞,Real-time PCR、Western blotting檢測轉(zhuǎn)染效率。CCK8法檢測轉(zhuǎn)染后足細(xì)胞活力。將轉(zhuǎn)染后足細(xì)胞分為4組培養(yǎng)和處理,即陰性對(duì)照組(NC組)、ox-LDL組、CXCL16-shRNA組、ox-LDL+CXCL16-shRNA組?偰懝檀己繙y定估計(jì)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積,Western blotting檢測CXCL16及β1整合素變化,并檢測活性氧(ROS)的表達(dá)。結(jié)果 CXCL16-shRNA慢病毒轉(zhuǎn)染后,CXCL16 mRNA抑制率約70%(P=0.008),CXCL16蛋白抑制率約60%(P=0.008)。CXCL16-shRNA組及NC組細(xì)胞活力差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.712)。ox-LDL+CXCL16-shRNA組較ox-LDL組細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積減少(P0.001),β1整合素表達(dá)量增加(P=0.004),ROS產(chǎn)生減少(P0.001)。結(jié)論 CXCL16基因沉默可減少ox-LDL作用后ROS表達(dá)量,并增加β1整合素的表達(dá),發(fā)揮足細(xì)胞保護(hù)作用。
[Abstract]:Objective to investigate the role of CXC chemokine ligand 16 (CXCL16) gene silencing in reducing oxidative low density lipoprotein (ox-LDL). Methods Lentivirus of mouse CXCL16 gene short hairpin RNAs and negative control lentivirus were transfected into podocytes. Real-time PCR Western blotting was used to detect the transfection efficiency. CCK8 method was used to detect the viability of podocytes after transfection. The podocytes were divided into 4 groups for culture and treatment. CXCL16-shRNA group, the negative control group (NC group) and ox-LDL group (P < 0.05). Ox-LDL CXCL16-shRNA group. Total cholesterol content was measured to estimate intracellular lipid deposition. Western blotting was used to detect the changes of CXCL16 and 尾 1 integrin, and the expression of reactive oxygen species (Ros). Results CXCL16-shRNA lentivirus was transfected. The inhibitory rate of CXCL16 mRNA was about 70%. The inhibitory rate of CXCL16 protein was about 60%. There was no significant difference in cell viability between CXCL16-shRNA group and NC group (P0. 712). The intracellular lipid deposition in ox-LDL CXCL16-shRNA group was significantly lower than that in ox-LDL group (P 0.001). The expression of 尾 1 integrin increased and the Ros production decreased. Conclusion CXCL16 gene silencing can reduce the expression of ROS after ox-LDL treatment. And increase the expression of 尾 1 integrin, play a protective role in podocytes.
【作者單位】: 山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院小兒腎臟風(fēng)濕免疫科;山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院小兒神經(jīng)科;
【基金】:山東省自然科學(xué)基金(ZR2010HM110);山東省自然科學(xué)基金(ZR2015HM009) 山東省科技發(fā)展計(jì)劃(2014GGH218009)
【分類號(hào)】:R692
【正文快照】: 網(wǎng)絡(luò)出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/37.1390.R.20160307.0935.004.html研究表明,氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)對(duì)腎臟系膜細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、足細(xì)胞均可造成損傷。在許多腎小球疾病中,如糖尿病腎病、微小病變性腎病綜合征、局灶性節(jié)段
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