本文關(guān)鍵詞：蛋白磷酸酶2A在腎間質(zhì)纖維化中的作用

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【摘要】：目的:探討蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)在大鼠單側(cè)輸尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)及TGF-β1刺激的人近端腎小管上皮細胞-2(human kidney proximal tubular epithelial-2,HK-2)的腎纖維化模型中的作用。方法:1)15只雄性SD大鼠隨機分成假手術(shù)組(sham組)、模型組(UUO組)和UUO+岡田酸(okadaic acid,OA)干預組(OA組),每組各5只。術(shù)后OA組每日給予1.8%酒精稀釋的OA 30μg/kg,胃管飼喂72 h,對照組和模型組給予相等體積的1.8%酒精胃管飼喂,72 h后處死大鼠,收集血和腎組織,檢測腎功能并采用免疫組織化學、Western印跡和RT-PCR法檢測腎組織PP2A的c亞基(PP2Ac)、纖維連接蛋白(fi bronectin,FN)、膠原-I(collagen-I,Col-I)、E-鈣黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和α平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的蛋白及m RNA的表達。2)采用臺盼藍排斥實驗及MTT法找出適宜的OA濃度。常規(guī)培養(yǎng)HK-2細胞,隨機分為對照組、TGF-β1組(TGF-β1 5 ng/m L干預24 h)、TGF-β1+OA組(TGF-β1 5 ng/m L+OA 40 nmol/L,同時干預24 h),Western印跡檢測腎小管上皮細胞PP2Ac,FN,Col-I,E-cad和α-SMA蛋白的表達。結(jié)果:1)腎功能表明UUO組尿素氮和肌酐較sham組升高,OA組尿素氮、肌酐均比UUO組下降(均P0.05)。免疫組織化學、Western印跡和RT-PCR均顯示:與sham組比較,UUO組PP2Ac,FN,Col-I和α-SMA表達升高,而E-cad表達下降(均P0.05);與UUO組比較,OA組PP2Ac,FN,Col-I和α-SMA表達下降,E-cad表達升高(均P0.05);2)OA 40 nmol/L為最適宜的實驗質(zhì)量濃度;Western印跡顯示:與對照組比較,TGF-β1組PP2Ac,FN,Col-I和α-SMA表達升高,E-cad表達下降(均P0.05);與TGF-β1組比較,TGF-β1+OA組PP2Ac,FN,Col-I和α-SMA表達下降,E-cad表達升高(均P0.05)。結(jié)論:PP2A能促進腎間質(zhì)纖維化。
【作者單位】： 中南大學湘雅二醫(yī)院腎內(nèi)科中南大學腎臟病研究所;長沙市中心醫(yī)院腎內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學基金(81100486,81370792) 湖南省科技計劃項目(2013SK3036) 中華醫(yī)學會臨床醫(yī)學專項基金(13030400425)~~
【分類號】：R692
【正文快照】： Role of protein phosphatase 2A in renal interstitial fibrosisXI Yiyun1,2,LI Hua1,LI Jun1,LI Ying1,LIU Yuping1,YOU Yanhua1,DUAN Shaobin1,LIU Hong1,SUN Lin1,PENG Youming1,LIU Fuyou1(1.Department of Nephrology,Second Xiangya Hospital;Institute of Nephrology

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9 趙s，

本文編號：1292786