本文關(guān)鍵詞：基于核磁共振氫譜的骨平面種植體周圍齦溝液代謝組學(xué)分析

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【摘要】：目的：分析種植體周圍組織在健康狀態(tài)及炎癥狀態(tài)時齦溝液代謝產(chǎn)物的組成,尋找具有特征性的代謝標(biāo)記物,為臨床種植體周圍疾病預(yù)防、早期診斷和預(yù)后提供借鑒。方法：臨床收集接受牙種植術(shù)并完成上部修復(fù)1年以上的病例(共32例,32枚種植體)。根據(jù)種植體周圍組織炎癥情況分為健康種植體組(B組)、種植體周圍粘膜炎組(C組)和種植體周圍炎組(D組),各組病例數(shù)分別為13例、10例、9例。選擇健康種植體組患者口內(nèi)健康天然牙作為對照組(A組),共13例。檢查各項臨床指標(biāo),濾紙條法采集齦溝液。使用Bruker 600 MHz核磁共振儀對樣品進行檢測,獲得樣品的自由感應(yīng)衰減(free induction deca^ FID)信號。將FID信號導(dǎo)入MestReNova-6.1.1軟件進行分析,得到核磁共振氫譜圖及分段積分值。運用SIMCA-P11.5軟件中的主成分分析(principal components analysis, PCA)及正交信號濾噪(orthogonal signal correction, OSC)后使用偏最小二乘法(Partial Least Squares, PLS)對分段積分值進行統(tǒng)計學(xué)分析,結(jié)果以得分圖及散點圖表示。有差異的兩組間進一步分析變量重要性圖(Variable Importance Plot,VIP),其中VIP值大于1的化學(xué)位移對區(qū)分兩組貢獻大。使用兩獨立樣本非參數(shù)檢驗分析所得的VIP值大于1的化學(xué)位移(p0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義),并在HMDB數(shù)據(jù)庫中檢索,尋找各組間具有差異性的代謝成分及可能的潛在標(biāo)志物。結(jié)果：1.臨床指標(biāo)分析結(jié)果改良菌斑指數(shù)(modified plaque index, mPLI):C組與D組明顯高于A組與B組(p0.05)。D組與C組具有顯著性差異(p0.01)。A組與B組之間沒有顯著性差異(p0.05)。牙齦出血指數(shù)(gingival blooding index, GBI):C組與D組明顯高于A組與B組(p0.05)。C組與D組之間,A組與B組之間沒有顯著性差異(p0.05)。探診深度(probing depth, PD; peri-implant probing depth, PPD):D組的探診深度明顯高于A組、B組及C組(p0.01)。D組高于C組(p0.01),C組高于B組(p0.05),B組高于A組(p0.01)。。骨喪失量(bone loss, BL):D組的骨喪失量較A組、B組及C組明顯(p0.05),B組與C組種植體周圍骨吸收量沒有顯著差異(p0.05)。齦溝液量(peri-implant sulcus fluid, PISF):D組與C組明顯高于A組、B組(p0.05)。D組與C組之間,A組與B組之間沒有顯著差異(p0.05)。2.核磁共振氫譜檢測結(jié)果：通過核磁共振檢測得到44個FID信號,經(jīng)傅立葉轉(zhuǎn)換、相位及基線調(diào)整后,獲得的核磁共振氫譜圖比較理想。譜圖分析可知四組差異性的譜峰主要位于3.0-4.2 ppm及5.0-5.5 ppm處。3.PCA及OSC-PLS分析結(jié)果：運用PCA及OSC-PLS分析,發(fā)現(xiàn)A、B兩組之間沒有顯著性差異,B、C兩組之間,B、D兩組之間,C、D兩組之間有顯著性差異；且在VIP圖中B、C兩組間有29個化學(xué)位移值的VIP值大于1,B、D兩組間有21個化學(xué)位移值的VIP值大于1,C、D兩組間有29個化學(xué)位移值的VIP值大于1。