本文關(guān)鍵詞：沉默PIK3C2B基因的表達(dá)可抑制前列腺癌PC-3細(xì)胞的增殖及侵襲

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【摘要】：目的 :研究下調(diào)磷脂酰肌醇-3激酶催化亞基2β(phosphatidylinositol-4-phosphate 3-kinase,catalytic subunit type 2 beta,PIK 3C 2B)基因?qū)η傲邢侔㏄C-3細(xì)胞體外增殖及侵襲的影響,并探討可能的作用機(jī)制。方法 :設(shè)計(jì)合成特異性針對PIK3C2B基因的2對si RNA(PIK3C2B-si RNA1和PIK3C2B-si RNA2)及陰性對照-si RNA(negative control-si RNA,NCsi RNA);采用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染法將各si RNA轉(zhuǎn)入PC-3細(xì)胞;分別采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和蛋白質(zhì)印跡法檢測轉(zhuǎn)入PIK3C2B-si RNA后對PC-3細(xì)胞中PIK3C2B m RNA及蛋白表達(dá)的影響;采用MTT法和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)分別檢測PIK3C2B基因沉默后對PC-3細(xì)胞增殖及侵襲的影響。蛋白質(zhì)印跡法檢測PIK3C2B基因沉默后對其下游蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,Akt)信號通路中Akt及磷酸化Akt蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果 :PIK3C2B-si RNA轉(zhuǎn)染PC-3細(xì)胞后,PIK3C2B m RNA及蛋白的表達(dá)水平均明顯下調(diào),以PIK3C2B-si RNA2的干擾效果較強(qiáng)(P0.01);48和72 h時(shí),PIK3C2B-si RNA2轉(zhuǎn)染組PC-3細(xì)胞的增殖能力均明顯低于空白對照組和陰性對照組(P值均0.05);PIK3C2B-si RNA2轉(zhuǎn)染組PC-3細(xì)胞的侵襲能力明顯低于陰性對照組及空白對照組(P值均0.05)。PIK3C2B-si RNA2轉(zhuǎn)染組PC-3細(xì)胞中總Akt蛋白的表達(dá)水平未發(fā)生變化,但磷酸化Akt蛋白的表達(dá)水平被明顯下調(diào)(P0.05)。結(jié)論 :PIK3C2B可能通過激活A(yù)kt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路促進(jìn)PC-3細(xì)胞的體外增殖和侵襲能力。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院 國家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心 天津市腫瘤防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院腫瘤科;天津泌尿外科研究所;
【關(guān)鍵詞】： 前列腺腫瘤 RNA 小分子干擾 -磷脂酰肌醇-激酶 細(xì)胞增殖 腫瘤轉(zhuǎn)移
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號:81572543);國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號:81301949) 天津市衛(wèi)生行業(yè)重大公關(guān)項(xiàng)目(編號:14KG141)~~
【分類號】：R737.25
【正文快照】： 方法:設(shè)計(jì)合成特異性針對PIK3C2B基因的2對si RNA(PIK3C2B-si RNA1和PIK3C2B-si RNA2)及陰性對照-si RNA(negative control-si RNA,NC-si RNA);采用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染法將各si RNA轉(zhuǎn)入PC-3細(xì)胞;分別采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和蛋白質(zhì)印跡法檢測轉(zhuǎn)入PIK3C2B-si RNA后對PC-3細(xì)胞中PIK3C2B m

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本文編號：1122079