目的:觀察血小板衍生生長(zhǎng)因子BB（platelet derived growth factor BB, PDGFBB）基因修飾人牙周膜干細(xì)胞（human periodontal stem cells, h PDLSCs）的生物學(xué)特性,探討PDGFBB對(duì)hPDLSCs細(xì)胞增殖、遷移及誘導(dǎo)成骨的影響。方法:分離并擴(kuò)增h PDLSCs,免疫熒光染色鑒定細(xì)胞表面標(biāo)志和成骨誘導(dǎo)分化能力。通過(guò)慢病毒載體介導(dǎo)PDGFBB基因轉(zhuǎn)染hPDLSCs,轉(zhuǎn)染后,采用CCK-8及劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞增殖、遷移的影響。利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析PDGFBB基因轉(zhuǎn)染后hPDLSCs細(xì)胞內(nèi)成骨相關(guān)基因和成血管相關(guān)基因VEGF mRNA的表達(dá)水平。采用SPSS 22.0軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:采用組織塊培養(yǎng)及有限稀釋法成功獲得hPDLSCs。PDGFBB轉(zhuǎn)染hPDLSCs后,細(xì)胞形態(tài)良好,與空病毒組和未轉(zhuǎn)染組相比,轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖及遷移能力顯著上升,OPN、COL-1和VEGF mRNA表達(dá)水平顯著上調(diào)（P＜0.05）。結(jié)論:慢病毒載體能在體外將PDGFBB基因轉(zhuǎn)入hPDLSCs,獲得持續(xù)、穩(wěn)定表達(dá)。PDGFB... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與儀器
    1.2 人牙周膜干細(xì)胞的培養(yǎng)和鑒定
        1.2.1 hPDLSCs分離、培養(yǎng)及克隆篩選
        1.2.2 hPDLSCs表面標(biāo)志物鑒定
        1.2.3 hPDLSCs成脂分化能力檢測(cè)
    1.3 PDGFBB慢病毒轉(zhuǎn)染人牙周膜干細(xì)胞及分組
        1.3.1 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        1.3.2 劃痕實(shí)驗(yàn)分析細(xì)胞遷移能力
        1.3.3實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)3組細(xì)胞VEGF、OPN、COL-1和OCN的m RNA表達(dá)水平
        1.3.4 3組牙周膜干細(xì)胞成骨分化能力檢測(cè)
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 人牙周膜干細(xì)胞分離、培養(yǎng)、鑒定和克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.2 人牙周膜干細(xì)胞成脂分化結(jié)果
    2.3 PDGFBB慢病毒轉(zhuǎn)染人牙周膜干細(xì)胞結(jié)果
    2.4 PDGFBB基因轉(zhuǎn)染后細(xì)胞增殖能力檢測(cè)結(jié)果
    2.5 PDGFBB基因修飾促進(jìn)h PDLSCs遷移
    2.6 PDGFBB基因轉(zhuǎn)染后促進(jìn)h PDLSCs細(xì)胞成骨相關(guān)基因OPN、OCN、COL-1和成血管相關(guān)基因VEGF的表達(dá)
    2.7 慢病毒轉(zhuǎn)染前、后人牙周膜干細(xì)胞成骨能力比較
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]rhPDGF-BB對(duì)糖尿病大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞遷移的促進(jìn)作用[J]. 王德芳,劉燕,王玨.  上�？谇会t(yī)學(xué). 2018(06)
[2]p38 MAPK通路調(diào)控BMP9誘導(dǎo)hPDLSCs成骨分化的體外研究[J]. 張奕,胡婷,葉國(guó),向?qū)W熔,胡娜.  上海口腔醫(yī)學(xué). 2018(06)
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