PELP1在牙周膜成纖維細(xì)胞中的表達(dá)及與細(xì)胞增殖和成骨分化的相關(guān)性研究
發(fā)布時(shí)間:2020-12-26 04:01
牙槽骨是體內(nèi)容易發(fā)生骨質(zhì)疏松的骨組織,主要表現(xiàn)為牙槽骨高度下降、骨密度降低,從而導(dǎo)致牙齒松動(dòng)與脫落,直接影響患者牙齒與牙周組織的健康及口腔治療。牙周組織中功能最重要的是牙周膜成纖維細(xì)胞,不僅維持牙周膜的形態(tài)和功能,更具有成骨潛力。研究證明,牙周膜成纖維細(xì)胞在牙周組織的成骨分化中擔(dān)當(dāng)重要角色。作為雌激素靶器官的牙周組織,與雌激素和雌激素受體的關(guān)系非常密切。雌激素水平的降低,使破骨細(xì)胞數(shù)目顯著增加,牙槽骨吸收加劇,引起牙槽骨骨密度的降低。雌激素水平升高后,破骨細(xì)胞數(shù)目得到抑制,骨密度增高。雌激素受體也與牙周組織關(guān)系密切。實(shí)驗(yàn)證明,在牙周病大鼠模型中,雌激素受體表達(dá)量是顯著下降的。如果抑制了雌激素受體的表達(dá),牙周膜細(xì)胞的骨向分化能力顯著降低。脯氨酸-胱氨酸-亮氨酸蛋白1(praline-,glutamic acid-,and leucine-rich protein1,PELP1)是雌激素和雌激素受體的重要調(diào)節(jié)因子,在雌激素很多靶器官中表達(dá),如腦、乳腺、子宮等。PELP1的表達(dá)具有差異性,可以表達(dá)在胞核,也可以表達(dá)在胞漿,其表達(dá)與細(xì)胞的生物學(xué)功能相一致。胞核中表達(dá)的PELP1主要參與基因信號(hào)...
【文章來源】:中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
縮略語(yǔ)表
中文摘要
Abstract
前言
文獻(xiàn)回顧
一、雌激素信號(hào)通路的研究進(jìn)展
二、 PELP1 的結(jié)構(gòu)與功能
三、雌激素、雌激素受體及調(diào)節(jié)因子 PELP1 與牙周組織的健康
實(shí)驗(yàn)一 PELP1 在大鼠牙周組織中的表達(dá)及其影響因素
1 材料
1.1 主要試劑
1.2 主要儀器
2 方法
2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
2.2 大鼠標(biāo)本取材與處理
2.3 大鼠牙周組織石蠟切片及免疫組化
2.4 RT-PCR
2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 大鼠血清雌激素水平
3.2 PELP1 在大鼠牙周組織中的表達(dá)
3.3 PELP1 陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)分析
3.4 PELP1mRNA 在大鼠牙周組織中的表達(dá)
4 討論
實(shí)驗(yàn)二 PELP1在大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞中的表達(dá)及與細(xì)胞增殖和成骨分化的相關(guān)性研究
1 材料
1.1 主要試劑
1.2 主要儀器
2 方法
2.1 rPDLFCs 的分離培養(yǎng)
2.2 免疫細(xì)胞化學(xué)染色
2.3 RT-PCR
2.4 Western blot
2.5 MTT
2.6 si-PELP1 轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的 rPDLFCs
2.7 rPDLFCs 的成骨誘導(dǎo)
2.8 Realtime-PCR 檢測(cè)
2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 rPDLFCs 的鑒定
3.2 PELP1 在 rPDLFCs 中的表達(dá)
3.3 瞬轉(zhuǎn) siRNA 后細(xì)胞中 PELP1 的表達(dá)
3.4 PELP1mRNA 及蛋白的表達(dá)與細(xì)胞增殖及成骨分化的關(guān)系
3.5 PELP1 與細(xì)胞成骨分化相關(guān)性的驗(yàn)證
4 討論
實(shí)驗(yàn)三 PELP1在人牙周炎牙周膜成纖維細(xì)胞中的表達(dá)及與細(xì)胞增殖和成骨分化的相關(guān)性研究
1 材料
1.1 主要試劑
1.2 主要儀器
2 方法
2.1 I-hPDLCs 的分離培養(yǎng)
2.2 免疫細(xì)胞化學(xué)染色
2.3 RT-PCR
2.4 Western blot 檢測(cè)
