本文關(guān)鍵詞：不同表面特性種植體與煙草浸提液對成骨細胞生物學(xué)性能的影響

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【摘要】：目的：通過檢測機械磨光(smooth pretreatenmt, PT)、噴砂酸蝕(sandblasted and acid etched, SLA)、陽極氧化(anodic oxidation, AD)三種經(jīng)過不同表面處理的純鈦片試件對成骨細胞增殖、細胞骨架形態(tài)及對白細胞介素-6 (interleukin-6, IL-6).核心結(jié)合因子α1(core binding factor alpha 1, Cbfα1) mRNA的表達的影響,探討種植體表面特性對種植術(shù)后早期骨改建、骨結(jié)合的影響機制。方法：用機械磨光法(PT組)、噴砂酸蝕法(SLA組)、陽極氧化法(AD組)制備3種不同表面特性的純鈦標準試件,掃描電子顯微鏡(Scanning Electronic Microscopy, SEM)觀察其表面微形貌及應(yīng)用X射線能譜儀(Energy Dispersive Spectrometer, EDS)分析表面元素構(gòu)成；應(yīng)用表面粗糙度儀檢測各組表面粗糙度,應(yīng)用接觸角測量儀檢測各組鈦片表面靜態(tài)水接觸角;將小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14 (MC3T3-E1 Sub-clone 14, MC3T3)與各組純鈦片共同培養(yǎng),以培養(yǎng)在未放置鈦片試件的24孔細胞培養(yǎng)板(tissue culture plates, TCPS)孔內(nèi)的細胞為對照組,噻唑藍(3-(4,5-diethylthiazol-2-yl)-2,5diphenyltetrazolium Bromide, MTT)法檢測共同培養(yǎng)1d、3d、5d、7d的細胞增殖率,應(yīng)用激光掃描共聚焦顯微鏡(confocal laser scanning microscope, CLSM)觀察共同培養(yǎng)1.5h、6h后成骨細胞細胞骨架的形態(tài)變化,熒光實時定量PCR (quantitative real-time PCR, RT-qPCR)法檢測共同培養(yǎng)6h、12h、24 h后IL-6和Cbfal mRNA表達情況。結(jié)果：PT組表面呈機械劃痕,SLA組呈大小結(jié)合、深淺不一的窩洞,AD組呈分布較均勻、大小不一的圓孔狀結(jié)構(gòu)。三組鈦片表面主要元素分別為Ti,Ti、Al, Ti、O。PT、SLA、AD組表面靜態(tài)水接觸角分別為54.47±3.33°、75.42±8.32°、38.91±4.00°,兩兩比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。MTT結(jié)果顯示MC3T3在各實驗組細胞增殖率均低于TCPS(P0.05),而ADPTSLA(P0.05)。細胞接種各組鈦片表面1.5 h后,各組觀察不到明顯絲狀肌動蛋白結(jié)構(gòu),SLA、AD兩組細胞出現(xiàn)突觸狀結(jié)構(gòu),SLA組較多,接種6h后,三組可見明顯絲狀肌動蛋白結(jié)構(gòu),AD組細胞形態(tài)多樣,鋪展最為充分,可見網(wǎng)絡(luò)狀骨架結(jié)構(gòu)。RT-qPCR結(jié)果顯示在同一時間點各實驗組相對TCPS組可下調(diào)IL-6 mRNA表達、上調(diào)Cbfal mRNA的表達(P0.05),而各實驗組則ADSLAPT (P0.05)。結(jié)論：AD法處理種植體表面比PT法及SLA法對促進成骨細胞增殖、促使細胞骨架早期充分鋪展、下調(diào)IL-6 mRNA表達及上調(diào)Cbfal mRNA表達顯示出更強作用,提示AD法處理種植體表面在種植早期可獲得更好更快的骨結(jié)合。目的：研究不同濃度煙草浸提液(smokeless tobacco extract,STE)對成骨細胞生物學(xué)性能的影響,探討吸煙影響種植體骨結(jié)合的病理機制。方法：以含有STE濃度為0g/L(對照組)、0.01 g/L、0.1 g/L、1g/L、5g/L、10 g/L的細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14(MC3T3-E1 Subclone 14,MC3T3),培養(yǎng)1d、 3d、5d、7d后用MTT法檢測各組細胞的增殖情況,激光掃描共聚焦顯微鏡(confocal laser scanning microscope,CLSM)觀察MC3T3細胞骨架(cytoskeleton)在不同濃度STE作用24 h后,應(yīng)用羅丹明-鬼筆環(huán)肽免疫熒光染色后的形態(tài)變化,熒光實時定量PCR(quantitative real-time PCR, RT-qPCR)檢測白細胞介素-6 (interleukin-6, IL-6)和核心結(jié)核因子(Cbfal) mRNA在不同濃度STE作用48h后的表達情況。結(jié)果：MTT結(jié)果顯示0.01～10g/L的STE可抑制MC3T3增殖(P0.05),5～10 g/L的STE可隨時間的延長而抑制MC3T3增殖(P0.05)。細胞骨架觀察顯示對照組細胞骨架呈網(wǎng)絡(luò)狀鋪展,在STE刺激下微絲解聚,細胞骨架重排,濃度升高時細胞骨架的重排更加明顯。RT-qPCR結(jié)果顯示5-10 g/L的STE可上調(diào)MC3T3的IL-6 mRNA表達(P0.05),0.1～10 g/L的STE可下調(diào)MC3T3的Cbfα1 mRNA表達(P0.05),隨STE濃度升高,作用更加明顯。結(jié)論：煙草可抑制成骨細胞增殖,影響細胞骨架正常結(jié)構(gòu),上調(diào)MC3T3細胞IL-6 mRNA的表達和下調(diào)Cbfal mRNA的表達,從而抑制成骨細胞的分化及附著,提示吸煙影響骨結(jié)合。
【關(guān)鍵詞】：表面特性 噴砂酸蝕 陽極氧化 成骨細胞 IL-6 Cbfα1 煙草 增殖 細胞骨架 IL-6 Cbfα1
【學(xué)位授予單位】：濱州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R783.6
【目錄】：

• 第一部分：不同表面特性種植體對成骨細胞生物學(xué)性能的影響4-34
• 中文摘要4-5
• Abstract5-6
• 縮略語表6-7
• 前言7-11
• 參考文獻9-11
• 材料與方法11-18
• 結(jié)果18-24
• 討論24-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻29-34
• 第二部分：煙草浸提液對成骨細胞生物學(xué)性能的影響34-53
• 中文摘要34-35
• Abstract35-36
• 縮略語表36-37
• 前言37-39
• 參考文獻38-39
• 材料與方法39-43
• 結(jié)果43-48
• 討論48-50
• 結(jié)論50-51
• 參考文獻51-53
• 文獻綜述53-62
• 參考文獻57-62
• 致謝62-63
• 研究生期間發(fā)表論文63

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：720012