牙齒是人體的重要器官。牙齒的正常發(fā)育也是頜面部正常發(fā)育的必要條件。牙齒發(fā)育缺陷以及齲病、牙周疾病、外傷、腫瘤等所造成的牙齒缺損、缺失對人體身體和心理健康都有嚴重的影響。牙齒缺失后無法在體內自行修復再生,臨床多采用種植、義齒修復等手段恢復缺失牙形態(tài)與功能。隨著再生醫(yī)學的發(fā)展,牙齒組織工程再生研究雖取得了極大的進展,但仍存在如何最大程度地誘導出種子細胞的成牙潛能、如何通過基因操控加速發(fā)育過程等問題需要解決。牙齒的發(fā)育由上皮與間充質的相互作用完成,Hedgehog信號通路是介導這一過程的其中一條信號通路。以小鼠為模式動物的研究集中在Hedgehog信號通路在牙齒發(fā)育中的作用,發(fā)現(xiàn)該通路不僅參與調控牙齒早期發(fā)生,且在后期形態(tài)發(fā)生過程也有重要作用,但關于Hedgehog信號通路在牙齒再生中的作用沒有報道。哺乳類模式動物的局限性阻礙了對牙齒發(fā)育調控機制的深入研究。斑馬魚具有與哺乳動物牙齒結構和發(fā)育均有極大相似性的咽齒,同時具有活體成像追蹤和原位研究的優(yōu)勢。本課題組前期建立了轉基因魚Tg(dlx2b:Dendra2-NTR),利用Mtz/NTR系統(tǒng)構建了咽齒體內損傷再生模型。本課題在此基礎上,進一步...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
英文摘要
前言
實驗一 Hedgehog信號通路抑制后信號通路相關基因表達變化
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
            1.1.1 實驗動物
            1.1.2 實驗試劑
                1.2.2.1 LB培養(yǎng)基的配制
                1.2.2.2 原位雜交相關溶液的配制
                1.1.2.3 其他溶液的配制
            1.1.3 實驗儀器
        1.2 實驗方法
            1.2.1 Total RNA的提取
            1.2.2 反轉錄制備c DNA
            1.2.3 標準PCR
                1.2.3.1 rTaq PCR
                1.2.3.2 LA Taq PCR
            1.2.4 電轉感受態(tài)制備
            1.2.5 電轉
            1.2.6 質粒篩選、擴增及提取
                1.2.6.1 質粒篩選
                1.2.6.2 質粒擴增
                1.2.6.3 質粒提取
            1.2.7 DNA瓊脂糖凝膠電泳回收
            1.2.8 DNA連接(以PGEM-T為載體)
            1.2.9 PCR探針制備(Dig標記)
            1.2.10 探針純化
            1.2.11 原位雜交
            1.2.12 藥物處理實驗
    2 實驗結果
        2.1 成功制備反義探針
            2.1.1 設計并合成探針引物
            2.1.2 合成探針
        2.2 Cya抑制Hedgehog信號通路后信號通路相關基因變化
    3 結論
實驗二 Hedgehog信號通路抑制后斑馬魚咽齒標記基因表達變化 .
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
            1.1.1 實驗動物
            1.1.2 實驗試劑
            1.1.3 實驗儀器
        1.2 實驗方法
    2 實驗結果
    3 結論
實驗三 Hedgehog信號通路抑制后斑馬魚咽齒發(fā)育情況
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
            1.1.1 實驗動物
            1.1.2 實驗試劑
            1.1.3 實驗儀器
        1.2 實驗方法
    2 實驗結果
    3 結論
實驗四 斑馬魚咽齒再生模型的進一步探索
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗方法
    2 實驗結果
    3 結論
實驗五 Hedgehog信號通路抑制后斑馬魚咽齒再生情況
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗方法
    2 實驗結果
    3 討論
全文總結
參考文獻
文獻綜述1
文獻綜述2
    參考文獻
致謝
碩士期間發(fā)表的論文



本文編號：3790369