將VIP值大于1的化學(xué)位移進行非參數(shù)檢驗,結(jié)果B、C兩組間有13個化學(xué)位移值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),B、D兩組間有11個化學(xué)位移值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),C、D兩組間有12個化學(xué)位移值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。4.差異性化學(xué)位移在HMDB數(shù)據(jù)庫中檢索結(jié)果C組與B組差異性代謝成分中含量降低的有纈氨酸；含量升高的有亮氨酸,乳酸,丙氨酸,谷氨酰胺,甘氨酸,三磷酸甘油。D組與B組差異性的代謝產(chǎn)物含量均高,有異亮氨酸,乳酸,丙氨酸,谷氨酰胺,膽堿,甘氨酸,三磷酸甘油,磷酸肌酸。D組與C組差異性代謝成分中升高的有極低密度脂蛋白,丙酸,丙氨酸,丙酮酸和鳥苷；降低的有乳酸,糖蛋白,甘氨酸,三磷酸甘油,磷酸肌酸。結(jié)論：1.將mPLI、GBI、PPD、BL及PISF結(jié)合,能很好地區(qū)分種植體周圍組織的炎癥狀況。種植體周圍組織健康或炎癥狀態(tài)時,種植體周圍齦溝液量不同,隨著炎癥程度加重,齦溝液量逐漸增加。齦溝液量能反映種植體周圍組織的健康狀態(tài)。2.種植體周圍齦溝液樣品制備簡單、核磁共振氫譜檢測方便快捷,可以獲得理想的核磁共振氫譜圖。運用PCA及OSC-PLS分析,發(fā)現(xiàn)種植體周圍組織炎癥狀態(tài)與健康時齦溝液代謝產(chǎn)物有明顯的差異,健康種植體與健康天然牙周圍齦溝液代謝產(chǎn)物沒有明顯的差異。表明基于'H-NMR代謝組學(xué)方法可用于種植體周圍疾病的鑒別,尋找差異性代謝產(chǎn)物。3.種植體周圍黏膜炎、種植體周圍炎與健康種植體之間差異性代謝產(chǎn)物主要參與三大物質(zhì)代謝,說明炎癥狀態(tài)時牙周組織代謝狀況發(fā)生改變。4.谷氨酰胺在種植體周圍黏膜炎及種植體周圍炎齦溝液內(nèi)的含量高于健康種植體,可能是種植體周圍組織炎癥程度的標(biāo)志物。鳥苷在種植體周圍炎齦溝液內(nèi)含量較種植體周圍黏膜炎高,可能是區(qū)分兩者的潛在標(biāo)志物。
【關(guān)鍵詞】：種植體周圍炎 代謝組學(xué) 核磁共振檢測 主成分分析
【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R783.6
【目錄】：

• 摘要3-7
• Abstract7-12
• 前言12-15
• 實驗一 種植體周圍組織不同狀態(tài)的臨床分析與樣本采集15-26
• 材料與方法15-19
• 結(jié)果19-23
• 討論23-25
• 結(jié)論25-26
• 實驗二 種植體與天然牙齦溝液的核磁共振氫譜檢測26-32
• 材料與方法26-28
• 結(jié)果28-29
• 討論29-31
• 結(jié)論31-32
• 實驗三 健康種植體與健康天然牙齦溝液成分的~1H-NMR分析32-38
• 材料與方法32-33
• 結(jié)果33-37
• 討論37
• 結(jié)論37-38
• 實驗四 種植體周圍組織不同狀態(tài)齦溝液成分的~1H-NMR分析38-61
• 材料與方法38
• 結(jié)果38-56
• 討論56-60
• 結(jié)論60-61
• 全文總結(jié)61-63
• 參考文獻63-70
• 英漢縮略詞對照表70-71
• 致謝71-72
• 代謝組學(xué)及其在口腔研究中的應(yīng)用(綜述)72-79
• 參考文獻76-79
• 附頁79-81

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本文編號：524449