目的探討根吸收不同時(shí)期乳牙牙周膜干細(xì)胞(PDLSCs)通過自然殺傷細(xì)胞(NK)發(fā)揮破骨分化的調(diào)節(jié)作用。方法酶消化法和有限稀釋法分離培養(yǎng)根吸收不同時(shí)期乳牙和恒牙與PDLSCs與NK細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)。采用實(shí)時(shí)定量PCR和ELISA,檢測(cè)各組共培養(yǎng)體系中NK細(xì)胞IFN-γ表達(dá)及其差異,以及阻斷轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)后IFN-γ的表達(dá)及差異。采用實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot檢測(cè)NK細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞共培養(yǎng)體系中RAW264.7細(xì)胞核因子κB受體活化因子配體(RANKL)、骨保護(hù)素(OPG)表達(dá)。結(jié)果根吸收中期組(B)NK細(xì)胞干擾素γ(IFN-γ)表達(dá)明顯下降(P<0.05)。阻斷TGF-β后,IFN-γ表達(dá)明顯升高(P<0.05)。外源性加入NK細(xì)胞與PDLSCs共培養(yǎng)上清液后,RAW264.7細(xì)胞RANKL表達(dá)降低,OPG表達(dá)升高,RANKL/OPG比值降低。結(jié)論在乳牙生理性根吸收過程中,PDLSCs通過分泌TGF-β等細(xì)胞因子對(duì)NK細(xì)胞發(fā)揮免疫抑制作用,影響破骨分化進(jìn)程。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要材料與試劑
    1.2 方法
        1.2.1 樣本的收集與分類
        1.2.2 乳牙PDLSCs的分離培養(yǎng)
    1.3 NK細(xì)胞與乳牙PDLSCs、RAW264.7細(xì)胞共培養(yǎng)
    1.4 ELISA檢測(cè)
    1.5 實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)
    1.6 Western blot檢測(cè)
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié) 果
    2.1 生理性根吸收不同時(shí)期PDLSCs的分離培養(yǎng)
    2.2 PDLSCs 表面標(biāo)志物的鑒定結(jié)果
    2.3 不同根吸收期乳牙PDLSCs與NK細(xì)胞共培養(yǎng)后NK細(xì)胞IFN-γ變化
    2.4 抑制乳牙PDLSCs TGF-β分泌后NK細(xì)胞IFN-γ的表達(dá)情況
    2.5 與NK細(xì)胞或根吸收中期組PDLSCs共培養(yǎng)后RAW264.7細(xì)胞RANKL/OPG基因表達(dá)的檢測(cè)
3 討 論



本文編號(hào)：3782514