目的:牙周病是一種由口腔菌群失調(diào)所介導(dǎo)的慢性炎癥性疾病,已成為許多全身性疾病,如冠心病、阿爾茲海默病、脊柱關(guān)節(jié)炎及炎性腸病等的危險(xiǎn)因素。一些特定的牙周致病菌,如牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis)及其菌體成分在這些疾病的發(fā)生發(fā)展過程中可能起著重要作用。有研究結(jié)果顯示,灌飼一次P.gingivalis便能夠?qū)δc道微生物群的組成和腸道屏障功能產(chǎn)生顯著影響,并導(dǎo)致腸道細(xì)菌向肝臟擴(kuò)散以及內(nèi)毒素血癥的發(fā)生,但其誘導(dǎo)腸道及全身炎癥的機(jī)制尚不明了。本實(shí)驗(yàn)采用P.gingivalis灌飼小鼠,觀察其誘導(dǎo)腸道及脾臟組織的炎癥作用,旨在探究該菌對消化系統(tǒng)的影響及其可能機(jī)制,并為牙周病與消化系統(tǒng)疾病之間的內(nèi)在聯(lián)系提供依據(jù)。方法:將P.gingivalis W83液體增菌計(jì)數(shù)后用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。10只C57BL/6小鼠適應(yīng)一周后隨機(jī)分為兩組,實(shí)驗(yàn)組灌飼1?10⁹ CFU P.gingivalis(0.2 mL PBS重懸),對照組則灌飼等量無菌PBS。每只小鼠每天稱重后灌飼一次,共灌飼6周。6周后處死小鼠,采集盲腸內(nèi)容物以及結(jié)腸及脾臟組織。提取盲腸內(nèi)容物的細(xì)菌D...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 主要試劑與儀器
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 儀器設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)菌培養(yǎng)
        2.2.2 動(dòng)物培養(yǎng)、分組及處理
        2.2.3 盲腸內(nèi)容物Illumina PE250 測序?qū)嶒?yàn)
        2.2.4 脾指數(shù)測定
        2.2.5 實(shí)時(shí)定量PCR(q RT-PCR)反應(yīng)
        2.2.6 Western blot檢測蛋白表達(dá)
        2.2.7 H&E染色
        2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 腸道菌群變化
        3.1.1 樣本多樣性分析
        3.1.2 組間(樣本間)比較分析
        3.1.3 物種組成及差異分析
    3.2 腸道炎癥表現(xiàn)
        3.2.1 小鼠結(jié)腸H&E切片結(jié)果
        3.2.2 小鼠結(jié)腸炎性細(xì)胞表面標(biāo)志物及細(xì)胞因子的表達(dá)
    3.3 脾臟炎癥表現(xiàn)
        3.3.1 小鼠的體重變化及脾指數(shù)變化
        3.3.2 小鼠脾臟細(xì)胞因子的表達(dá)
        3.3.3 小鼠脾臟IFN-γ及IRF-1 的蛋白質(zhì)表達(dá)結(jié)果
        3.3.4 小鼠脾臟中STAT1及STAT3 的磷酸化水平
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號(hào)：3811091