慢病毒介導shRNA沉默YAP基因?qū)θ饲傲邢侔㎜NCaP細胞增殖、凋亡及其雄激素受體的影響
發(fā)布時間:2017-10-25 13:07
本文關鍵詞:慢病毒介導shRNA沉默YAP基因?qū)θ饲傲邢侔㎜NCaP細胞增殖、凋亡及其雄激素受體的影響
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【摘要】:目的:探討慢病毒介導sh RNA沉默Yes-相關蛋白(Yes-associated protein,YAP)基因?qū)θ思に匾蕾囆郧傲邢侔┘毎闘NCa P細胞增殖、凋亡及其雄激素受體(androgen receptor,AR)的影響。方法:3條針對YAP基因的sh RNA慢病毒干擾載體感染LNCa P細胞,經(jīng)嘌呤霉素篩選后建立穩(wěn)定感染細胞系,real-time PCR、Western blot分別檢測感染后各組細胞YAP、AR m RNA和蛋白水平;選取沉默效果最佳sh RNA慢病毒干擾載體組,以細胞增殖/毒性檢測(cell counting kit-8,CCK-8)、平板克隆形成實驗(colony formation)檢測LNCa P細胞增殖能力;流式細胞儀(flow cytometry,FCM)檢測LNCa P細胞凋亡改變。結(jié)果:重組慢病毒成功感染前列腺癌LNCa P細胞,經(jīng)嘌呤霉素篩選后感染效率達95%以上,獲得穩(wěn)定沉默YAP基因LNCa P細胞系。與空白對照組和陰性對照組比較,感染sh RNA慢病毒干擾載體各組中YAP、AR m RNA及蛋白表達水平明顯下調(diào)(P=0.000),細胞增殖受到明顯抑制(P=0.000),細胞凋亡明顯增加(P=0.000)。結(jié)論:慢病毒介導sh RNA沉默YAP基因能有效下調(diào)YAP在LNCa P細胞中表達,并抑制細胞增殖、誘導細胞凋亡;YAP可能作為AR配體參與AR信號通路的調(diào)節(jié)。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院泌尿外科;重慶醫(yī)科大學附屬大學城醫(yī)院消化神經(jīng)中心;重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院;綦江區(qū)人民醫(yī)院泌尿外科;
【關鍵詞】: 前列腺癌 雄激素受體 Yes-相關蛋白 慢病毒
【基金】:國家自然科學基金資助項目(編號:30972999) 重慶市自然科學基金資助項目(編號:cqpc2012jja1698) 重慶市衛(wèi)生局基金資助項目(編號:2013-2-082) 重慶市衛(wèi)生和計劃生育委員會基金資助項目(編號:20143061)
【分類號】:R737.25
【正文快照】: 3.重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院綦江區(qū)人民醫(yī)院泌尿外科,重慶401420)前列腺癌(prostate cancer,PCa)在歐美國家為除肺癌外男性最常見惡性腫瘤,國際癌癥研究機構(gòu)數(shù)據(jù)顯示其發(fā)病率和死亡率呈持續(xù)升高[1]。隨著我國人口老齡化進程加劇及飲食結(jié)構(gòu)改變,我國前列腺癌發(fā)病率也逐漸增加[2
【共引文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 張紅珠;張翠萍;張琪;魏文超;田字彬;;MST1與YAP1在食管疾病中的表達及意義[J];青島大學醫(yī)學院學報;2014年01期
2 王芳芳;潘潔雪;任s,
本文編號:1093837
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