本文關(guān)鍵詞：miR-223在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)和作用

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【摘要】：目的：microRNAs(miRNAs)是一類堿基長度約22個堿基的非編碼小RNA。隨著miRNA 6的研究進(jìn)展,越來越多證據(jù)表明,這類不編碼蛋白的小RNA通過轉(zhuǎn)錄后調(diào)控等機(jī)制,不同程度地參與了腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。近年來的研究發(fā)現(xiàn)miR-223在感染、炎癥和腫瘤中起著重要的作用。在腫瘤研究中發(fā)現(xiàn),miR-223和白血病,肝細(xì)胞腫瘤,食管癌等腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系,但是其在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及作用目前尚未有報道。本研究主要探討miR-223在腎透明細(xì)胞癌組織和其瘤旁組織中的表達(dá),并分析病人臨床資料及相關(guān)性。同時在腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系中上調(diào)miRNA,研究其對腫瘤的增殖與侵襲能力的影響,分析miR-223在腎透明細(xì)胞癌發(fā)生與發(fā)展中的作用,為臨床診斷和治療尋找新的方向。方法：①采用實(shí)時定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time RT-PCR)法檢測miR-223在腎透明細(xì)胞癌組織和瘤旁組織中的表達(dá),并通過SPSS統(tǒng)計(jì)軟件分析所選病例臨床數(shù)據(jù)與miR-223表達(dá)量的關(guān)系。同時檢測腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系786-0、Caki-1、Sn12-pm6、ACHN以及正常人近段腎小管上皮細(xì)胞系HKC中mR-223的表達(dá)量。②通過人工脂質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)染法,采用miR-223模擬物轉(zhuǎn)及對照無意義序列分別轉(zhuǎn)染腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系786-0。③通過transwell遷移實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)檢測轉(zhuǎn)染miR-223模擬物后的786-0細(xì)胞的遷徙能力的變化,采用MTS法檢測其增殖情況的變化,并通過流失細(xì)胞儀分析其細(xì)胞周期的變化。結(jié)果：①miR-223在腎透明細(xì)胞癌組織和腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系中的表達(dá)量明顯高于瘤旁組織(P=0.0003)和正常腎小管上皮細(xì)胞,分析病例的臨床數(shù)據(jù)顯示miR-223的表達(dá)量與腫瘤的大小有關(guān),腫瘤直徑大于4cm的腫瘤miR-223表達(dá)量升高(P=0,0028)。②在transwell遷移實(shí)驗(yàn)中,轉(zhuǎn)染miR-223模擬物的786-0細(xì)胞遷移的細(xì)胞數(shù)量比轉(zhuǎn)染無意義序列的對照組遷移數(shù)多(P0.0001),劃痕實(shí)驗(yàn)顯示轉(zhuǎn)染miR-223模擬物的786-0細(xì)胞愈合能力比轉(zhuǎn)染無意義序列的對照組快,增殖實(shí)驗(yàn)表明轉(zhuǎn)染miR-223模擬物的786-0細(xì)胞增殖速度快于轉(zhuǎn)染無意義序列的對照組(P=0.006),細(xì)胞周期顯示轉(zhuǎn)染miR-223模擬物的786-0細(xì)胞G1期細(xì)胞數(shù)減少,S期細(xì)胞增加,提示處于增殖的細(xì)胞數(shù)多(p0.05)。結(jié)論：①miR-223的異常表達(dá)可能與腎透明細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展有關(guān)。②上調(diào)miR-223的表達(dá)可促進(jìn)腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞株的增殖和遷移能力。③上調(diào)miR-223的表達(dá)可以促進(jìn)細(xì)胞從細(xì)胞周期的G1期向S期進(jìn)展進(jìn)而影響細(xì)胞的增殖能力。
【關(guān)鍵詞】：miR-223 腎癌 遷移 增殖
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.11
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 第一部分 miR-223在腎透明細(xì)胞癌組織及細(xì)胞系中的表達(dá)及與臨床質(zhì)料的相關(guān)性11-19
• 1. 材料與方法11-15
• 2. 結(jié)果15-18
• 3. 小結(jié)18-19
• 第二部分 miR-223可促進(jìn)腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞的遷移能力19-24
• 1. 材料與方法19-21
• 2. 結(jié)果21-23
• 3. 小結(jié)23-24
• 第三部分 miR-223可促進(jìn)腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞的增殖能力24-29
• 1. 材料與方法24-26
• 2. 結(jié)果26-27
• 3. 小結(jié)27-29
• 討論及結(jié)論29-32
• 參考文獻(xiàn)32-34
• 綜述：miR-223在腫瘤中的生物學(xué)功能和作用34-42
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 英文略縮詞表42-43
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文43-44
• 致謝44-45

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