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慢病毒介導(dǎo)shRNA沉默YAP基因?qū)θ饲傲邢侔㎜NCaP細(xì)胞增殖、凋亡及其雄激素受體的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-10-25 13:07

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【摘要】:目的:探討慢病毒介導(dǎo)sh RNA沉默Yes-相關(guān)蛋白(Yes-associated protein,YAP)基因?qū)θ思に匾蕾囆郧傲邢侔┘?xì)胞株LNCa P細(xì)胞增殖、凋亡及其雄激素受體(androgen receptor,AR)的影響。方法:3條針對(duì)YAP基因的sh RNA慢病毒干擾載體感染LNCa P細(xì)胞,經(jīng)嘌呤霉素篩選后建立穩(wěn)定感染細(xì)胞系,real-time PCR、Western blot分別檢測感染后各組細(xì)胞YAP、AR m RNA和蛋白水平;選取沉默效果最佳sh RNA慢病毒干擾載體組,以細(xì)胞增殖/毒性檢測(cell counting kit-8,CCK-8)、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)(colony formation)檢測LNCa P細(xì)胞增殖能力;流式細(xì)胞儀(flow cytometry,FCM)檢測LNCa P細(xì)胞凋亡改變。結(jié)果:重組慢病毒成功感染前列腺癌LNCa P細(xì)胞,經(jīng)嘌呤霉素篩選后感染效率達(dá)95%以上,獲得穩(wěn)定沉默YAP基因LNCa P細(xì)胞系。與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組比較,感染sh RNA慢病毒干擾載體各組中YAP、AR m RNA及蛋白表達(dá)水平明顯下調(diào)(P=0.000),細(xì)胞增殖受到明顯抑制(P=0.000),細(xì)胞凋亡明顯增加(P=0.000)。結(jié)論:慢病毒介導(dǎo)sh RNA沉默YAP基因能有效下調(diào)YAP在LNCa P細(xì)胞中表達(dá),并抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;YAP可能作為AR配體參與AR信號(hào)通路的調(diào)節(jié)。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院泌尿外科;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬大學(xué)城醫(yī)院消化神經(jīng)中心;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院;綦江區(qū)人民醫(yī)院泌尿外科;
【關(guān)鍵詞】前列腺癌 雄激素受體 Yes-相關(guān)蛋白 慢病毒
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):30972999) 重慶市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):cqpc2012jja1698) 重慶市衛(wèi)生局基金資助項(xiàng)目(編號(hào):2013-2-082) 重慶市衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):20143061)
【分類號(hào)】:R737.25
【正文快照】: 3.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院綦江區(qū)人民醫(yī)院泌尿外科,重慶401420)前列腺癌(prostate cancer,PCa)在歐美國家為除肺癌外男性最常見惡性腫瘤,國際癌癥研究機(jī)構(gòu)數(shù)據(jù)顯示其發(fā)病率和死亡率呈持續(xù)升高[1]。隨著我國人口老齡化進(jìn)程加劇及飲食結(jié)構(gòu)改變,我國前列腺癌發(fā)病率也逐漸增加[2

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張紅珠;張翠萍;張琪;魏文超;田字彬;;MST1與YAP1在食管疾病中的表達(dá)及意義[J];青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2014年01期

2 王芳芳;潘潔雪;任s,

本文編號(hào):1093837


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