目的:探索人唾液腺腺樣囊性癌不同細胞系分泌的外泌體對其癌細胞增殖、遷移及侵襲能力的影響。方法:使用ExoEasy Maxi Kit (Qiagen,Hilden,Germany)試劑盒提取外泌體,通過透射電鏡、納米粒子跟蹤分析(NTA)、蛋白免疫印跡Western blotting技術(shù)鑒定提取的腫瘤外泌體。并在外泌體的干預(yù)下,采用CCK-8法、平板克隆形成實驗、細胞劃痕及Transwell實驗檢測細胞增殖、遷移及侵襲能力。結(jié)果:透射電鏡及納米粒子跟蹤分析(NTA)檢測顯示:提取的外泌體主要直徑在30～150 nm之間,其形態(tài)呈典型的"茶托型"結(jié)構(gòu);Western blotting檢測到外泌體特異性標志蛋白CD9、CD63及TSG101呈陽性表達。CCK-8法及平板克隆實驗顯示唾液腺腺樣囊性癌來源的外泌體可增強其癌細胞增殖能力(P<0.05)。細胞劃痕及Transwell實驗表明其外泌體可增強癌細胞遷移及侵襲能力(P<0.05)。結(jié)論:唾液腺腺樣囊性癌不同細胞系均分泌外泌體。唾液腺腺樣囊性癌外泌體可增強其癌細胞增殖、遷移及侵襲能力。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑及儀器
    1.2 實驗分組
    1.3 腺樣囊性癌細胞株SACC-lm(高轉(zhuǎn)移株)、SACC-83傳代培養(yǎng)及外泌體提取
    1.4 外泌體鑒定
        1.4.1 外泌體透射電鏡鑒定
        1.4.2 外泌體NTA粒徑分析鑒定
        1.4.3 Western blotting鑒定外泌體特異性蛋白
    1.5 CCK-8實驗檢測細胞增殖能力
    1.6 平板克隆形成實驗
    1.7 劃痕實驗檢測細胞遷移能力
    1.8 Transwell實驗檢測細胞遷移及侵襲能力
    1.9 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 兩種SACC細胞系外泌體的鑒定
    2.2 CCK-8實驗及平板克隆形成實驗檢測細胞增殖能力
    2.3 細胞劃痕實驗檢測細胞遷移能力
    2.4 Transwell細胞遷移及侵襲實驗結(jié)果
3 討論



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