目的觀察微小RNA-200c(miR-200c)介導上皮間質(zhì)轉化在舌鱗癌細胞Tca8113遷移和侵襲中的作用機制。方法將Tca8113細胞分為3組:空白對照組、陰性對照組和實驗組。空白對照組細胞常規(guī)培養(yǎng),陰性對照組和實驗組細胞分別轉染miR-200c mimics NC和miR-200c mimics,轉染終濃度均為80 nmol·L^-1,時間為48 h。用實時熒光定量-PCR法檢測miR-200c基因的表達;用劃痕實驗和Transwell實驗分別檢測舌鱗癌Tca8113細胞的遷移和侵襲能力;用蛋白質(zhì)印跡法檢測鋅指E-盒結合同源異形盒-1(ZEB1)、E-鈣黏附蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表達。結果轉染48 h后,空白對照組、陰性對照組和實驗組miR-200c基因的表達量分別為1.00±0.03,1.03±0.06和34.03±1.92;這3組的細胞遷移距離分別為(58.32±3.98),(61.33±6.38)和(40.11±3.06)μm;這3組的穿膜細胞數(shù)分別為(103.42±6.54),(105.80±7.79)和(67.6...

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【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實驗方法
        2.1 miR-200c相關序列設計
        2.2 細胞培養(yǎng)與miR-200c轉染[3]
        2.3 細胞分組與處理方法
        2.4 以實時熒光定量-PCR法檢測轉染細胞中miR-200c基因的表達情況[4]
        2.5 以劃痕實驗檢測Tca8113細胞遷移能力[5]
        2.6 以Transwell實驗檢測Tca8113細胞侵襲能力
        2.7 以蛋白質(zhì)印跡法檢測ZEB1、E-cadherin和Vimentin蛋白的表達水平
    3 統(tǒng)計學處理
結 果
    1 轉染后對miR-200c基因表達的影響
    2 miR-200c對舌癌Tca8113細胞遷移能力的影響
    3 miR-200c對舌癌Tca8113細胞侵襲能力的影響
    4 miR-200c對ZEB1、E-cadherin和Vimentin蛋白表達的影響
討 論



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