本文關(guān)鍵詞：S100A2在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及功能研究

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【摘要】：目的：S1 00A2是S100家族的一員,調(diào)節(jié)多種細(xì)胞內(nèi)外的功能,如增殖、凋亡,分化等。近些年來(lái),研究發(fā)現(xiàn)S100A2在腫瘤組織中的表達(dá)水平及其活性變化可能促進(jìn)或抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展。多項(xiàng)研究表明S1 00A2在多種不同類型腫瘤組織中的表達(dá)存在異常,如結(jié)腸癌、喉鱗狀細(xì)胞癌、頭頸癌、前列腺癌、乳腺癌等,查閱相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù),發(fā)現(xiàn)有關(guān)于S100A2在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及其功能目前尚無(wú)研究報(bào)道。本課題主要探究S100A2在腎透明細(xì)胞癌的腫瘤組織和相應(yīng)的瘤旁組織中的表達(dá)情況,研究S100A2對(duì)腎腫瘤細(xì)胞周期變化及增殖能力的影響,進(jìn)而探討S1 00A2在腎透明細(xì)胞癌發(fā)生中所起到的作用,為臨床診治腎腫瘤提供新的線索。方法：①實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time PCR)檢測(cè)46例腎透明細(xì)胞癌及其相應(yīng)的瘤旁組織中S100A2的mRNA表達(dá)水平,通過(guò)western-blot和免疫組織化學(xué)的方法S100A2蛋白在腎透明細(xì)胞癌及其相應(yīng)的癌旁組織的表達(dá)水平;②Western-blot以及實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞株769-P,786-O,OS-RC-2和正常腎小管上皮HK2細(xì)胞株中S100A2的mRNA及蛋白水平的表達(dá)；③通過(guò)構(gòu)建過(guò)表達(dá)S100A2的慢病毒質(zhì)粒,培育過(guò)表達(dá)S100A2的穩(wěn)轉(zhuǎn)786-0及769-P腎癌細(xì)胞株；④通過(guò)細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)及MTS實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)正常的786-0及769-P及相應(yīng)的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的周期及增殖情況。結(jié)果：①S100A2的mRNA水平在腎透明細(xì)胞癌腫瘤標(biāo)本組織中的表達(dá)顯著下調(diào)(p0.01),其相對(duì)應(yīng)的組織蛋白水平與mRNA變化一致;②在腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞株786-0、769-P、OS-RC-2中,S100A2的mRNA及蛋白表達(dá)水平比HK2細(xì)胞株低(p值均0.05),這與腫瘤標(biāo)本中結(jié)果相一致；③我們構(gòu)建成功了過(guò)表達(dá)S100A2質(zhì)粒,并進(jìn)行了慢病毒包裝,培育出了過(guò)表達(dá)S1 00A2的腎透明細(xì)胞癌穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系786-0和769-P：④與正常及轉(zhuǎn)染了空載體的786-O和769-P相比,過(guò)表達(dá)S100A2的細(xì)胞株MTS和細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)結(jié)果均顯示細(xì)胞增殖能力明顯下降。結(jié)論：在腎透明細(xì)胞癌中,100A2的異常低表達(dá)可能與腎透明細(xì)胞癌的發(fā)生有關(guān),S100A2可能起著抑癌基因的作用。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.11
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本文編號(hào)：1248056