2.5 I-hPDLFCs 細(xì)胞的成骨誘導(dǎo)
2.6 Realtime-PCR 檢測(cè)
2.7 MTT 檢測(cè)
2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 hPDLFCs 的生長(zhǎng)與鑒定
3.2 PELP1 在 H-hPDLFCs 和 I-hPDLFCs 中的表達(dá)
3.3 PELP1 與健康和牙周炎組織來源的牙周膜細(xì)胞生長(zhǎng)的相關(guān)性
3.4 PELP1與兩種牙周膜成纖維細(xì)胞成骨分化的相關(guān)性
4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果
致謝
本文編號(hào):2939000
【文章來源】:中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
縮略語(yǔ)表
中文摘要
Abstract
前言
文獻(xiàn)回顧
一、雌激素信號(hào)通路的研究進(jìn)展
二、 PELP1 的結(jié)構(gòu)與功能
三、雌激素、雌激素受體及調(diào)節(jié)因子 PELP1 與牙周組織的健康
實(shí)驗(yàn)一 PELP1 在大鼠牙周組織中的表達(dá)及其影響因素
1 材料
1.1 主要試劑
1.2 主要儀器
2 方法
2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
2.2 大鼠標(biāo)本取材與處理
2.3 大鼠牙周組織石蠟切片及免疫組化
2.4 RT-PCR
2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 大鼠血清雌激素水平
3.2 PELP1 在大鼠牙周組織中的表達(dá)
3.3 PELP1 陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)分析
3.4 PELP1mRNA 在大鼠牙周組織中的表達(dá)
4 討論
實(shí)驗(yàn)二 PELP1在大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞中的表達(dá)及與細(xì)胞增殖和成骨分化的相關(guān)性研究
1 材料
1.1 主要試劑
1.2 主要儀器
2 方法
2.1 rPDLFCs 的分離培養(yǎng)
2.2 免疫細(xì)胞化學(xué)染色
2.3 RT-PCR
2.4 Western blot
2.5 MTT
2.6 si-PELP1 轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的 rPDLFCs
2.7 rPDLFCs 的成骨誘導(dǎo)
2.8 Realtime-PCR 檢測(cè)
2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 rPDLFCs 的鑒定
3.2 PELP1 在 rPDLFCs 中的表達(dá)
3.3 瞬轉(zhuǎn) siRNA 后細(xì)胞中 PELP1 的表達(dá)
3.4 PELP1mRNA 及蛋白的表達(dá)與細(xì)胞增殖及成骨分化的關(guān)系
3.5 PELP1 與細(xì)胞成骨分化相關(guān)性的驗(yàn)證
4 討論
實(shí)驗(yàn)三 PELP1在人牙周炎牙周膜成纖維細(xì)胞中的表達(dá)及與細(xì)胞增殖和成骨分化的相關(guān)性研究
1 材料
1.1 主要試劑
1.2 主要儀器
2 方法
2.1 I-hPDLCs 的分離培養(yǎng)
2.2 免疫細(xì)胞化學(xué)染色
2.3 RT-PCR
2.4 Western blot 檢測(cè)
2.5 I-hPDLFCs 細(xì)胞的成骨誘導(dǎo)
2.6 Realtime-PCR 檢測(cè)
2.7 MTT 檢測(cè)
2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 hPDLFCs 的生長(zhǎng)與鑒定
3.2 PELP1 在 H-hPDLFCs 和 I-hPDLFCs 中的表達(dá)
3.3 PELP1 與健康和牙周炎組織來源的牙周膜細(xì)胞生長(zhǎng)的相關(guān)性
3.4 PELP1與兩種牙周膜成纖維細(xì)胞成骨分化的相關(guān)性
4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果
致謝
本文編號(hào):2939000
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