本文關(guān)鍵詞：小干擾RNA沉默YAP基因?qū)θ搜乐苣じ杉?xì)胞增殖凋亡的影響

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【摘要】：目的本研究通過(guò)小干擾RNA(siRNA)沉默人牙周膜干細(xì)胞(hPDLSCs)YAP基因,觀察YAP基因沉默后對(duì)細(xì)胞增殖凋亡的影響。方法將化學(xué)合成siRNA序列以脂質(zhì)體LipofectamineTM 2000介導(dǎo)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染h PDLSCs,采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后YAP表達(dá)水平,細(xì)胞增殖活性檢測(cè)試劑盒(CCK-8)檢測(cè)siRNA在體外對(duì)h PDLSCs增殖能力的影響,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期及凋亡率的變化。采用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,設(shè)P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果在轉(zhuǎn)染48 h后h PDLSCs的YAP mRNA和蛋白水平明顯降低(P0.001),YAP蛋白表達(dá)水平在細(xì)胞被轉(zhuǎn)染48、72 h后無(wú)顯著差異,表明si RNA可以持續(xù)有效地抑制YAP的表達(dá);CCK-8增殖活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示細(xì)胞增殖活性受到抑制;沉默YAP基因后細(xì)胞早期及晚期凋亡率均增加。細(xì)胞周期檢測(cè)結(jié)果顯示細(xì)胞周期發(fā)生改變,G1及S期細(xì)胞比例增多(P0.01),G2期細(xì)胞比例明顯減少(P0.05)。結(jié)論 si RNA沉默YAP基因后h PDLSCs增殖活性降低,細(xì)胞凋亡率明顯增加,細(xì)胞的周期分布發(fā)生改變;YAP基因可以調(diào)控h PDLSCs的增殖與凋亡。
【作者單位】： 山東大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;山東省口腔組織再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;山東大學(xué)齊魯醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【關(guān)鍵詞】： 小干擾RNA YAP基因 人牙周膜干細(xì)胞 增殖 凋亡
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81300885) 山東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(ZR2013HQ052,ZR2013HM086) 山東省醫(yī)藥衛(wèi)生發(fā)展計(jì)劃基金資助項(xiàng)目(2013WS0212) 山東大學(xué)青年學(xué)者未來(lái)計(jì)劃基金資助項(xiàng)目(2015WLJH53);山東大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)基金資助項(xiàng)目(2015QY003)
【分類號(hào)】：R78
【正文快照】： 牙周膜是一個(gè)自我更新的系統(tǒng),存在一類未分化的、具有自我更新和多向分化潛能的牙周膜干細(xì)胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)[1],它是牙周組織再生和重建的“基石”。近來(lái)的研究[2]相繼證實(shí)PDLSCs是一類維持牙周組織動(dòng)態(tài)平衡和缺損修復(fù)的關(guān)鍵細(xì)胞,然而,關(guān)于PDLSCs的，

本文編號(hào)：620131