人的骨骼一生都處于不斷的改建過程中,當受到外力刺激時骨骼會發(fā)生適應性的變化,外力刺激可以促進新骨的形成,包括臨床常見的牽張成骨、正畸牙齒移動過程中牙槽骨的改建等。正畸牙齒移動過程中,牙齒存在兩個主要的受力面,壓力面骨質吸收,張力面骨質增生,從而使牙齒移動到目標位置。在這一過程中,成骨細胞發(fā)揮了重要作用。臨床上,有許多牙周病患者需要通過正畸治療集中牙齒間隙,為后期修復治療做準備。由于牙周病患者的牙周支持組織薄弱,因此在矯治過程中矯治力大小的控制尤為重要,機械應力對骨組織的改建具有促進作用,但是炎癥狀態(tài)下,骨骼改建的力學效應更加復雜。有研究發(fā)現機械牽張力可通過RhoA/ROCK信號通路調節(jié)成骨細胞的分化,但是,炎性環(huán)境下,機械牽張力對成骨細胞生長特性以及細胞內RhoA/ROCK信號通路的影響尚不清楚。該實驗在實驗組前期研究結果的基礎上,以1ug/ml Pg-LPS（牙齦卟啉單胞菌來源的脂多糖）刺激小鼠成骨樣細胞（MC3T3-E1）,模擬建立體外口腔炎性環(huán)境,應用Flex-cell 5000應力加載系統給成骨細胞施加8%牽張應力刺激,觀察細胞的生長情況,通過RT-PCR、Western bl... 

【文章頁數】：58 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
前言
第一章 緒論
    1.1 牙周病炎癥因子與成骨細胞的相互作用
        1.1.1 牙周病與炎癥因子
        1.1.2 炎癥因子與成骨破骨作用
    1.2 機械應力對成骨細胞的調控作用
        1.2.1 細胞應力加載模式
        1.2.2 成骨細胞力學轉導相關信號通路
        1.2.3 應力刺激與成骨細胞RhoA/ROCK的關系
第二章 機械牽張力對Pg-LPS誘導下成骨細胞生長的影響
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗試劑
        2.1.2 實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 Pg-LPS工作液的配置
        2.2.3 Cell Counting Kit-8(CCK-8)法檢測牽張應力對Pg-LPS刺激下成骨細胞增殖活性的響
        2.2.4 Hoechst33258 染色觀察械牽張力對Pg-LPS誘導下成骨細胞凋亡的影響
        2.2.5 鬼筆環(huán)肽Phalloidin-TRITC染色觀察牽張應力對Pg-LPS刺激下成骨細胞骨架的影響
        2.2.6 統計學分析
    2.3 結果
        2.3.1 機械牽張力對Pg-LPS刺激下成骨細胞活性的影響
        2.3.2 機械牽張力對Pg-LPS刺激下成骨細胞凋亡的影響
        2.3.3 機械牽張力對Pg-LPS刺激下成骨細胞骨架的影響
    2.4 討論
第三章 牽張應力對LPS刺激下成骨細胞內RhoA、ROCK、Runx-2表達的影響
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗試劑
        3.1.2 實驗儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 細胞培養(yǎng)
        3.2.2 牽張應力加載Pg-LPS、C3 處理的成骨細胞
        3.2.3 細胞蛋白的提取
        3.2.4 蛋白免疫印跡
        3.2.5 提取細胞總RNA
        3.2.6 實時熒光定量聚合酶反應
        3.2.7 統計學分析
    3.3 結果
    3.4 討論
小結
參考文獻
在學期間的研究成果
致謝
臨床病例



本文編號：3732688