反義寡核苷酸（Antisense oligodeoxyribonucleotide，AS-ODN）以堿基配對的形式，借助氫鍵結(jié)合至其互補序列，抑制靶基因轉(zhuǎn)錄和／或翻譯，從而調(diào)節(jié)遺傳信息由基因到蛋白質(zhì)問的傳遞，與生物基因的表達、調(diào)控密切有關(guān)。該方法直接利用目標基因核苷酸序列信息設(shè)計反義序列，并依靠其高度的序列專一性，特異的使靶基因沉默或表達下調(diào)，能夠明確靶基因的功能，并達到治療效果，已經(jīng)廣泛用于腫瘤、病毒感染、器官移植排斥反應等疾病的治療研究。反義技術(shù)操作簡單，高效、快速、低毒，并且實驗周期短，可進行高通量篩選分析，具有明顯的量效關(guān)系，可作為候選藥物。雖然反義現(xiàn)象天然存在于原核細胞中，但是細菌細胞壁妨礙AS-ODN進入細胞中，胞漿中不能達到有效濃度，限制了它在原核細胞中的應用。隨著對AS-ODN進行化學修飾的不斷改進及載體研究的發(fā)展，AS-ODN的穩(wěn)定性和通過細胞壁的能力有了極大地提高，已成功用于下調(diào)細菌毒力因子、抗性基因和基礎(chǔ)基因的表達，降低了細菌的毒性，增加了細菌對抗菌藥物的敏感性，抑制了細菌的生長。靶向細菌毒力因子的AS-ODN僅作用于單一病原菌（或限于幾種病原菌），有利于減少對宿... 

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學位級別】：博士

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前言
文獻回顧
第一部分 設(shè)計gtfB反義寡核苷酸并優(yōu)化其轉(zhuǎn)化變形鏈球菌的條件和方法
    實驗一 設(shè)計、合成gtfB反義寡核苷酸序列
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
    實驗二 優(yōu)化寡核苷酸轉(zhuǎn)化變形鏈球菌的條件和方法
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
    討論
    參考文獻
第二部分 gtfB反義寡核苷酸對變形鏈球菌GTF-Ⅰ表達及活性的影響
    實驗一 RT-PCR觀察gtfB反義PS-ODN對GTF-Ⅰ mRNA水平的影響
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
    實驗二 gtfB反義脫氧寡核苷酸對變形鏈球菌葡糖基轉(zhuǎn)移酶表達及活性的影響
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
    討論
    參考文獻
第三部分 體外觀察gtfB反義寡核苷酸對變形鏈球菌生物學行為的影響
    實驗一 體外觀察gtfB反義寡核苷酸對變形鏈球菌蔗糖依賴性粘附的影響
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
    實驗二 gtfB反義寡核苷酸對變形鏈球菌生物膜形成能力的影響
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
    討論
    參考文獻
小結(jié)
個人簡歷與研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]抗菌劑作用后變形鏈球菌生物膜細胞活力觀察[J]. 唐子圣,朱敏,劉正.  臨床口腔醫(yī)學雜志. 2005(07)
[2]納米基因防齲疫苗的構(gòu)建及其免疫大鼠的實驗研究[J]. 衛(wèi)克文,樊明文,吳補領(lǐng).  武漢大學學報(醫(yī)學版). 2005(03)
[3]反義核酸研究進展[J]. 王武,楊勝利,季文明,呂陳峰.  無錫輕工大學學報. 2001(05)
[4]質(zhì)粒介導變形鏈球菌轉(zhuǎn)化的研究[J]. 邊專,樊明文,彭彬,范兵.  牙體牙髓牙周病學雜志. 1996(01)



本文編號：3714393