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miRNA34a外泌體構(gòu)建及其抑制口腔鱗癌細(xì)胞增殖的體外實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2022-02-24 11:38
  目的:運(yùn)用加載miRNA34a的外泌體治療口腔鱗狀細(xì)胞癌。方法:采用超速離心的方法從HEK293細(xì)胞的培養(yǎng)上清液中提取外泌體,結(jié)合透射電子顯微鏡、納米粒子追蹤分析儀、Western blot實(shí)驗(yàn)鑒定外泌體,進(jìn)而利用共孵育的方法將疏水性修飾的miRNA34a模擬物加載到外泌體中,以構(gòu)建含miRNA34a的外泌體(exo-miRNA34a),倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察加載效率。將exo-miRNA34a接種于口腔鱗癌細(xì)胞HN6中,利用激光共聚焦顯微鏡觀(guān)察HN6細(xì)胞對(duì)外泌體的攝取,結(jié)合CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HN6細(xì)胞增殖的變化。結(jié)果:在HEK293細(xì)胞培養(yǎng)上清液提取物中觀(guān)察到40~150 nm大小的小囊泡,囊泡粒徑分布峰值為97.9 nm;腫瘤易感基因101蛋白(TSG101)和CD63表達(dá)陽(yáng)性,鈣聯(lián)蛋白(Calnexin)表達(dá)陰性。疏水改性的mi RNA34a可有效加載到外泌體中,載藥率約為47%,載藥后外泌體粒徑增加,其完整性不受影響。exo-miRNA34a可以進(jìn)入HN6細(xì)胞中,對(duì)HN6細(xì)胞的增殖具有明顯抑制作用(P<0.05)。結(jié)論:外泌體介導(dǎo)的mi RNA34a可明顯抑制口腔鱗癌HN6... 

【文章來(lái)源】:口腔生物醫(yī)學(xué). 2020,11(02)

【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)

【部分圖文】:

miRNA34a外泌體構(gòu)建及其抑制口腔鱗癌細(xì)胞增殖的體外實(shí)驗(yàn)研究


載藥前后的外泌體形狀(透射電子顯微鏡)

粒徑分布,粒徑分布,電子顯微鏡,體形


外泌體粒徑分布

粒徑分布,細(xì)胞,粒徑分布


Western blot檢測(cè)細(xì)胞和外泌體中CD63、TSG101和Calnexin的表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]miR-34a通過(guò)下調(diào)SATB2抑制口腔鱗癌增殖、遷移和侵襲的初步研究[J]. 葛昕,詹甜甜,高潔,張勃昕,王晨星,李懷奇,葉金海.  口腔生物醫(yī)學(xué). 2018(01)



本文編號(hào):3642645

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