體外不同動態(tài)力學應變對人牙周膜成纖維細胞整合素α 5 、α 6 、β 1 表達和細胞增殖、功能活性的影響的初步研究
發(fā)布時間:2023-03-29 20:57
在生理狀況下的咀嚼運動或是咬合創(chuàng)傷期、正畸治療或是各種修復體行使功能時,不同的機械力作用于牙體并傳遞到牙周組織,引起包括牙周膜和牙槽骨在內(nèi)的牙周組織的改建。牙周膜成纖維細胞(periodontal ligament fibroblast,PDLF)作為牙周膜中的主要感受性細胞和效應性細胞,對牙周組織的改建起著關鍵的調(diào)控作用,其增殖活性和功能狀態(tài)的改變也直接反映了牙周組織改建的狀態(tài)。因此,深入研究PDLF在機械應力作用下的生物應答及應答機制是十分必要的。 目的: 本課題旨在通過四點彎曲細胞力學加載裝置對體外培養(yǎng)的人牙周膜成纖維細胞(human periodontal ligament fibroblast,HPDLF)進行加載,比較全面地探討了HPDLF在不同作用方式、不同大小和不同作用時間的動態(tài)力學微應變范圍內(nèi)細胞增殖、功能活性及細胞膜表面整合素α5、α6、β1表達的變化。研究動態(tài)力學應變作用下HPDLF的生物學行為的改變,并初步探討機械應力與整合素介導的信號轉導的關系。
【文章頁數(shù)】:169 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
獨創(chuàng)性聲明
學位論文版權使用授權書
英文縮略詞表
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 人牙周膜成纖維細胞的原代、傳代培養(yǎng)及實驗細胞的制備
材料和方法
1.主要試劑與設備
2.方法
結果
1.HPDLF的原代培養(yǎng)
2.HPDLF的傳代培養(yǎng)
3.HPDLF的免疫細胞化學鑒定及堿性磷酸酶(ALP)染色
4.HPDLF的形態(tài)學觀察
討論
1.HPDLF的原代培養(yǎng)
2.HPDLF的傳代培養(yǎng)
3.HPDLF的鑒定
4.實驗細胞和加載時間參數(shù)的選擇
小結
第二部分 體外不同動態(tài)力學應變對人牙周膜成纖維細胞增殖活性的影響
材料與方法
1.材料與設備
2.方法
結果
1.實驗細胞的生長及測試
2.階段加載的動態(tài)力學應變對HPDLF的細胞周期及增殖活性的影響
3.梯度加載的動態(tài)力學應變對HPDLF的細胞周期及增殖活性的影響及與階段加載的比較
討論
1.四點彎曲細胞力學加載裝置及應力應變的選擇
2.不同動態(tài)力學應變對HPDLF細胞周期及增殖活性的影響
小結
第三部分 體外不同動態(tài)力學應變對人牙周膜成纖維細胞堿性磷酸酶活性的影響
材料與方法
1.材料與設備
2.方法
結果
1. 階段加載的動態(tài)力學應變對HPDLF的總蛋白含量及ALP活性的影響
2. 梯度加載的動態(tài)力學應變對HPDLF的總蛋白含量及ALP活性的影響及與階段加載的比較
討論
1.PDLF中ALP活性的研究
2.不同動態(tài)力學應變對HPDLF的總蛋白含量及ALP活性的影響
小結
第四部分 體外不同動態(tài)力學應變對人牙周膜成纖維細胞膜表面整合素α5、α6、β1表達的影響
材料與方法
1.材料與設備
2.方法
結果
討論
1. 機械應力與整合素介導的信號轉導
2. 不同動態(tài)力學應變對HPDLF膜表面整合素α5、α6、β1表達的影響
3.不同動態(tài)力學應變對HPDLF膜表面整合素α5、α6、β1表達的影響與力學應變對細胞增殖、功能活性的影響之間的關系
4. HPDLF在動態(tài)力學微應變范圍內(nèi)細胞膜表面整合素α5、α6、β1表達與細胞增殖、功能活性變化與口腔臨床的聯(lián)系
小結
全文總結
論文參考文獻
綜述
第一部分 細胞力學研究手段
第二部分 PDLF的研究進展
第三部分 PDLF對機械性應力應變刺激的反應
參考文獻
致謝
個人簡歷
本文編號:3774464
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【學位級別】:博士
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ABSTRACT
前言
第一部分 人牙周膜成纖維細胞的原代、傳代培養(yǎng)及實驗細胞的制備
材料和方法
1.主要試劑與設備
2.方法
結果
1.HPDLF的原代培養(yǎng)
2.HPDLF的傳代培養(yǎng)
3.HPDLF的免疫細胞化學鑒定及堿性磷酸酶(ALP)染色
4.HPDLF的形態(tài)學觀察
討論
1.HPDLF的原代培養(yǎng)
2.HPDLF的傳代培養(yǎng)
3.HPDLF的鑒定
4.實驗細胞和加載時間參數(shù)的選擇
小結
第二部分 體外不同動態(tài)力學應變對人牙周膜成纖維細胞增殖活性的影響
材料與方法
1.材料與設備
2.方法
結果
1.實驗細胞的生長及測試
2.階段加載的動態(tài)力學應變對HPDLF的細胞周期及增殖活性的影響
3.梯度加載的動態(tài)力學應變對HPDLF的細胞周期及增殖活性的影響及與階段加載的比較
討論
1.四點彎曲細胞力學加載裝置及應力應變的選擇
2.不同動態(tài)力學應變對HPDLF細胞周期及增殖活性的影響
小結
第三部分 體外不同動態(tài)力學應變對人牙周膜成纖維細胞堿性磷酸酶活性的影響
材料與方法
1.材料與設備
2.方法
結果
1. 階段加載的動態(tài)力學應變對HPDLF的總蛋白含量及ALP活性的影響
2. 梯度加載的動態(tài)力學應變對HPDLF的總蛋白含量及ALP活性的影響及與階段加載的比較
討論
1.PDLF中ALP活性的研究
2.不同動態(tài)力學應變對HPDLF的總蛋白含量及ALP活性的影響
小結
第四部分 體外不同動態(tài)力學應變對人牙周膜成纖維細胞膜表面整合素α5、α6、β1表達的影響
材料與方法
1.材料與設備
2.方法
結果
討論
1. 機械應力與整合素介導的信號轉導
2. 不同動態(tài)力學應變對HPDLF膜表面整合素α5、α6、β1表達的影響
3.不同動態(tài)力學應變對HPDLF膜表面整合素α5、α6、β1表達的影響與力學應變對細胞增殖、功能活性的影響之間的關系
4. HPDLF在動態(tài)力學微應變范圍內(nèi)細胞膜表面整合素α5、α6、β1表達與細胞增殖、功能活性變化與口腔臨床的聯(lián)系
小結
全文總結
論文參考文獻
綜述
第一部分 細胞力學研究手段
第二部分 PDLF的研究進展
第三部分 PDLF對機械性應力應變刺激的反應
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