骨的吸收與重建是一個(gè)重要且復(fù)雜的生命過(guò)程，而在其過(guò)程中常伴有多種偶聯(lián)及信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制。目前越來(lái)越多的學(xué)者立足于EphB4-ephrinB2介導(dǎo)的雙向信號(hào)傳導(dǎo)在骨穩(wěn)態(tài)中的作用。而牙齦卟啉單胞菌脂多糖（Pg-LPS）作為牙周病致病菌的主要毒力因子，在導(dǎo)致牙槽骨局部骨穩(wěn)態(tài)的失衡而致其骨吸收方面起非常重要的作用。但目前有關(guān)Pg-LPS對(duì)EphB4-ephrinB2受體配體家族作用的研究較少。為探討牙槽骨吸收的關(guān)鍵因子脂多糖對(duì)成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞間的EphB4-ephrinB2雙向信號(hào)傳導(dǎo)通路作用，本實(shí)驗(yàn)擬在體外建立小鼠頜骨成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞共育體系，采用RT-PCR、Western blot、免疫熒光等方法，觀察脂多糖介導(dǎo)下破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞間EphB4-ephrinB2信號(hào)分子在基因水平和蛋白水平表達(dá)的特點(diǎn)，闡明EphB4-ephrinB2雙向信號(hào)通路調(diào)控下引起牙槽骨局部骨穩(wěn)態(tài)失衡的分子機(jī)制，將為牙周病防治提供新思路。主要得出以下結(jié)論：1.經(jīng)破骨細(xì)胞細(xì)胞液誘導(dǎo)4-5天后RAW264.7單核/巨噬細(xì)胞細(xì)胞系表達(dá)ephrinB2配體蛋白；2.75ng/ml LPS對(duì)成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞間的EphB4-... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
前言
中文摘要
Abstract
目錄
英文縮寫詞表
第一章 緒論
    1.1 Eph-ephrin 受體配體家族及其所介導(dǎo)的雙向信號(hào)傳導(dǎo)通路
        1.1.1 Eph-ephrin 受體配體家族
        1.1.2 Eph-ephrin 信號(hào)傳導(dǎo)模式
    1.2 Eph-ephrin 受體配體家族在骨穩(wěn)態(tài)中的作用
        1.2.1 骨穩(wěn)態(tài)
        1.2.2 Eph-ephrin 受體配體家族在骨穩(wěn)態(tài)中的作用
    1.3 牙齦卟啉單胞菌脂多糖
    1.4 牙齦卟啉單胞菌脂多糖與骨代謝
    1.5 立題意義
    1.6 綜述
第二章 小鼠下頜骨成骨細(xì)胞的提取及鑒定
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        2.1.1 主要設(shè)備及試劑
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法及操作步驟
    2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.1 原代新生小鼠下頜骨成骨細(xì)胞的形態(tài)
        2.2.2 成骨細(xì)胞的鑒定
        2.2.3 不同濃度 LPS 對(duì)小鼠頜骨成骨細(xì)胞增殖的影響
第三章 破骨細(xì)胞的獲得與鑒定及小鼠成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞共育體的建立
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 主要儀器及試劑
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法及操作步驟
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.1 倒置顯微鏡下觀察
        3.2.2 破骨細(xì)胞 TRAP 染色結(jié)果
第四章 在基因水平檢測(cè) LPS 對(duì)小鼠成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞間EphB4-ephrinB2 雙向傳導(dǎo)信號(hào)的影響
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料及方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料及設(shè)備
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.2.1 RT-PCR 實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果
        4.2.2 Realtime-PCR 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第五章 在蛋白水平檢測(cè) LPS 對(duì)小鼠成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞間EphB4-ephrinB2 雙向傳導(dǎo)信號(hào)的影響
    5.1 Western Blot
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
        5.1.2 實(shí)驗(yàn)方法及操作步驟
    5.2 免疫熒光單染
        5.2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    5.3 免疫熒光雙染
        5.3.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
        5.3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.4.1 Western Blotting 檢測(cè)未經(jīng)誘導(dǎo)的 RAW264.7 細(xì)胞與誘導(dǎo)后的 RAW264.7 細(xì)胞 ephrinB2 蛋白的表達(dá)
        5.4.2 免疫熒光檢測(cè)未經(jīng)誘導(dǎo)的 RAW264.7 細(xì)胞與誘導(dǎo)后的RAW264.7 細(xì)胞 ephrinB2 蛋白的表達(dá)
        5.4.3 Western Blotting 檢測(cè) LPS 對(duì)成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞直接共育體 EphB4 表達(dá)的影響
        5.4.4 免疫熒光檢測(cè) LPS 對(duì)成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞直接共育體EphB4 表達(dá)的影響
        5.4.5 Western Blotting 檢測(cè) LPS 對(duì)成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞直接共育體 ephrinB2 表達(dá)的影響
        5.4.6 免疫熒光檢測(cè) LPS 對(duì)成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞直接共育體ephrinB2 表達(dá)的影響
    5.5 小結(jié)
第六章 討論
    6.1 實(shí)驗(yàn)方法
        6.1.1 新生小鼠下頜骨成骨細(xì)胞的提取
        6.1.2 破骨細(xì)胞的誘導(dǎo)
    6.2 LPS 對(duì)成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞間 EphB4 受體的促進(jìn)作用
    6.3 LPS 對(duì)成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞間 ephrinB2 受體的作用
第七章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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