AQP1基因沉默對前列腺癌PC-3細(xì)胞的影響
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【摘要】:目的探討水通道蛋白1(AQP1)基因沉默對在前列腺癌PC-3細(xì)胞的作用。方法培養(yǎng)PC-3細(xì)胞至對數(shù)生長期,隨機(jī)分為質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組和質(zhì)?瞻捉M。針對AQP1基因設(shè)計(jì)合成小片段RNA,并構(gòu)建高效表達(dá)載體。利用轉(zhuǎn)染試劑LipofectamineTM2000用脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入PC-3細(xì)胞。RT-PCR檢測PC-3細(xì)胞AQP1 mRNA的表達(dá)情況及激光共聚焦觀察室觀察、拍照AQP1表達(dá)的情況,轉(zhuǎn)染后72 h。將鼠齡為6 w的60只BALB/c(nu-/nu-)雄裸鼠隨機(jī)分成兩組,其中對照組30只,轉(zhuǎn)染組30只。轉(zhuǎn)染組把轉(zhuǎn)染后的前列腺癌PC-3細(xì)胞注射裸鼠腋窩處皮下(對照組把未經(jīng)轉(zhuǎn)染的前列腺癌PC-3細(xì)胞注射到裸鼠腋窩處皮下)。每日觀察腫瘤生長及體重情況,裸鼠飼養(yǎng)6 w處死,完整取出移植瘤瘤體測量體積和重量。結(jié)果與質(zhì)?瞻捉M相比,轉(zhuǎn)染組應(yīng)用RNA干擾技術(shù)后AQP-1在前列腺癌PC-3細(xì)胞系中mRNA的水平降低,與對照組相比,轉(zhuǎn)染組裸鼠移植瘤體積為(573.39±175.24)mm3明顯小于對照組(1 482.50±327.86)mm3(P=0.03)。轉(zhuǎn)染組腫瘤重量為(0.55±0.11)g明顯小于對照組〔(1.31±0.29)g,P=0.027〕。結(jié)論 AQP-1廣泛的表達(dá)在正常前列腺組織和前列腺癌組織中,對內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)起著重要的作用。更多的AQP-1促進(jìn)了前列腺癌細(xì)胞的增長,抑制AQP-1的表達(dá)可以使前列腺癌移植瘤生長減慢,體積減小。
【作者單位】: 佳木斯大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科;吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院泌尿外科;
【關(guān)鍵詞】: 水通道蛋白(AQP) 前列腺癌
【基金】:黑龍江省衛(wèi)生廳科研課題(2009-328)
【分類號】:R737.25
【正文快照】: 前列腺癌有明顯的地區(qū)差異和種族差異〔1〕。在我國,近年因?yàn)槔淆g人口增多,同時(shí)各種先進(jìn)儀器設(shè)備的大量出現(xiàn)及診斷前列腺癌的方法不斷改進(jìn),前列腺癌的發(fā)病率不斷增高〔2〕。水通道蛋白(AQP)-1高度表達(dá)于許多腫瘤細(xì)胞和腫瘤組織血管內(nèi)皮細(xì)胞,增加腫瘤上皮和血管對水的通透性運(yùn)
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,本文編號:1074331
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