人PSCA和PAP融合基因真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與表達(dá)
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【摘要】:[目的]構(gòu)建人PSCA和PAP融合基因的真核表達(dá)質(zhì)粒,并在體外進(jìn)行表達(dá)和鑒定。[方法]設(shè)計(jì)并合成人PSCA和PAP融合基因,然后將其定向克隆到真核表達(dá)載體p IRES-neo中,雙酶切鑒定后,將重組質(zhì)粒p IRES-neoPSCA-2A-PAP瞬時(shí)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,采用流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)驗(yàn)證其表達(dá)。[結(jié)果]構(gòu)建了p IRES-neo-PSCA-2A-PAP真核表達(dá)質(zhì)粒,流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)結(jié)果顯示融合抗原可以在293T細(xì)胞表達(dá),陽(yáng)性率高達(dá)67.85%。[結(jié)論]成功構(gòu)建了融合抗原PSCA與PAP的真核表達(dá)質(zhì)粒p IRES-neo-PSCA-2A-PAP,為建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染人PSCA和PAP融合基因的細(xì)胞系奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 濰坊醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】: PSCA PAP DNA疫苗 前列腺癌
【基金】:國(guó)家科技重大專項(xiàng)“重大新藥創(chuàng)制”(“高效抑制腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的新型抗乳腺癌治療性基因疫苗“普聚生”臨床前研究”,No.2014ZX09304313-003)資助~~
【分類號(hào)】:R737.25
【正文快照】: 0引言近年來,前列腺癌的發(fā)病率在迅速升高,成為威脅男性健康的主要疾病之一。前列腺癌是一種易復(fù)發(fā)的癌癥,而且復(fù)發(fā)型前列腺癌的生長(zhǎng)方式為雄激素抵抗型,對(duì)于此型前列腺癌,化療與激素治療的效果甚微[1],因此,傳統(tǒng)的治療方法難以起到有效的治療作用。20世紀(jì)90年代發(fā)展起來的免
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【相似文獻(xiàn)】
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3 袁一e,
本文編號(hào):1136021
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