本文關(guān)鍵詞：miR-155對(duì)腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響及其機(jī)制研究

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【摘要】：目的·研究miR-155在慢性腎臟疾病(CKD)患者血清中的表達(dá)情況,探討miR-155是否通過(guò)下調(diào)Kriippel樣因子4(KLF4)影響腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化(EMT)。方法·收集126例CKDⅠ期患者、163例CKDⅢ期患者以及130例正常體檢人員的血清,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)檢測(cè)各組患者血清中miR-155的表達(dá)情況。在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,用10μg/L TGF-β誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞EMT,通過(guò)轉(zhuǎn)染miR-155 mimic和miR-NC至離體培養(yǎng)的腎小管上皮細(xì)胞中,光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化。Transwell試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移侵襲能力,免疫印跡試驗(yàn)(Westernblotting)檢測(cè)細(xì)胞中平滑肌α-肌動(dòng)蛋白(SMα-actin)、膠原蛋白Ⅰ(collagenⅠ)、膠原蛋白Ⅳ(collagenⅣ)、鈣黏著蛋白-E(E-cadherin)的表達(dá)情況。生物信息學(xué)預(yù)測(cè)miR-155潛在靶基因?yàn)镵LF4,利用熒光素酶試驗(yàn)驗(yàn)證KLF4是miR-155的靶基因;再通過(guò)轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)KLF4的質(zhì)粒至腎小管上皮細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞中SMα-actin、collagenⅠ、collagenⅣ、E-cadherin、KLF4的表達(dá)情況。結(jié)果·相比于正常人群組和CKDⅠ期患者,miR-155在CKDⅢ期患者血清中的表達(dá)降低。在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,相比于空質(zhì)粒組,轉(zhuǎn)染miR-155 mimic后,腎小管上皮細(xì)胞中SMα-actin、collagenⅠ、collagenⅣ、KLF4的表達(dá)減少,E-cadherin表達(dá)增加;熒光素酶試驗(yàn)結(jié)果顯示,miR-155能夠顯著降低含KLF4-3'-UTR序列質(zhì)粒的熒光素酶活性;轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)KLF4質(zhì)粒后,腎小管上皮細(xì)胞中SMα-actin、collagenⅠ、collagenⅣ表達(dá)增加,E-cadherin表達(dá)減少。結(jié)論·在CKD患者血清中,miR-155低表達(dá);miR-155可以通過(guò)下調(diào)KLF4從而抑制腎小管上皮細(xì)胞EMT。
【作者單位】： 蘭州大學(xué)第二醫(yī)院腎內(nèi)科;蘭州大學(xué)第二醫(yī)院風(fēng)濕科;
【關(guān)鍵詞】： 慢性腎功能不全 miR- Krüppel樣因子 腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化
【基金】：甘肅省自然科學(xué)基金(1308RJZA246)~~
【分類號(hào)】：R692
【正文快照】： 慢性腎臟疾病(chronic kidney disease,CKD)是指各種原因造成慢性進(jìn)行性腎實(shí)質(zhì)損害,致使腎臟明顯萎縮,不能維持基本功能,臨床出現(xiàn)以代謝產(chǎn)物潴留,水、電解質(zhì)、酸堿平衡失調(diào),全身各系統(tǒng)受累為主要表現(xiàn)的臨床綜合征。慢性腎臟疾病的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確,目前的研究發(fā)現(xiàn)腎小管上

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本文編號(hào)：1070927