本文關(guān)鍵詞：核糖體蛋白L6在前列腺癌中的表達及對腫瘤生物學(xué)行為的影響

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【摘要】：目的揭示前列腺癌及癌旁組織中核糖體蛋白L6的表達的情況,并探討核糖體蛋白L6異常表達與前列腺癌患者臨床指標的相關(guān)性;并進一步研究核糖體蛋白L6表達水平改變對前列腺癌生物學(xué)行為的影響。方法收集手術(shù)切除的前列腺癌組織標本,RT-qPCR檢測核糖體蛋白L6的mRNA在前列腺癌組織及癌旁組織中的表達情況,并用Western blot進一步驗證,并分析RPL6 mRNA的表達與患者各項臨床病理特征以及PSA生化復(fù)發(fā)之間的相關(guān)性。培養(yǎng)LNCaP、PC3兩種前列腺癌細胞系以及正常前列腺上皮細胞系RWPE-1,檢測RPL6在前列腺癌細胞及正常細胞中的表達水平。構(gòu)建RPL6 shRNA,擴增后用其轉(zhuǎn)染PC3細胞,嘌呤霉素篩選轉(zhuǎn)染后的PC3細胞獲得RPL6穩(wěn)定低表達的細胞株;在基因和蛋白水平上檢測篩選后的細胞內(nèi)RPL6的表達量情況;并通過CCK8法檢測RPL6對PC3細胞增殖能力的影響,進一步檢測細胞侵襲能力的改變以及RPL6低表達后對細胞凋亡的影響;裸鼠成瘤實驗檢測RPL6低表達后對PC3細胞在裸鼠體內(nèi)成瘤能力的影響;使用SPSS19.0對相關(guān)數(shù)據(jù)進行分析。結(jié)果RPL6 mRNA在前列腺癌組織中的表達水平明顯高于癌旁組織(P0.05);血清前列腺特異性抗原(PSA)值高、Gleason評分高以及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者RPL6mRNA表達水平增高(均P0.05),而RPL6 mRNA表達水平與患者年齡、手術(shù)切緣陽性、精囊侵襲以及血管侵犯之間無相關(guān)性(均P0.05)。生存曲線結(jié)果表明,前列腺癌患者RPL6 m RNA的水平與患者術(shù)后的無生化復(fù)發(fā)生存之間具有相關(guān)性(χ2=4.530,P=0.033)。在LNCaP、PC3中的RPL6表達水平較RWPE-1中高,下調(diào)PC3細胞中的RPL6的表達并檢測其對PC3細胞生物學(xué)行為的影響,結(jié)果表明RPL6低表達可降低前列腺癌細胞增殖及侵襲能力,促進細胞凋亡,且在裸鼠體內(nèi)成瘤能力降低。結(jié)論在前列腺癌組織中核糖體蛋白L6的表達顯著高于癌旁組織,且其高表達與前列腺癌的發(fā)生和進展具有相關(guān)性,RPL6的異常表達與前列腺癌細胞體外生物學(xué)行為的改變具有相關(guān)性,提示RPL6可作為前列腺癌潛在的生物標記物及治療靶點。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.25
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本文編號：1252458