反義寡核苷酸（Antisense oligodeoxyribonucleotide，AS-ODN）以堿基配對(duì)的形式，借助氫鍵結(jié)合至其互補(bǔ)序列，抑制靶基因轉(zhuǎn)錄和／或翻譯，從而調(diào)節(jié)遺傳信息由基因到蛋白質(zhì)問的傳遞，與生物基因的表達(dá)、調(diào)控密切有關(guān)。該方法直接利用目標(biāo)基因核苷酸序列信息設(shè)計(jì)反義序列，并依靠其高度的序列專一性，特異的使靶基因沉默或表達(dá)下調(diào)，能夠明確靶基因的功能，并達(dá)到治療效果，已經(jīng)廣泛用于腫瘤、病毒感染、器官移植排斥反應(yīng)等疾病的治療研究。反義技術(shù)操作簡(jiǎn)單，高效、快速、低毒，并且實(shí)驗(yàn)周期短，可進(jìn)行高通量篩選分析，具有明顯的量效關(guān)系，可作為候選藥物。雖然反義現(xiàn)象天然存在于原核細(xì)胞中，但是細(xì)菌細(xì)胞壁妨礙AS-ODN進(jìn)入細(xì)胞中，胞漿中不能達(dá)到有效濃度，限制了它在原核細(xì)胞中的應(yīng)用。隨著對(duì)AS-ODN進(jìn)行化學(xué)修飾的不斷改進(jìn)及載體研究的發(fā)展，AS-ODN的穩(wěn)定性和通過細(xì)胞壁的能力有了極大地提高，已成功用于下調(diào)細(xì)菌毒力因子、抗性基因和基礎(chǔ)基因的表達(dá)，降低了細(xì)菌的毒性，增加了細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感性，抑制了細(xì)菌的生長(zhǎng)。靶向細(xì)菌毒力因子的AS-ODN僅作用于單一病原菌（或限于幾種病原菌），有利于減少對(duì)宿... 

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
第一部分 設(shè)計(jì)gtfB反義寡核苷酸并優(yōu)化其轉(zhuǎn)化變形鏈球菌的條件和方法
    實(shí)驗(yàn)一 設(shè)計(jì)、合成gtfB反義寡核苷酸序列
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
    實(shí)驗(yàn)二 優(yōu)化寡核苷酸轉(zhuǎn)化變形鏈球菌的條件和方法
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 gtfB反義寡核苷酸對(duì)變形鏈球菌GTF-Ⅰ表達(dá)及活性的影響
    實(shí)驗(yàn)一 RT-PCR觀察gtfB反義PS-ODN對(duì)GTF-Ⅰ mRNA水平的影響
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
    實(shí)驗(yàn)二 gtfB反義脫氧寡核苷酸對(duì)變形鏈球菌葡糖基轉(zhuǎn)移酶表達(dá)及活性的影響
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 體外觀察gtfB反義寡核苷酸對(duì)變形鏈球菌生物學(xué)行為的影響
    實(shí)驗(yàn)一 體外觀察gtfB反義寡核苷酸對(duì)變形鏈球菌蔗糖依賴性粘附的影響
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
    實(shí)驗(yàn)二 gtfB反義寡核苷酸對(duì)變形鏈球菌生物膜形成能力的影響
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
小結(jié)
個(gè)人簡(jiǎn)歷與研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]抗菌劑作用后變形鏈球菌生物膜細(xì)胞活力觀察[J]. 唐子圣,朱敏,劉正.  臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2005(07)
[2]納米基因防齲疫苗的構(gòu)建及其免疫大鼠的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 衛(wèi)克文,樊明文,吳補(bǔ)領(lǐng).  武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2005(03)
[3]反義核酸研究進(jìn)展[J]. 王武,楊勝利,季文明,呂陳峰.  無錫輕工大學(xué)學(xué)報(bào). 2001(05)
[4]質(zhì)粒介導(dǎo)變形鏈球菌轉(zhuǎn)化的研究[J]. 邊專,樊明文,彭彬,范兵.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 1996(01)



本文編號(hào)：3714393