目的：研究不同濃度β-glycerophosphate對DPSCs向成牙本質(zhì)細(xì)胞分化的影響；探討在不同時(shí)間點(diǎn)，分化成熟相關(guān)蛋白DSP和MEPE在不同濃度β-glycerophosphate誘導(dǎo)下表達(dá)的變化，從而找到誘導(dǎo)DPSCs分化的最佳β-glycerophosphate濃度。 方法：分離培養(yǎng)人DPSCs，免疫熒光法檢測干細(xì)胞特異性抗體STRO-1的表達(dá)；用不同的誘導(dǎo)液誘導(dǎo)DPSCs分別向脂肪細(xì)胞，神經(jīng)細(xì)胞，成骨細(xì)胞分化，證實(shí)其多向分化能力。向脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)3周后行油紅染色，神經(jīng)向誘導(dǎo)后檢測nestin表達(dá)是否陽性，向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)21天用AlizarinRedS檢測礦化結(jié)節(jié)形成情況；用四種濃度的β-glycerophosphate及不含β-glycerophosphate的礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)液培養(yǎng)DPSCs，MTT法檢測四種濃度的β-glycerophosphate對細(xì)胞增殖是否有抑制作用；分別在第7，14，21，28天提取各組細(xì)胞蛋白，Westernblot檢測MEPE和DSP的表達(dá)情況。培養(yǎng)至28天時(shí)，AlizarinRedS礦化結(jié)節(jié)染色，CPC提取法比較各組形成礦化結(jié)節(jié)的量。 ... 

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
1、文獻(xiàn)綜述
    1.1 細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白（MEPE）
        1.1.1 MEPE 的分子結(jié)構(gòu)
        1.1.2 MEPE 在骨發(fā)生上的研究現(xiàn)狀
        1.1.3 與牙形成相關(guān)的 MEPE7
        1.1.4 不同培養(yǎng)條件下的 MEPE 表達(dá)
    1.2 牙本質(zhì)涎磷蛋白（ DSPP ）
    1.3 DPSCs 向成牙本質(zhì)細(xì)胞的分化及礦化
    1.4 牙本質(zhì)形成
    1.5 小結(jié)
2、前言
3、材料與方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
        3.1.1 取材
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器設(shè)備
        3.1.4 試劑的配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 分離培養(yǎng)人 DPSCs
        3.2.2 傳代培養(yǎng) DPSCs
        3.2.3 免疫熒光染色鑒定 DPSCs
        3.2.4 DPSCs 多向分化能力
        3.2.5 不同濃度β- glycerophosphate 誘導(dǎo) DPSCs 向成牙本質(zhì)細(xì)胞的分化
        3.2.6 細(xì)胞毒性分析
        3.2.7 Western blot 分析
        3.2.8 礦化誘導(dǎo)及定量
        3.2.9 數(shù)據(jù)分析
4、結(jié)果
    4.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.1.1 分離培養(yǎng)人牙髓干細(xì)胞
        4.1.2 礦化誘導(dǎo)
    4.2 體外鑒定 DPSCs 多向分化能力及免疫顯型
    4.3 細(xì)胞毒性分析
    4.4 DPSCs 分化過程中的蛋白表達(dá)
    4.5 礦化分析
5、討論
6、結(jié)論
8、參考文獻(xiàn)
研究成果



本文編號：3715796