本文關鍵詞：膀胱癌分子標志物基質金屬蛋白酶1的可溶性表達和尿液中的活性分析

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【摘要】：通過分離人胚胎腎細胞(HEK293)中基質金屬蛋白酶1(MMP1)基因序列,利用基因工程技術在大腸桿菌中表達并純化了包涵體復性的MMP1;采用融合表達硫氧還蛋白(Thioredoxin,Trx A)的方法獲得了可溶性的MMP1-Trx A復合蛋白,在Trx A蛋白和MMP1活性中心之間引入了一個腸激酶切割位點,通過酶切作用獲得可溶性MMP1。明膠酶譜分析法對體外表達的MMP1和體內(尿液中)MMP1進行了分析比較。結果表明,Trx A蛋白能夠顯著提高MMP1的可溶性,且可溶性MMP1的明膠降解活性是復性的MMP1降解活性的1.54倍,與尿液中的MMP1的明膠酶降解活性相當。因此,明膠酶譜法是一種有效的、高靈敏的MMP1檢測方法,所表達的可溶性MMP1為小分子探針篩選提供了更可靠的分子靶點。
【作者單位】： 吉林大學中日聯誼醫(yī)院泌尿外科;吉林大學中日聯誼醫(yī)院內分泌科;吉林省軍隊離退休干部療養(yǎng)中心;
【關鍵詞】： 膀胱癌生物標志物 基質金屬蛋白酶 分子探針篩選 明膠酶譜
【分類號】：R737.14
【正文快照】： 1引言目前,由膀胱癌引起的男性致死率處于上升趨勢。盡管對膀胱癌的診斷和治療技術已有了很大提高,但膀胱癌患者的生存率仍然不佳,迫切需要針對膀胱癌術后復發(fā)的診斷技術[1]。尋找新型膀胱癌標志物,開發(fā)非侵入性、高敏感性和特異性、操作簡便、費用低廉的檢測技術,將提高膀胱

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本文編號：1039635