發(fā)布時間：2025-02-05 10:45

　　目的:探討兔骨膜細(xì)胞和BMSCs在不同大小的周期性機(jī)械離心應(yīng)力刺激下向成骨細(xì)胞分化情況。方法:取兔顱骨骨膜細(xì)胞、股骨骨髓細(xì)胞體外培養(yǎng),傳至第三代,分為加力組和對照組,使用低速離心機(jī)加載離心力。加力組給予10 min/d,離心力分別為170g、210g、259g的應(yīng)力刺激。對照組置于超凈臺10min/d,常規(guī)培養(yǎng)。測定各組細(xì)胞成骨礦化能力、ALP活力及細(xì)胞增殖情況;實(shí)時熒光定量PCR法測定兩種細(xì)胞的成骨相關(guān)基因骨鈣素(OCN)、RUNX2 mRNA的相對表達(dá)量。結(jié)果:周期性機(jī)械離心力刺激后1-9d兩種細(xì)胞增殖活性、3-14d ALP活性均升高,加載后兩周加力組細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)的數(shù)目、細(xì)胞成骨相關(guān)的基因骨鈣素OCN和RUNX2 mRNA的相對表達(dá)量顯著增加。與對照組相比加力組上述各項(xiàng)指標(biāo)增長更顯著,其中骨膜細(xì)胞250g組增長情況最為顯著(P<0.05)。結(jié)論:周期性機(jī)械離心力刺激可促進(jìn)兔骨膜細(xì)胞、BMSCs體外增殖和礦化,促進(jìn)成骨相關(guān)基因OCN、RUNX2的表達(dá),其中以離心力大小為250g組最為顯著。加載等量的離心力,骨膜細(xì)胞的增殖和礦化能力較BMSCs更為顯著。

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【部分圖文】：

圖1骨膜細(xì)胞受力分析

圖1骨膜細(xì)胞受力分析Fig.1PeriostealcellstressanalysisP3代骨膜細(xì)胞骨膜細(xì)胞，每天給予10min170g機(jī)械離心

圖2A骨膜細(xì)胞

圖2A骨膜細(xì)胞圖2B單克隆來源骨膜細(xì)胞Fig.2APeriostealcellsFig.2BMonoclonalsourceperi

圖2B單克隆來源骨膜細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)如圖2A示呈梭形、三角形或多角形。經(jīng)過單克隆篩選純化后，細(xì)胞形態(tài)均一以梭形為主（圖2B）。骨膜細(xì)胞傳代后顯微鏡下觀察細(xì)胞，細(xì)胞數(shù)目明顯增多且呈旋渦狀平行生長（圖2C）。骨膜細(xì)胞經(jīng)礦化誘導(dǎo)液誘導(dǎo)培養(yǎng)3周后行鈣結(jié)節(jié)茜素紅染色呈陽性，顯微鏡下可見礦化結(jié)節(jié)（圖2D）。....

圖2C第二代骨膜細(xì)胞

圖2C第二代骨膜細(xì)胞圖2D骨膜細(xì)胞礦化誘導(dǎo)3周Fig.2CSecondgenerationFig.2DPeriostealcellmineralizaperiostealcellsfor3weeks儀分析結(jié)果顯示：如圖3，原代骨膜細(xì)胞表達(dá)CD....

本文編號：4029714