目的探究血小板反應(yīng)蛋白（TSP）-1對人牙周膜成纖維細胞（hPDLFs）表達白細胞介素（IL）-6和環(huán)氧化酶（COX）-2的影響。方法選取12只6周齡雄性SD大鼠隨機均分為正常組和牙周炎組,絲線結(jié)扎法建立實驗性牙周炎大鼠模型;Western blot檢測大鼠牙齦組織中TSP-1的蛋白表達;qRT-PCR檢測每組牙齦組織中TSP-1、IL-6、COX-2 mRNA表達。組織塊法分離培養(yǎng)hPDLFs,構(gòu)建攜帶TSP-1基因的重組腺病毒（Ad-TSP-1-GFP）,同時以空載腺病毒（Ad-GFP）作為陰性對照,轉(zhuǎn)染細胞;或在hPDLFs培養(yǎng)上清液中添加重組TSP-1蛋白（rTSP-1）。ELISA檢測hPDLFs表達IL-6的蛋白水平;Western blot檢測hPDLFs表達COX-2的蛋白水平;qRT-PCR檢測IL-6、COX-2 mRNA表達水平。結(jié)果與正常組比較,實驗性牙周炎大鼠牙齦組織中TSP-1蛋白和mRNA表達升高,且IL-6和COX-2 mRNA表達升高。與Ad-GFP組比較,Ad-TSP-1-GFP轉(zhuǎn)染hPDLFs可明顯提高細胞TSP-1蛋白和mRNA水平,同時可促進h... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗動物
    1. 2 材料
    1.3 方法
        1.3.1 實驗性大鼠牙周炎模型建立
        1.3.2 骨喪失量測量
        1.3.3 hPDLFs的分離培養(yǎng)
        1.3.4 hPDLFs的免疫組化鑒定
        1.3.5 P. gingivalis LPS(10 μg/ml)誘導(dǎo)hPDLFs
        1.3.6 攜帶TSP-1基因的重組腺病毒(Ad-TSP-1-GFP)體外轉(zhuǎn)染hPDLFs
        1.3.7 rTSP-1體外刺激hPDLFs
        1.3.8 qRT-PCR檢測mRNA水平
        1.3.9 ELISA檢測細胞培養(yǎng)上清液中IL-6水平
        1.3.10 Western blot檢測蛋白水平
    1.4 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 大鼠實驗牙ABL檢測
    2.2 大鼠牙齦組織中TSP-1、IL-6、COX-2的表達
    2.3 hPDLFs的免疫組化鑒定
    2.4 P. gingivalis LPS促進hPDLFs TSP-1表達
    2.5 細胞轉(zhuǎn)染效率
    2.6 Ad-TSP-1-GFP 轉(zhuǎn)染hPDLFs的效果
    2.7 TSP-1促進hPDLFs IL-6的表達
    2.8 TSP-1促進hPDLFs COX-2的表達
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]β-隱黃素對實驗性牙周炎大鼠氧化應(yīng)激的影響[J]. 崔曉宇,王國芳,李小紅,張朋,李冬雪,軒亞茹.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2018(10)



本文編號：3726793