本文關(guān)鍵詞：SOX4在口腔扁平苔蘚相關(guān)口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)驗(yàn)證及其意義

  更多相關(guān)文章： 口腔扁平苔蘚 口腔鱗狀細(xì)胞癌 LC-MS/MS 免疫組織化學(xué) SOX4

【摘要】：目的：1.采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry, LC-MS/MS)技術(shù)篩選可能引起口腔扁平苔蘚(Oral Lichen Planus, OLP)癌變的相關(guān)高風(fēng)險(xiǎn)分子標(biāo)志物SOX4。2.從蛋白水平檢測SOX4在口腔鱗狀細(xì)胞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma, OSCC)細(xì)胞株及正常人口腔角質(zhì)上皮(Normal Human Oral Keratinocyte, NHOK)細(xì)胞株中的表達(dá)情況。3.利用免疫組化技術(shù)進(jìn)一步檢測SOX4在OLP、OSCC及口腔扁平苔蘚相關(guān)鱗狀細(xì)胞癌(Oral Lichen Planus Related Oral Squamous Cell Carcinoma, OLP-OSCC)組織中的表達(dá)變化。方法：1.實(shí)驗(yàn)中所用的福爾馬林固定石蠟包埋(Formalin-Fixed and Parrf fin-Embedded, FFPE)組織標(biāo)本為2004年-2013年間在四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院口腔科就診的單純OSCC(非OLP相關(guān)的OSCC)患者標(biāo)本27例,單純OLP患者標(biāo)本19例,OLP-OSCC患者標(biāo)本5例,、均由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院病理科提供,采用LC-MS/MS技術(shù)檢測各組標(biāo)本,分離肽段,鑒定蛋白質(zhì),獲得差異蛋白SOX4；2.進(jìn)一步利用western blotting蛋白免疫印記技術(shù)檢測SOX4蛋白在NHOK細(xì)胞株和OSCC細(xì)胞株中的表達(dá)變化；3.對(duì)19例OLP患者標(biāo)本,27例OSCC患者標(biāo)本,5例OLP-OSCC患者標(biāo)本進(jìn)行免疫組化檢測,檢測3組標(biāo)本中SOX4的表達(dá)情況。結(jié)果：1.利用LC-MS/MS技術(shù)在OLP的FFPE標(biāo)本中一共鑒定出97種蛋白,在OSCC的FFPE標(biāo)本中鑒定出135種蛋白,在OLP-OSCC的FFPE標(biāo)本中鑒定出142種蛋白,并篩選出差異蛋白SOX4,發(fā)現(xiàn)SOX4蛋白僅在OLP-OSCC組織中表達(dá);2.western blotting結(jié)果顯示SOX4在NHOK細(xì)胞株中基本不表達(dá),在OSCC細(xì)胞株中高表達(dá)；3.免疫組化結(jié)果顯示SOX4在oscc和OLP-OSCC組織的細(xì)胞核內(nèi)均呈強(qiáng)陽性表達(dá),且表達(dá)陽性率分別是96.29%及100%,SOX4在OLP組織中基本不表達(dá),陽性率為5.26%。結(jié)論：1.本實(shí)驗(yàn)成功地利用LC-MS/MS技術(shù)從OLP、OSCC和OLP-OSCC的FFPE標(biāo)本中獲得并鑒定出差異蛋白,篩選出關(guān)鍵差異蛋白SOX4；2.在蛋白水平對(duì)SOX4的表達(dá)進(jìn)行驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)SOX4在OSCC細(xì)胞及組織中高表達(dá)；3.SOX4蛋白可能作為OSCC的一種新風(fēng)險(xiǎn)標(biāo)志物,參與OLP惡變?yōu)镺SCC的過程。
【關(guān)鍵詞】：口腔扁平苔蘚 口腔鱗狀細(xì)胞癌 LC-MS/MS 免疫組織化學(xué) SOX4
【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.85
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• 英文摘要5-7
• 前言7-9
• 第一部分：SOX4在OLP、OSCC、OLP-OSCC中的表達(dá)及驗(yàn)證9-33
• 實(shí)驗(yàn)一：OLP、OSCC、OLP-OSCC組織的蛋白組學(xué)分析9-20
• 材料與方法9-15
• 結(jié)果15-20
• 實(shí)驗(yàn)二：利用western blotting蛋白免疫印跡技術(shù)檢測SOX4在不同細(xì)胞株中的表達(dá)20-24
• 材料與方法20-23
• 結(jié)果23-24
• 討論24-32
• 結(jié)論32-33
• 第二部分：SOX4在OLP、OSCC、OLP-OSCC組織中的差異表達(dá)33-46
• 1 實(shí)驗(yàn)材料33
• 2 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備33
• 3 主要試劑33
• 4 實(shí)驗(yàn)步驟33-36
• 結(jié)果36-41
• 討論41-45
• 結(jié)論45-46
• 全文總結(jié)46-48
• 參考文獻(xiàn)48-54
• 英漢縮略詞對(duì)照表54-55
• 致謝55-56
• SOX基因家族與頜面部腫瘤的研究進(jìn)展(綜述)56-69
• 參考文獻(xiàn)64-69

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本文編號(hào)：740088