微小RNA-17在糖基化終末產(chǎn)物刺激下人牙周膜干細(xì)胞骨向分化過程中的調(diào)控作用
發(fā)布時(shí)間:2017-08-03 14:22
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【摘要】:目的檢測(cè)微小RNA-17(mir-17)在糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)刺激下人牙周膜干細(xì)胞(HPDLSCs)骨向分化過程中的表達(dá),并分析其對(duì)該過程的影響。方法體外組織塊法和有限稀釋法克隆化培養(yǎng)HPDLSCs。實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(real time PCR)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞在骨向分化過程中不同時(shí)間點(diǎn)mir-17的表達(dá);采用細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)過表達(dá)和抑制mir-17的表達(dá),real time PCR和Western blot分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后其成骨基因mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)情況。結(jié)果成骨誘導(dǎo)3、7、14 d后,對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組mir-17的表達(dá)均下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。上調(diào)mir-17后,與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組骨涎蛋白(BSP)、堿性磷酸酶(ALP)、Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子-2(Runx-2)mRNA表達(dá)水平以及Runx-2蛋白水平均明顯降低;下調(diào)mir-17后,實(shí)驗(yàn)組BSP、ALP、Runx-2 mRNA表達(dá)水平以及Runx-2蛋白水平均高于對(duì)照組。結(jié)論 AGEs通過影響HPDLSCs骨向分化過程中mir-17的表達(dá)從而抑制了HPDLSCs的骨向分化。
【作者單位】: 遵義醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院牙周科;第四軍醫(yī)大學(xué)組織工程中心;
【關(guān)鍵詞】: 糖基化終末產(chǎn)物 人牙周膜干細(xì)胞 微小RNA-
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81360168) 皖南醫(yī)學(xué)院重點(diǎn)科研項(xiàng)目培育基金資助項(xiàng)目(WK2013Z10)
【分類號(hào)】:R780.2
【正文快照】: 2.第四軍醫(yī)大學(xué)組織工程中心,西安710032微小RNA(micro RNA)是一類廣泛存在于動(dòng)物和植物中的高度保守的短序列單鏈小分子RNA,其特點(diǎn)是進(jìn)化具有高度保守性,呈簇分布,具有組織特異性、穩(wěn)定性好,表達(dá)具有時(shí)間特異性和空間特異性,通過與其靶m RNA分子的3’非編碼區(qū)互補(bǔ)結(jié)合,在翻譯,
本文編號(hào):614810
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