本文關(guān)鍵詞：miR-34b抑制膀胱癌BIU-87細(xì)胞的增殖

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【摘要】：目的:探討微RNA-34b(microRNA-34b,miR-34b)對(duì)人膀胱癌BIU-87細(xì)胞增殖的影響及其可能的作用機(jī)制。方法:應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)膀胱癌BIU-87細(xì)胞、人膀胱上皮永生化細(xì)胞SV-HUC-1和人腎小管上皮細(xì)胞HK-2中miR-34b的表達(dá)水平。將miR-34b mimic轉(zhuǎn)染至BIU-87細(xì)胞后,應(yīng)用MTT法和克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)BIU-87細(xì)胞的增殖和克隆形成情況。miR-34b mimic與泛素特異肽酶22(ubiquitin-specific peptidase 22,USP22)-野生型(wide type,WT)或USP22-突變型(mutation type,Mut)重組載體共轉(zhuǎn)染后,應(yīng)用螢光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)miR-34b是否與USP22基因3'-非翻譯區(qū)(3'-untranslated region,3'-UTR)結(jié)合。應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)miR-34b mimic轉(zhuǎn)染后,BIU-87細(xì)胞中USP22 mRNA和蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:膀胱癌BIU-87細(xì)胞中miR-34b的表達(dá)水平低于腎小管上皮細(xì)胞HK-2和膀胱上皮永生化細(xì)胞SV-HUC-1(P值均0.05)。miR-34b mimic轉(zhuǎn)染后,BIU-87細(xì)胞的增殖率和克隆形成率低于空白對(duì)照組(BIU-87細(xì)胞未進(jìn)行任何轉(zhuǎn)染)和陰性對(duì)照組[BIU-87細(xì)胞轉(zhuǎn)染miRNA mimic negative control(miRNA mimic NC)](P值均0.05)。螢光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果顯示,miR-34b能特異性地與USP22基因3'-UTR結(jié)合,miR-34b mimic與重組載體USP22-WT共轉(zhuǎn)染組細(xì)胞的螢光素酶活性下降(P0.05)。miR-34b mimic轉(zhuǎn)染組BIU-87細(xì)胞中USP22蛋白的表達(dá)水平低于空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組(P值均0.05)。結(jié)論:miR-34b可抑制膀胱癌BIU-87細(xì)胞的增殖,這一作用可能與USP22的表達(dá)有關(guān)。
【作者單位】： 武漢市第一醫(yī)院泌尿外科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81502204)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R737.14
【正文快照】： 膀胱癌是泌尿系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤,具有易細(xì)胞周期,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[4]。本課題組的前期研復(fù)發(fā)、易耐藥、易侵襲和易轉(zhuǎn)移的生物學(xué)特點(diǎn)[1]。究表明,USP22基因在具有化療耐藥、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)泛素特異肽酶22(ubiquitin-specific peptidase移的膀胱癌組織中異常高表達(dá),通過(guò)si RNA沉默22,USP

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10 楊莉,汪少娟,楊業(yè)金,陳忠,吳燕麗;抗腫瘤藥對(duì)膀胱癌細(xì)胞產(chǎn)生的免疫抑制因子作用的影響[J];藥物流行病學(xué)雜志;2000年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 潘春武;沈周俊;唐小瑩;王e

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