本文關(guān)鍵詞：高糖對大鼠腎間質(zhì)成纖維細胞表達PINCH-1的影響　出處：《川北醫(yī)學院》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：目的:(1)通過高糖刺激大鼠腎間質(zhì)成纖維細胞(NRK49F),觀察PINCH-1(Particulary interesting new cysteine-histicline rich protein-1)和整合素連接激酶(Integrin-linked kinase,ILK)表達的動態(tài)變化,研究PINCH-1的表達對成纖維細胞的活化和表面特異蛋白的影響。(2)探討PINCH-1和ILK的相互作用。(3)探討PINCH-1在糖尿病腎病發(fā)病中的作用及可能機制。方法:1.體外培養(yǎng)大鼠NRK49F細胞,高糖(25mmol/l葡萄糖)培養(yǎng)6h、12h、24h、48h、72h后,采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)、免疫細胞化學法(Immunocytochemistry,ICC)分別檢測各組PINCH-1和ILK的mRNA及蛋白表達的動態(tài)變化,同時做低糖對照(5.5mmol/l葡萄糖)。2.在不同濃度葡萄糖(5.5mmol/l,15mmol/l,25mmol/l)作用于大鼠NRK49F細胞48h后,檢測各組PINCH-1和ILK的mRNA及蛋白的表達。結(jié)果:(1)高糖組PINCH-1和ILK的mRNA及蛋白的表達均呈時間依賴性增加。PINCH-1和ILK的mRNA均在48h達高峰,72h后表達開始下降(P0.05)。PINCH-1蛋白在48h表達最強,ILK蛋白在24h表達最強,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)不同濃度葡萄糖培養(yǎng)大鼠NRK49F細胞48h后,PINCH-1和ILK的mRNA及蛋白的表達均呈濃度依賴性增加,高糖組PINCH-1mRNA(25mmol/l)是低糖組(5.5mmol/l)的(1.978±0.091)倍,高糖組ILKmRNA是低糖組的(2.344±0.157)倍(P0.01)。高糖組PINCH-1蛋白的表達是低糖組的(1.542±0.217)倍,ILK蛋白的表達是低糖組的(1.491±0.189)倍,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。結(jié)論:1.高糖能夠促進大鼠腎間質(zhì)成纖維細胞中調(diào)節(jié)蛋白PINCH-1和ILK的表達。2.PINCH-1可能通過與ILK相互作用,在糖尿病腎病腎間質(zhì)纖維化的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要的作用,PINCH-1可能成為未來糖尿病腎病治療的新靶點。
【學位授予單位】：川北醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2;R692.9

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本文編號：1336551