發(fā)布時間：2017-08-03 11:18

  本文關(guān)鍵詞：大鼠牙囊細胞膜片聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細胞三維共培養(yǎng)促進牙周組織再生的初步研究

  更多相關(guān)文章： 牙囊細胞膜片 骨髓間充質(zhì)干細胞 旁分泌效應(yīng) nHA-PLGA支架材料 牙周組織工程

【摘要】：目的：探討聯(lián)合應(yīng)用牙囊細胞(rDFCs)膜片與骨髓間充質(zhì)干細胞(rBMSCs)三維共培養(yǎng)促進牙周組織缺損重建的可行性。方法：1.rDFCs、rBMSCs的體外分離、培養(yǎng)和鑒定。2.rDFC s膜片的構(gòu)建和檢測。將第3代rDFC接種到溫度敏感培養(yǎng)皿中,用含有80μg/ml抗壞血酸成膜誘導(dǎo)液連續(xù)誘導(dǎo)2周,檢測細胞膜片生物學(xué)活性。行HE染色鑒定。3.rBMSCs復(fù)合nHA-PLGA支架材料三維聚合體的構(gòu)建與檢測。取生長良好的第3代rBMSCs按5*105密度接種于nHA-PLGA支架材料,靜置培養(yǎng)6天。掃面電鏡觀察細胞在支架上的黏附生長情況。4.rDFCs膜片包裹“rBMSCs-nHA-PLGA支架材料三維聚合體”進行體內(nèi)移植。通過rDFC細胞膜片包裹已接種有rBMSCs的nHA-PLGA支架材料組成的細胞-支架三維聚合體,并將其貼合固定于預(yù)制牙本質(zhì)片后植入裸鼠皮下,研究組織再生情況。實驗分組：1.牙本質(zhì)片+nHA-PLGA;2.牙本質(zhì)片+nHA-PLGA-rBMSCs聚合體；3.牙本質(zhì)片+nHA-PLGA-rBMSCs聚合體+rDFC細胞膜片。于第8周處死實驗對象,收集標本,分別進行HE和MASSON染色。結(jié)果：1.成功分離培養(yǎng)大鼠DFCs、BMSCs,并鑒定。2.rDFCs細胞膜片HE染色結(jié)果顯示rDFC細胞膜片具有一定的厚度,細胞層數(shù)為2-5層,細胞基質(zhì)分泌豐富。3.rBMSCs接種nHA-PLGA支架材料電鏡掃描結(jié)果顯示rBMSCs能黏附于HA-PLGA支架材料生長,且生長狀態(tài)良好。4. rDFCs細胞膜片復(fù)合nHA-PLGA支架材料與骨髓間充質(zhì)干細胞三維聚合體裸鼠皮下移植收集標本,HE及Masson染色結(jié)果顯示：組3中牙本質(zhì)片與支架材料間有一細胞條帶,有似牙周膜的纖維樣組織生成,支架材料側(cè)有類骨組織及新鮮血管形成。組2中牙本質(zhì)片與支架材料間亦有少量纖維樣組織生成,支架材料有吸收,無骨樣組織形成。組1中則未見纖維樣組織生成。結(jié)論：rDFCs膜片與接種rBMSCs的nHA-PLGA三維支架復(fù)合,形成雙細胞三維共聚體,植入裸鼠皮下,實驗結(jié)果顯示新生組織有類似牙周膜樣的纖維組織、骨樣組織及新的血管形成,這提示rDFCs與rBMSCs作為種子細胞聯(lián)合應(yīng)用,進行三維共培養(yǎng),可有效增強牙周組織再生能力,為牙周組織再生提供了新的思路。
【關(guān)鍵詞】：牙囊細胞膜片 骨髓間充質(zhì)干細胞 旁分泌效應(yīng) nHA-PLGA支架材料 牙周組織工程
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R783
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照6-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-14
• 第一部分 大鼠牙囊細胞及骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定14-29
• 第一節(jié) 大鼠牙囊細胞的分離、體外培養(yǎng)及鑒定14-22
• 1 材料和方法14-18
• 2 結(jié)果18-21
• 3 討論21-22
• 4 小結(jié)22
• 第二節(jié) 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定22-29
• 1 材料和方法22-24
• 2 結(jié)果24-27
• 3 討論27-28
• 4 小結(jié)28-29
• 第二部分 牙囊細胞細胞膜片、骨髓間充質(zhì)干細胞復(fù)合nHA-PLGA支架材料三維聚合體的制備與檢測29-36
• 第一節(jié) 大鼠牙囊細胞膜片的構(gòu)建與檢測29-33
• 1 材料和方法29-30
• 2 結(jié)果30-32
• 3 討論32-33
• 4 小結(jié)33
• 第二節(jié) 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞復(fù)合nHA-PLGA支架材料三維聚合體的構(gòu)建與檢測33-36
• 1 材料和方法33-34
• 2 結(jié)果34-35
• 3 討論35
• 4 小結(jié)35-36
• 第三部分 大鼠牙囊細胞膜片復(fù)合骨髓間充質(zhì)干細胞與nHA-PLGA三維聚合體促進牙周組織再生的體內(nèi)實驗36-46
• 1 材料與方法36-40
• 2 結(jié)果40-43
• 3 討論43-44
• 4 小結(jié)44-46
• 全文總結(jié)46-48
• 參考文獻48-52
• 文獻回顧52-63
• 參考文獻58-63
• 致謝63-64
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文64

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本文編號：614099