本文關鍵詞：腎母細胞瘤過表達基因對人骨肉瘤143B細胞增殖、凋亡和遷移的影響

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【摘要】：目的:探討腎母細胞瘤過表達(nephroblastoma overexpressed,NOV)基因對人骨肉瘤細胞143B增殖、凋亡和遷移的影響及其可能的作用機制。方法:分別采用半定量反轉錄聚合酶鏈反應(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白質印跡法篩選NOV低表達的骨肉瘤細胞株。將重組腺病毒Ad NOV和Ad GFP(空載體陰性對照組)分別感染骨肉瘤143B細胞,培養(yǎng)24 h后,在熒光顯微鏡下觀察重組腺病毒Ad NOV和Ad GFP在143B細胞中的感染效率,并通過半定量RT-PCR和蛋白質印跡法檢測NOV m RNA和蛋白在143B細胞中的表達情況。分別采用MTT法、FCM法和Transwell小室法檢測NOV過表達對143B細胞增殖、凋亡及遷移的影響;半定量RT-PCR法及蛋白質印跡法檢測NOV過表達的143B細胞中NOV、抗凋亡因子B細胞淋巴瘤基因-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相關X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)表達水平的變化以及磷酸化p38(phospho-p38,p-p38)、總p38、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phospho-c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)和總JNK表達水平的變化。結果:NOV在骨肉瘤細胞143B中的表達水平最低(P0.05)。熒光顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),重組腺病毒Ad NOV在143B細胞中的感染效率約為60%;NOV在143B細胞中成功過表達(P0.05)。NOV過表達可抑制143B細胞的增殖(P0.05),將細胞周期阻滯于G0/G1期(P0.05),促進了143B細胞的凋亡(P0.001);并可提高143B細胞的遷移能力(P0.001)。NOV過表達后,143B細胞中促凋亡因子Bax表達上調(diào)(P0.001),抑制凋亡因子Bcl-2表達下降(P0.05);同時,p-p38與p-JNK表達水平均顯著上調(diào)(P0.001)。結論:腺病毒介導的NOV過表達抑制了骨肉瘤143B細胞的增殖,促進了其凋亡和遷移,其作用機制可能與p38/絲裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)和JNK/MAPK信號通路的激活有關。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學院 臨床檢驗診斷學教育部重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(編號:81102035)~~
【分類號】：R737.11
【正文快照】： YAO Juan,WENG Ya-guang,YAN Shu-juan,HOU Meng-yi,SHI Qiong,ZUO Guo-wei結果:NOV在骨肉瘤細胞143B中的表達水平最低(P0.05)。熒光顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),重組腺病毒Ad NOV在143B細胞中的感染效率約為60%;NOV在143B細胞中成功過表達(P0.05)。NOV過表達可抑制143B細胞的增殖(P0

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本文編號：1299244