在生理狀況下的咀嚼運動或是咬合創(chuàng)傷期、正畸治療或是各種修復(fù)體行使功能時,不同的機械力作用于牙體并傳遞到牙周組織,引起包括牙周膜和牙槽骨在內(nèi)的牙周組織的改建。牙周膜成纖維細胞(periodontal ligament fibroblast,PDLF)作為牙周膜中的主要感受性細胞和效應(yīng)性細胞,對牙周組織的改建起著關(guān)鍵的調(diào)控作用,其增殖活性和功能狀態(tài)的改變也直接反映了牙周組織改建的狀態(tài)。因此,深入研究PDLF在機械應(yīng)力作用下的生物應(yīng)答及應(yīng)答機制是十分必要的。 目的: 本課題旨在通過四點彎曲細胞力學(xué)加載裝置對體外培養(yǎng)的人牙周膜成纖維細胞(human periodontal ligament fibroblast,HPDLF)進行加載,比較全面地探討了HPDLF在不同作用方式、不同大小和不同作用時間的動態(tài)力學(xué)微應(yīng)變范圍內(nèi)細胞增殖、功能活性及細胞膜表面整合素α5、α6、β1表達的變化。研究動態(tài)力學(xué)應(yīng)變作用下HPDLF的生物學(xué)行為的改變,并初步探討機械應(yīng)力與整合素介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的關(guān)系。

【文章頁數(shù)】：169 頁

【學(xué)位級別】：博士

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獨創(chuàng)性聲明
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英文縮略詞表
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 人牙周膜成纖維細胞的原代、傳代培養(yǎng)及實驗細胞的制備
    材料和方法
        1.主要試劑與設(shè)備
        2.方法
    結(jié)果
        1.HPDLF的原代培養(yǎng)
        2.HPDLF的傳代培養(yǎng)
        3.HPDLF的免疫細胞化學(xué)鑒定及堿性磷酸酶(ALP)染色
        4.HPDLF的形態(tài)學(xué)觀察
    討論
        1.HPDLF的原代培養(yǎng)
        2.HPDLF的傳代培養(yǎng)
        3.HPDLF的鑒定
        4.實驗細胞和加載時間參數(shù)的選擇
    小結(jié)
第二部分 體外不同動態(tài)力學(xué)應(yīng)變對人牙周膜成纖維細胞增殖活性的影響
    材料與方法
        1.材料與設(shè)備
        2.方法
    結(jié)果
        1.實驗細胞的生長及測試
        2.階段加載的動態(tài)力學(xué)應(yīng)變對HPDLF的細胞周期及增殖活性的影響
        3.梯度加載的動態(tài)力學(xué)應(yīng)變對HPDLF的細胞周期及增殖活性的影響及與階段加載的比較
    討論
        1.四點彎曲細胞力學(xué)加載裝置及應(yīng)力應(yīng)變的選擇
        2.不同動態(tài)力學(xué)應(yīng)變對HPDLF細胞周期及增殖活性的影響
    小結(jié)
第三部分 體外不同動態(tài)力學(xué)應(yīng)變對人牙周膜成纖維細胞堿性磷酸酶活性的影響
    材料與方法
        1.材料與設(shè)備
        2.方法
    結(jié)果
        1. 階段加載的動態(tài)力學(xué)應(yīng)變對HPDLF的總蛋白含量及ALP活性的影響
        2. 梯度加載的動態(tài)力學(xué)應(yīng)變對HPDLF的總蛋白含量及ALP活性的影響及與階段加載的比較
    討論
        1.PDLF中ALP活性的研究
        2.不同動態(tài)力學(xué)應(yīng)變對HPDLF的總蛋白含量及ALP活性的影響
    小結(jié)
第四部分 體外不同動態(tài)力學(xué)應(yīng)變對人牙周膜成纖維細胞膜表面整合素α₅、α₆、β₁表達的影響
    材料與方法
        1.材料與設(shè)備
        2.方法
    結(jié)果
    討論
        1. 機械應(yīng)力與整合素介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
        2. 不同動態(tài)力學(xué)應(yīng)變對HPDLF膜表面整合素α₅、α₆、β₁表達的影響
        3.不同動態(tài)力學(xué)應(yīng)變對HPDLF膜表面整合素α₅、α₆、β₁表達的影響與力學(xué)應(yīng)變對細胞增殖、功能活性的影響之間的關(guān)系
        4. HPDLF在動態(tài)力學(xué)微應(yīng)變范圍內(nèi)細胞膜表面整合素α₅、α₆、β₁表達與細胞增殖、功能活性變化與口腔臨床的聯(lián)系
    小結(jié)
全文總結(jié)
論文參考文獻
綜述
    第一部分 細胞力學(xué)研究手段
    第二部分 PDLF的研究進展
    第三部分 PDLF對機械性應(yīng)力應(yīng)變刺激的反應(yīng)
    參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3774464